支原体污染细胞培养的检测方法

由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种。1、观察细胞的形态和生长特征支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2、分离培养法大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不够高。3、DNA结合荧光素染色法此法简便、价廉,但若细胞片制备不当则结果难以判断。4、电子显微镜和免疫电子显微镜法此法较准确,但受条件限制,时间长,敏感性不高。5、间接免疫荧光法和免疫印迹简便、快速、特异性强,如果应用单克隆抗体试剂,效果会更好。6、PCR技术快速、敏感性高,但若条件控制不当容易出现假阴性和假阳性。7、其他方法放射性核素掺入法、放射自显影法、基因探针法等。......阅读全文

细胞培养支原体污染来源

支原体(Mycoplasma)是一种大小介于细菌和病毒之间(0.1 - 0.6μm),没有细胞壁、并独立生活原核生物,形态呈高度多形性,呈圆形、丝状或梨形。由于支原体直径较小,进行除菌过滤是,约1%的支原体可以直接穿过常规的0.22μm的微孔除菌滤膜,造成细胞的支原体污染。支原体污染的来源包括:(1

细胞培养污染之支原体污染检测

细胞培养 中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等,说起支原体污染,估计细胞培养的同学就开始犯愁了,细胞培养的老手都知道,支原体污染非常不易察觉,怎么才能检测支原体污染呢?1、细菌 、真菌污染的检测(1)肉眼观察 细菌 、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生,而且增生迅速,

支原体污染细胞培养的检测方法

由于支原体种类不同,应采取不同的方法进行检测,常用的方法有如下几种。1、观察细胞的形态和生长特征支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,其病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2、分离培养法大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不

细胞培养中支原体污染的检测

细胞培养中最令人头疼的问题之一是微生物的污染,而支原体的污染更给人一种看不见摸不着的感觉。长期以来,这个问题一直令细胞培养工作者困惑。在人们日常生活的工作环境中,支原体可以说无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。国内外研究表明造成细胞培

预防支原体污染的细胞培养方法

检查培养基是否污染由于支原体污染的主要来源之一是从实验室外带进来的细胞,建议使用可靠的细胞库提供的细胞。 如果存在应当隔离的支原体污染的细胞,而没有单独的细胞培养箱的情况下,在隔离期内,应使用有盖的塑料细胞培养瓶。不要使用培养板和未密封的培养皿。对怀疑有污染的培养的细胞,应在每天所有其他细胞培养工作

细胞培养中支原体污染对细胞培养的危害

1.   支原体污染的普遍性支原体污染是细胞培养领域遇到的性问题,据文献报道,综合美国食品药品监督管理局(FDA)、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据,世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。该数据未统计中国大陆的数据,但可以确定,大陆地区的支原体污染比例与此相当,或更严

细胞培养过程中的支原体污染?

支原体污染支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2μm并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性.可为圆形、丝状或梨形。

支原体污染会对细胞培养有何影响?

支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数, 代谢及研究之任一数据。故进行实验前,必须确认细胞为mycoplasma-free,实验结果之数据方有意义。

支原体污染会对细胞培养有何影响?

支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数,代谢及研究之任一数据。故进行实验前,必须确认细胞为mycoplasma-free,实验结果之数据方有意义。

细胞培养中如何控制支原体的污染

在细胞培养工作中可采用以下几点来控制支原体的污染问题:(1)预防为主:细胞培养实验室应制定严格的管理制度,按照规范的实验程序操作。(2)从可靠来源引进、使用细胞,特别是知名的信誉,良好的专门机构,如ATCC、基础医学细胞中心等,这些机构对细胞质量进行一系列检测。(3)定期对实验室中的培养物进行支原体

支原体污染会对细胞培养有何影响?

支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数、代谢及研究之任一数据。故进行实验前,必须确认细胞为mycoplasma-free,实验结果之数据方有意义。 

细胞培养中支原体污染的检测方法

细胞培养中最令人头疼的问题之一是支原体的污染。在人们日常生活工作环境中,支原体无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。据说有11%的细胞株均受到不同程度的支原体污染,更有统计细胞培养中支原体感染发生率达到63%,对实验结果会产生不可预期的

细胞培养中支原体污染的检测方法!

细胞培养中令人头疼的问题之一是支原体的污染。在人们日常生活工作环境中,支原体无处不在,它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。据说有11%的细胞株均受到不同程度的支原体污染,更有统计细胞培养中支原体感染发生率达到63%,对实验结果会产生不可预期的影

细胞培养中支原体污染的有什么表现

支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落。

细胞培养中支原体污染的有什么表现

支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落。

细胞培养中支原体污染的特点及检验

支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中心有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和

细胞培养过程中的判断支原体污染的依据?

支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构.其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似,但微绒毛电子密度比支原体小,且中央无颗粒群或中央束。支原体代谢需固醇类物质、部分种类需要精氨酸、氧气、葡萄糖,每一种支

细胞培养中支原体污染的特点及检验的笔记

最近看大家常提到支原体污染,就翻了翻书,做了些笔记,现在贴出来和大家分享:支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其

细胞培养中支原体污染的特点及检验的笔记

最近看大家常提到支原体污染,就翻了翻书,做了些笔记,现在贴出来和大家分享:支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其

真核细胞培养时支原体污染表现以及解决方式

 支原体是一种特殊的微生物,在哺乳动物(包括人类)、爬行动物、昆虫和植物中广泛分布。它是小、较为简单的可自我复制的原核生物,大小仅为0.2-0.8um。支原体的基因组仅为0.58-2.20Mb,其自身生物合成能力有限,因此大部分营养物质都要依赖于宿主。  在真核细胞培养过程中,支原体感染发生率达到6

支原体污染对细胞培养的影响与解决方法

很多科研小伙伴在细胞培养的过程中,总是出现各种各样的情况和问题,比如,细胞漏液、不贴壁、细胞有黑点、支原体污染、不增殖、细胞老化变形、复苏存活率低等等,这些问题对于参与细胞实验的小伙伴来说,是急需解决的大问题,好不容易买来的细胞,刚刚进行培养传代,就出现了以上的各种问题,这样的情况通常都会令小伙伴们

细胞培养过程中发生支原体污染的处理办法?

(1) 丢弃所有已经污染的细胞和培养基;(2) 使用支原体清除试剂擦拭培养箱及超净工作台;(3) 培养试剂中加入支原体清除试剂;(4) 注意戴帽子和口罩;(5) 尽可能使用一次性耗材及成品培养基;

细胞培养过程中的支原体污染的来源与控制方法

Mycoplasma国内主要有三种译名,医学文献译为“支原体”(分枝原体,枝原体,类菌质体),动物医学文献译为“霉形体”或“支原体”,台湾、香港则译为微浆菌。支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。自然界分布广泛,种类多,有80余种,分为两个属:一为支原体属(Myco

细胞培养不生长,传代扩不起来,是不是就是支原体污染?

细胞培养不生长或传代扩不起来的原因不一定是支原体污染,可能还有其他因素导致。1. 支原体污染确实会影响细胞生长和传代扩增,因为支原体污染会导致细胞状态变差,影响细胞分裂和增殖。但肉眼很难区分细胞是否被支原体污染,需要通过支原体检测来确诊。2. 其他因素包括细胞自身的问题,如细胞代数过高、细胞老化、细

支原体污染及检测

(1)支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。 目前通过对国内100余株/系细胞的检测,形势不容乐观。污染率达30% ~ 60% 。

支原体污染要怎样去除

1.     支原体污染预防根据可能的支原体污染来源,在体外细胞培养过程中,要严格控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和实验器材、耗材要保证无菌;在不影响实验结果的前提下,可在细胞培养基中加入适量的特定抗生素;发现支原体污染后,要清除支原体,防微杜渐。2.     支原体污染的去除及预防因为支原体

细胞培养箱内的支原体怎么检测

可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备: 基本配方为Difco PPLO broth(60%),马血清(20%),15%酵母膏溶液(10%),10x储存液(10%)。由于培养时间长,可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊(1:2000)至培养基中以防止其他细菌的污染。 1

细胞培养箱内的支原体怎么检测

可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。培养基准备: 基本配方为Difco PPLO broth(60%),马血清(20%),15%酵母膏溶液(10%),10x储存液(10%)。由于培养时间长,可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊(1:2000)至培养基中以防止其他细菌的污染。 1

细胞支原体污染的PCR检测

支原体菌株来源:M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体M.FermentaneATCC19989 发酵支原体M.SalivariumATCC23064唾液支原体M.HominisATCC23114人型支原体M.OraleATCC23714口腔支原体M.HyorhinisATCC290

支原体污染的特点及检验

支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物.约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性.可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构.其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于