间接放射免疫法检测待测样品mTNF基本原理和操作方法
肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一类能直接导致某些肿瘤细胞坏死的细胞因子,有TNF-α与TNF-β两种类型。TNF-α主要来源于活化的单核/巨噬细胞,TNF-β主要来源于活化的T淋巴细胞。虽然两型TNF的细胞来源不同,结构也不同,但均能与不同的受体结合,故具有极其相似的生物学活性。TNF可进入体液成为分泌型(或可溶性)TNF(sTNF),也可与细胞膜结合成为跨膜型(或膜结合型)TNF(mTNF)。应用标记的抗TNF特异性抗体,利用抗原抗体反应检测TNF即为TNF的免疫学检测法。可检测待测样品中sTNF的精确定量,也可检测mTNF,还可区分TNF-α与TNF-β两种类型。主要方法有ELISA法、RIA法、FIA、FCM或FACS法等。一、基本原理选用两种抗体,一抗为抗 TNF抗体,可与细胞膜表面的mTNF特异性结合;二抗为抗一抗抗体,且标记放射性同位数125I,可与一抗特异性结合,通过测定其放射......阅读全文
放射免疫沉淀法的技术特点
中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定 义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
简述放射免疫分析法的优缺点
RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结
化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的比较
摘要 本文采用放射免疫法和化学发光免疫法平行测定60例临床送检血清标本的甲胎蛋白(AFP)含量,结果表明两法的相关性良好(r=0.995),但化学发光免疫法的精密度和准确性均优于放射免疫法。 关键词 化学发光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白 临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法,而近年发展
间接检眼镜检查法的临床意义
异常结果:动脉如有搏动,则为病理现象。脉络膜色素较多而聚于血管之间,即呈现出红色和褐色相间的条纹状,称豹纹状眼底。 需要检查的人群:屈光不正或屈光介质被破坏者。
间接检眼镜检查法的注意事项
不合宜人群:青光眼患者。 检查前禁忌:情绪紧张。 检查时要求:检查周边眼底时,最好予以扩大瞳孔,嘱病人将眼球转向一侧,检者亦应将头适当倾斜。
间接检眼镜检查法的检查过程
检查时,被检者采取坐位或卧位,检查距离为50cm左右,检者用拇、食指持+13D--28D的透镜(为了提高像质,现多采用非球面透镜),以无名指及小指靠在被检者额部作为依托,并提起上睑,透镜在被检者眼前4-9cm 范围内移动,直至见到眼底影像为止。
关于间接测热法的基本信息介绍
间接测热法是指测定人体消耗掉的氧气量和生成的二氧化碳量和排出的尿氮量可以计算出人体所生成的热能的方法。 由于食物在人体内氧化时,需消耗吸入空气中的氧,生成二氧化碳,释放出能量。因此,从测定时用气袋收集一定时间内受试者的全部呼出气,分析呼出气中的含氧量和二氧化碳量,将呼出气与吸入的空气对比,即可
间接检眼镜检查法的正常值
视盘:位于眼球后极偏鼻侧约3-4mm,直径约1.5mm,呈椭圆形、色淡红,但颞侧颜色稍淡。 血管:这些血管分枝彼此不相吻合。动脉色鲜红,管径细而较直,中央有鲜明的反射光条,宽约为管径的1/3。静脉色暗红,管径稍粗而较弯曲,管腔的反射较暗而细小。动脉与静脉的比例约为3:4或2:3。在视盘内,有时
间接免疫荧光法有哪些优缺点
优点:可直接看到细胞核,判断疾病的方向缺点:培养荧光操作人员大约需要半年时间,成本高(需要荧光显微镜);不能量化指标,周期长,半定量。
间接免疫荧光法的操作步骤介绍
1、细胞准备与固定 (1)单层生长细胞:取对数生长细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中,置二氧化碳培养箱培养1-3天,待细胞接近长成单层,取出盖玻片,进入PBS(0.01 mol/L,pH7.4)洗2次,然后根据实验目的,
免疫酶标方法(直接法、间接法、PAP法和双PAP法)
一、直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色结
新型间接酶联免疫法检测磺胺类药物
实验原理62.5mgTS,34.5mgN-羟基琥珀酰亚胺酯和45.3mg 1,3-二环己基碳二亚胺在1.5ml的干燥的N,N-二甲基酰胺中反应18h, 4o C,通过滤过作用移除生成的二环乙基脲沉淀物,得到滤液。滤液被加到含有65mgLPH 2ml的PBS中,用NaOH调节PH到7.6。
用原子吸收法间接分析水中的氯化物
参考国外文献的基础上,用原子吸收法间接分析水中的氯化物在国外经常有所报道。实际工作中建立了这种方法,方便可靠。1原理本方法通过往样品中加入过量已知量的硝酸银溶液,银离子与氯离子沉淀后,测出剩余银离子的量,可以差量算出样品中的氯离子的量。2干扰及消除饮用水中含有的各种物质在通常数量下不发生干扰,但溴化
化学发光免疫法(CLIA)较放射免疫法(RIA)的优越性分析
【摘要】目的:分析研讨化学发光免疫法(CLIA)较放射免疫法(RIA)的优越性。方法:此研究共讨论108例血清样本,均为我院2015年6月至2016年7月期间住院及门诊患者,用LIAISON全自动化学发光仪和放射免疫计数GC-911-r测定其血清AFP,并进行精密度实验、对比实验、线性实验、回收
什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知
什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知
什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知
放射免疫分析法的优缺点分别有哪些?
RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。 本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影
关于放射免疫分析法的基本信息介绍
1960年美国化学家R.S.耶洛和S.A.贝尔森提出此法,耶洛因此于1977年获得诺贝尔生理学或医学奖。 她从小酷爱自然科学。在大学里,她热衷于物理学,却致力於医学研究,她工作於纽约市布隆克斯区退伍军人医院,致力于「胜太荷尔蒙的放射免疫分析」。居里夫人自传和核子物理学家美籍意大利人费米的讲演,
实际生活中放射免疫分析法的应用
此法用于在内分泌学中测定胰岛素、生长激素、甲状旁腺激素、血管紧张素、催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。在临床免疫学上测定免疫球蛋白 G、免疫球蛋白E及抗脱
简述放射免疫分析法的基本原理
使放射性标记抗原和未标记抗原(待测物)与不足量的特异性抗体竞争性地结合,反应后分离并测量放射性而求得未标记抗原的量。用反应式表示为: *Ag为同位素标记的抗原,与未标记的抗原Ag有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与抗体Ab结合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab复合物,在一定反应时间后达到动态平衡
HCG在放射免疫法中的测定实验原理和方法
一、原理HCG是放射性同位素标记技术与抗原抗体免疫反应相结合的超微量分析法,是用放射性核素(如 125I/3H)标记的极微量的示踪抗原*(Ag*)/抗体*(Ab*)与待测抗原Ag/抗体Ag)一起来竞争结合有限的特异性抗体(Ab)/抗原(Ag),故称饱和分析或竞争抑制法,其反应过程为:Ag*•Ab
放射免疫分析法的优缺点分别有哪些?
RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等,常可测至皮摩尔。本法虽然也用放射性物质,但一般都是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物,此示踪物的放射性强度极低,一般不会对实验者引起辐射损伤。本法的缺点是有时会出现交叉反应、假阳性反应,组织样品处理不够迅速,不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果等
放射免疫分析法原理及操作注意事项
放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。一、竞争性RIA,又称传统RIA主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag +已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物AgAb+未知抗原与抗体复合物A
间接凝集反应实验——间接凝集抑制
实验方法原理若使可溶性抗原与相应抗体先混合,充分作用后再加入有关的免疫微球,因抗体已被可溶性抗原结合,不再出现免疫微球的被动凝集现象,叫间接凝集抑制试验,临床化验检查中常用的免疫妊娠试验就是一种间接凝集抑制试验。实验材料孕妇尿试剂、试剂盒胶乳抗原仪器、耗材滴管实验步骤1. 用清洁滴管在反应板上滴加
间接凝集反应实验——间接血球凝集
实验方法原理间接血球凝集试验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性,与相应的抗血清相遇可产生凝集现象。间接血凝抗原的制备可用加碱或加热的方法使菌体中的多糖物质浸出,去除类脂以免干扰红血球的吸附
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)检查过程及不适宜人群有哪些
检查过程 检查方法:测定抗双链dSDNA的方法有多种,如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。 不适宜人群 无检查适应症者禁做此项检查。