什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知的抗体(或抗原)即可推知另一个未知抗原(或抗体)的存在。1. 直接免疫荧光法 直接免疫荧光法是利用荧光色素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以鉴定未知抗原。本法具有操作简单、时程短、特异性高的优点,但也 存在缺点如不能检查抗体,敏感性较差。(1)在标本上滴加荧光素标记抗体,放入湿盒中。37℃温育30min。(2)PBS 冲洗后,再用PBS分三缸浸泡,每缸3min。(3)PBS浸泡1~2min,风干。(4)缓冲甘油封片。在荧光显微镜下观察。进行直接免疫荧光法时应注意:①温育时一定要将玻片放在湿盒中,以防液体蒸发。②用PBS浸泡时应不......阅读全文

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知

什么是直接免疫荧光法和间接免疫荧光法

免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知

间接免疫荧光法原理

间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后,再用荧光素标记的第二抗体(抗抗体)与抗原-抗体复合物中第一抗体结合,洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光,以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统,缺点是易产生非特异性荧光。

活细胞间接免疫荧光法

一.实验器材:1.  器材:40孔塑料板、40孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2.  试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免疫球蛋白、PBS(pH7.2-7.4)、甘油、叠氮钠(NaN3)等二.方法(微量法)1.  将分离好的单个核细胞用PBS洗2次,1000rpm每次10分钟

直接免疫荧光法测抗原

基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,

间接免疫荧光法检测自身抗体

    自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号

间接免疫荧光法检测自身抗体

自身抗体诊断的标准技术是间接免疫荧光法,其特点是特异性强,阳性与阴性样品的信号强度对比明显,通过显微镜观测能够精确地判断组织或细胞内荧光的分布。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模式,所有与此典型模式不相关区域的染色被认为是非特异性染色。即使偶尔伴有强的非特异性染色,但弱的特异性信号也能够被

间接免疫荧光法的操作步骤介绍

  1、细胞准备与固定  (1)单层生长细胞:取对数生长细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中,置二氧化碳培养箱培养1-3天,待细胞接近长成单层,取出盖玻片,进入PBS(0.01 mol/L,pH7.4)洗2次,然后根据实验目的,

间接免疫荧光法有哪些优缺点

优点:可直接看到细胞核,判断疾病的方向缺点:培养荧光操作人员大约需要半年时间,成本高(需要荧光显微镜);不能量化指标,周期长,半定量。

免疫荧光法是什么?

  免疫萤光法首先将将萤光物质标记在抗原(或抗体)上,通过免疫反应检测抗体(或抗原),如果二者对应,形成带有萤光物质的免疫复合物不被水冲掉,在萤光显微镜下可见萤光。如果二者不对应,不形成免疫复合,萤光物质被水冲掉,在显微镜下不显萤光。

免疫荧光法是什么

免疫萤光法首先将将萤光物质标记在抗原(或抗体)上,通过免疫反应检测抗体(或抗原),如果二者对应,形成带有萤光物质的免疫复合物不被水冲掉,在萤光显微镜下可见萤光.如果二者不对应,不形成免疫复合,萤光物质被水冲掉,在显微镜下不显萤光.

免疫荧光法介绍

免疫荧光法(Immunofluorescence method)是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(

酵母免疫荧光法

实验步骤展

什么是“直接”和“间接”清洗?

什么是“直接”和“间接”清洗?直接清洗通常是指工件在装满清洗液的清洗槽内清洗,工件通常装在带孔的托盘或工装篮内。直接清洗的局限性是需要选择那些不会损伤超声波清洗槽的清洗液。间接清洗则是将待清洗的工件放在烧杯或不带孔的托盘内,烧杯或托盘内装有溶液,而不是直接装在清洗槽内。当选择间接清洗时,确认槽内的水

免疫荧光法的操作指南

免疫荧光法的操作指南Immunoflourescent Assay (indirect) IFA immunoInflorescent assay IFA serology (looking for Ab.) used mainly in some autoimmune diseases Respi

直接免疫荧光法检查非淋球菌尿道炎的介绍

  直接免疫荧光法是将特异的衣原体单克隆抗体用荧光素标记后来检查标本中衣原体,如标本中有衣原体抗原(包涵体或原体),则和抗体结合,在荧光显微镜下可见苹果绿色的荧光。一张涂片中衣原体原体数在10个以上时,结果判断为阳性。本试验的敏感性和特异性可分别达到80%^-95%。

双夹心免疫荧光法的定义

中文名称双夹心免疫荧光法英文名称sandwich immunoflurescence定  义用免疫荧光法进行的双抗体夹心试验。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

双夹心免疫荧光法的定义

中文名称双夹心免疫荧光法英文名称sandwich immunoflurescence定  义用免疫荧光法进行的双抗体夹心试验。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

比较免疫荧光法和ELISA的最适检测对象?

  ELSIA用于抗原或抗体含量及理化性质的检测,适用于临床方面 血清等  免疫荧光法是检测有没有抗体,根据已知抗原(或抗体)推知另一个未知的抗体(或抗原)。适用于细菌、病毒、衣原体、支原体等病原体

B-淋巴细胞膜表面免疫球蛋白的检查实验_直接免疫荧光法

实验方法原理SmIg 是B 细胞的抗原识别受体,也是B 细胞特异的表面标志,用直接免疫荧光法可检查出SmIg。用荧光素标记的抗Ig 抗体,在一定条件下与淋巴细胞混合,荧光素标记的抗Ig 抗体可以与B 细胞表面的Ig 结合,在荧光显微镜下观察可见B 细胞膜上出现荧光。此方法可用来鉴定B 淋巴细胞。实验

亚细胞定位的免疫荧光法介绍

  1、直接法  将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。  2、间接法  如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应

双夹心免疫荧光法的操作程序

中文名称双夹心免疫荧光法英文名称sandwich immunoflurescence定  义用免疫荧光法进行的双抗体夹心试验。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

间接免疫荧光和直接免疫荧光染色方法的异同

免疫荧光细胞化学方法的原理是根据抗原抗体反应的规律,把已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗原或抗体,然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。方法具体种类有直接法、间接法、夹心法和补体法等。在荧光显微镜下,根据其形成复合物所发的荧光,来确定判断检测物的来源、性质和部位。 1、直接法:这是最早

推荐间接免疫荧光法为原发性胆汁性肝硬化一线筛查方法

    原发性胆汁性肝硬化(Primary biliary cirrhosis,PBC)是一种自身免疫介导的慢性胆汁淤积性肝脏疾病,以血清中高滴度的抗线粒体抗体(antimitochondrial antibodies,AMA)为主要特征。PBC 的诊断主要基于以下标准:(1)血清碱性磷酸酶升高;(

免疫酶标方法(直接法、间接法、PAP法和双PAP法)

一、直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色结