双向电泳(twodimensionalelectrophoresis,2DE)2
2．[操作步骤] 1. 将研磨管离心一分钟（不低于12000×g）弃上清。 2. 加入裂解液（200-300ul）充分vortex. 3. 再加入样品鼠脑组织（低于100mg）充分研磨。然后可以再加入裂解液至1ml.. 4. 将组织悬液离心5-10min(高于12000g)去除树脂和细胞碎片。 5. 收集上清。 3．[试剂准备] 1.研磨管 2.裂解液：称取尿素4.8g、CHAPS0.4g、PMSF100mg，用纯水溶解至10ml，分装成500μl 于-20℃储存，使用时，每500μl液体加DTT5mg,IPGbuffer10μl。 三、蛋白质定量 1．[基本原理]定量作为生物实验室的日常工作之一，具有非常重要的意义。在蛋白质组学研究中，我们常常需要对蛋白质进行快速定量。无论是对蛋白质表达谱的定量比较还是蛋白质理化性质的分析，都建立在准确的定量这一基础之上。蛋白质的......阅读全文
DNA酶切及凝胶电泳（gel－electrophoresis）2
三、试剂 1、5×TBE电泳缓冲液：配方见第一章。 2、6×电泳载样缓冲液：0.25% 溴粉蓝，40%(w/v) 蔗糖水溶液，贮存于 4℃。 3、溴化乙锭(EB)溶液母液:将EB配制成10mg/ml，用铝箔或黑纸包裹容器，储于 室温即可。 第三节 操作步骤 一、
Analysis－of－Proteins－using－Small－Format－2D－Gel－Electrophoresis
Preparation of protein samplesIntracellular virus proteinsThe following method has been developed principally for the analysis of intracellular protei
Delta2D－和－Proteomweaver：两款2DE分析工具的性能评估
电泳学杂志《Electrophoresis》于2010年31卷发表了一篇Decodon公司的2-DE（2D凝胶电泳）分析软件Delta2D (D2D)与另一款同类分析软件Proteomweaver (PW)性能比较的文章，题目是：《Delta2D 和 Proteomweaver：两款2-DE
Capillary－Electrophoresis
Capillary electrophoresis is a very sensitive analytical technique. Sample components are separated within a fused silica capillary using one of sever
electrophoresis－of－DNA
Agarose Gel Electroporesis of DNA Making the gel: 1. Place casting platform with well former sideways in gel stand where you wish to pour
Protein－Electrophoresis
DefinitionAmino acids, nucleotides, polypeptides, and other compounds in a colloidal state can be separated by the application of external voltages wh
Chromatin－Electrophoresis
Dr. William H. Heidcamp, Biology Department, Gustavus Adolphus CollegeExercise 10.4 - Chromatin ElectrophoresisLEVEL IIMaterials 14 M Urea6 M NaCl0.05
RNA－Electrophoresis
Electrophoresis through agarose or polyacrylamide gels is the standard way to separate, identify and purify nucleic acid fragments. The location of th
DNA－Electrophoresis
What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. DNA is a negatively
血红蛋白电泳（hemoglobin－electrophoresis）（HbA2定量）
实验原理血红蛋白电泳（hemoglobin electrophoresis）目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pH缓冲液中，血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下，
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验
仪器、耗材DBMS实验步骤3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时，每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户（由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户，首先要创建一个新的项目。一旦建立，该项目就属于这个用户，这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度，尽量不要用手动输入操作
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验
实验步骤：3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时，每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户（由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户，首先要创建一个新的项目。一旦建立，该项目就属于这个用户，这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度，尽量不要用手动输入操作。因此，
顽拗性植物组织的蛋白质组学研究（苯酚法提取蛋白质）
1. 前言提取蛋白质是蛋白质组学研究的第一步。植物组织的蛋白质含量较低，并且存在多种非蛋白质成分，如细胞壁及贮藏多糖、脂质和酚类化合物，使蛋白质的提取难度增大 。植物蛋白质的可溶性与它们的细胞内定位关系密切，传统的蛋白质提取方法是用水合缓冲液、去垢剂或直接沉淀法 [1] 。除了普遍使用的 TCA
peptide－fingerprint－mapping
Polyacrylamide gel electrophoresis is a widely used technique to separate proteins from biological samples. Moreover, the development of two-dimension
Ingel－digestion－of－proteins－for－peptide－fingerprint－mapping
Polyacrylamide gel electrophoresis is a widely used technique to separate proteins from biological samples. Moreover, the development of two-dimension
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（三）
2. 质谱鉴定命令单个蛋白质点可能被命名为几个名称或代码，如检测点数、匹配数、采集数等。因此，用一个质谱图去关联一个适当的蛋白点没有多大意义。为了避免错误， PROTICdb 的工作流程之一是生成一个携带单一的，送去做质谱鉴定的蛋白点质谱仪 ID 的文件 ( 相当于一个命令)。质谱仪就可以将
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（一）
仪器、耗材 DBMS实验步骤 3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时，每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户（由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户，首先要创建一个新的项目。一旦建立，该项目就属于这个用户，这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度，尽量不要用手动
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（五）
( 10 ) 鼠标左键点击同一个点（342 号）（见注释 20) ，激活蛋白点信息框。蛋白点的数据按以下 4 个条目排列：概要、关系、鉴定和量化。每个条目对应的信息可被不断充实。其中鉴定包括质谱的详细数据。( 11 ) 开发鉴定、质谱详细数据和下一个子目录。从质谱数据分析得到了每个匹配结果，首先得到
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（六）
( 18 ) 当移动鼠标到两个链接的蛋白点之一上时，与这个点链接的每个点的十字标记的颜色都变成橙色 （在另一块胶上有一个匹配的蛋白点）。当鼠标点到这些点中的一个时，只有包括在同一个网络中的点显示橙色（ 图 23-12)。你可以通过声明一个新的关系，确认这些数据，这样就可以扩大点的网络。( 1
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（二）
4. 梅拉尼生成的输出文件的上传( 1 ) 由梅拉尼软件生成一个检测报告，并把它输出到一制表分隔的文本格式文件 ( 见注释 9)。 文件扩展名为 “ txt. ” 。 本演示中，使用 PROTICdb Demo, zip 中的 detections /DV02121001. txt 文件
2DE－蛋白质组学的－PROTICdb－数据库实验（四）
4. 质谱鉴定报告文件上传PROTICdb 兼容以制表分隔的文本格式输出的 Sequest 鉴定报告（见注释 13) 。( 1 ) 为演示，访问 http: //location 一 of/your/proticdb/home/demo. php。点击 “formto obtain the
常用电泳法
1、醋酸纤维素薄膜电泳（电泳法测定）醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。2、纸
常用电泳法
1、醋酸纤维素薄膜电泳（电泳法测定）醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。2、纸电
常用电泳法
1、醋酸纤维素薄膜电泳（电泳法测定）醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。2、纸电
Gel－Electrophoresis－of－DNA
What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we
Pulse－Field－Electrophoresis
Manipulating and analyzing DNA are fundamentals in the field of molecular biology. Indeed, separating complex mixtures of DNA into different sized fra
RNA－gel－electrophoresis
实验概要RNA gel electrophoresis主要试剂DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
Agarose－Gel－Electrophoresis
实验概要Separating nucleic acid fragments by agarose gel electrophoresis.实验原理 Agarose gel electrophoresis remains the most widely used technique for sep
Agarose－gel－electrophoresis
General ProcedureCast a gelPlace it in gel box in running bufferLoad samplesRun the gelImage the gelCasting Gels0.7% agarose gel with 1kbp ladder in U
RNA－gel－electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37ºC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be