聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳

【实验目的】 1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术,用于分离蛋白质。 【实验原理】 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持物的一种电泳形式。单体-丙烯酰胺和交联剂-甲叉双丙烯酰胺相互作用可形成聚丙烯酰胺,该聚合反应以TEMED作为催化剂,以APS作为引发剂。 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例可决定凝胶网孔的大小,交联剂所占比重越大,凝胶的网孔就越小。 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质分离主要依据以下两个因素: 蛋白质所带静电荷:在不同的pH条件下蛋白质所带电荷不同。在一定的电场条件下蛋白质将向与其所带电荷相反的电极方向移动,移动速率取决于蛋白质表面电荷的数量,电压越强或电荷越多则蛋白质移动的越远。其次,蛋白质的形状和大小:蛋白质在电泳中所受的阻力主要取决于样品的大小与凝胶网孔大小之间的关系。蛋白质分子越小或凝胶网孔越大,所分......阅读全文

聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳

【实验目的】 1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术,用于分离蛋白质。 【实验原理】 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持物的一种电泳形式。单体-丙烯酰胺和交联剂-甲叉双丙烯酰胺相互作用可形成聚丙烯酰胺,

聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳

【实验目的】 1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术,用于分离蛋白质。 【实验原理】 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持物的一种电泳形式。单体-丙烯酰胺和交联剂-甲叉双丙烯酰胺相互作用可形成聚

聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘电泳)

实验概要本实验介绍了聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘电泳)的操作流程。实验原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是利用丙烯酰胺(acrylamide,Acr)与N,N亚甲基双丙烯酰胺(N,Nmethylene bisacrylamide,Bis)在催化剂的作用下,聚合成大分子凝胶后,加样,再进行电泳的一种方法。聚丙

聚丙烯酰胺凝胶不连续圆盘电泳实验

实验方法原理 利用各种载脂蛋白在一定pH下所带电荷数量及颗粒大小不同的差异,从而在电场中获得不同的迁移庇,达到分离测定的目的,试剂、试剂盒 考马斯蓝溴酚蓝水溶液冰醋酸实验步骤 一、实验试剂:1. 凝胶储备液制备及工作混合液比例表2. 脱色剂:乙醇1000ml,冰醋酸320ml加水至4000ml.3.

聚丙烯酰胺凝胶不连续圆盘电泳实验

实验方法原理利用各种载脂蛋白在一定pH下所带电荷数量及颗粒大小不同的差异,从而在电场中获得不同的迁移庇,达到分离测定的目的,试剂、试剂盒考马斯蓝溴酚蓝水溶液冰醋酸实验步骤一、实验试剂:1. 凝胶储备液制备及工作混合液比例表2. 脱色剂:乙醇1000ml,冰醋酸320ml加水至4000ml.3. 染色

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——电泳

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤一、垂直电泳SDS 和常规聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳的方法基本相同。将缓冲液贮液稀释一倍便为连续电泳的电极缓冲液。不连续 SDS 电泳的电极缓冲液常用 Tris-甘氨酸系统(0.025

关于聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的制备和电泳介绍

  一、凝胶的制备和电泳  由于氧能抑制丙烯酰胺的聚合反应,灌制聚丙烯酰胺凝胶常在两块封闭的玻璃平板所形成的夹层间进行。在这种装置形式下,仅有顶层的凝胶与空气中的氧气相接触,从而大大减少了氧对聚合的抑制作用。聚丙烯酰胺凝胶电泳一般采用垂直装置。  二、凝胶的制备和电泳操作如下:  (1) 配制试剂 

关于聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的制备和电泳介绍

  一、凝胶的制备和电泳  由于氧能抑制丙烯酰胺的聚合反应,灌制聚丙烯酰胺凝胶常在两块封闭的玻璃平板所形成的夹层间进行。在这种装置形式下,仅有顶层的凝胶与空气中的氧气相接触,从而大大减少了氧对聚合的抑制作用。聚丙烯酰胺凝胶电泳一般采用垂直装置。  二、凝胶的制备和电泳操作如下:  (1) 配制试剂 

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——电泳

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、垂直电泳如果进行垂直电泳,按说明书先在电泳槽的下槽中装入电极缓冲液。将聚合后的凝胶连同玻璃板一起放入电泳槽中,在上槽中注入电极缓冲液,打开冷却循环系统,连接电源。一般起始电压

聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

实验概要本实验介绍了血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳的原理、试剂配制、操作步骤及注意事项等。实验原理本实验利用聚烯酰胺凝胶作电泳支持物。电荷和分子大小不一的各种血清蛋白质通过浓缩效应、电荷效应、分子筛效应而被精细地分离。由于具有以上三种效应,所以此方法分离效果好,分辨率高。血清蛋白在醋酸纤维素薄膜电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法

1.仪器装置通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极,铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂 (1)溶液A 取三羟甲基氨基甲烷36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml,再加水溶解并稀释至100ml,置棕色瓶内,在

中性聚丙烯酰胺凝胶电泳

            实验材料 DNA 样品 试剂、试剂盒 丙烯酰胺 亚甲双丙烯酰胺 过硫酸铵 乙醇

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

制胶(用于垂直电泳或水平电泳) 样品的准备 电泳 检测             试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵 浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤 SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同,只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气

中性聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验材料DNA 样品试剂、试剂盒丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺过硫酸铵乙醇凝胶载样缓冲液KOH 甲醇硅化液TBE 电泳缓冲液TEMED仪器、耗材夹子或铁皮制纸夹电泳装置玻璃板梳子和间隔片凝胶密封带凝胶测温条微量移液器及拉长的塑料洗头凡士林注射器实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液丙烯酰胺:亚甲双丙烯酰胺(29

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。具体如下:1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需

聚丙烯酰胺凝胶电泳概述

  聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过

聚丙烯酰胺凝胶电泳简介

  聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。  作用原理:聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Nati

中性聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺过硫酸铵乙醇凝胶载样缓冲液KOH 甲醇硅化液TBE 电泳缓冲液TEMED仪器、耗材 夹子或铁皮制纸夹电泳装置玻璃板梳子和间隔片凝胶密封带凝胶测温条微量移液器及拉长的塑料洗头凡士林注射器实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液丙烯酰胺:亚甲双丙烯酰

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)

  原理   聚丙烯酰胺(polyacrylamide,PAA)凝胶是丙烯酰胺(acry—lamide,Acr),在交联剂甲叉双丙烯酰胺(bisacrylamide,Bis)的作用下经聚合而形成的一种大分子化合物。 Acr的聚合作用只有在自由基存在时才能发生,需要一个催化诱发剂系

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理

聚丙烯酰胺凝胶电泳,普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸等应用较广。琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA段。琼脂糖通常用水平装置在强度和

聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的区别

聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的区别为:支持介质不同、用途不同、优势不同。一、支持介质不同1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术2、琼脂糖凝胶电泳:是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法二、用途不同1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:用于分离蛋白质和寡核苷酸2、琼脂糖凝胶

聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的区别

聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的区别为:支持介质不同、用途不同、优势不同。一、支持介质不同1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术2、琼脂糖凝胶电泳:是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法二、用途不同1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:用于分离蛋白质和寡核苷酸2、琼脂糖凝胶

聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳的异同

DNA电泳一般使用的都是琼脂糖凝胶电泳,电泳的驱动力靠DNA骨架本身的负电荷。聚丙烯酰氨(PAGE)凝胶电泳用于蛋白质与寡糖核苷酸的分离。电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——照相、凝胶干燥

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤为了发表文章和分析结果的保存,应将有价值的结果在干燥以前先进行照相,以免在干燥时降低分辨率,甚至失去弱带。凝胶可直接放在带有乳白色屏幕的发光板上,使用细颗粒的全色胶卷和一个中红滤

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——制胶(用于垂直电泳,水平电泳)

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同,只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气,以免产生泡沫

聚丙烯酰胺凝胶电泳的介绍

  用聚丙烯酰胺为支持基质的电泳程序。一般说来,实现聚丙烯酰胺凝胶电泳有两种类型。⑴单向电泳:采用完整的蛋白质或用十二烷基硫酸钠(SDS)处理的蛋白质的单向泳动,在有凝胶的平板上平行分离(过去也有用在玻管中的圆筒形棒状凝胶进行电泳的,现已很少有人使用)。⑵双向电泳:首先用天然蛋白质进行分离,然后凝胶

聚丙烯酰胺凝胶电泳的作用

  SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白 -SDS胶束,所带的负

RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳

一、原理核酸(ribonucleicacid,RNA)分子在一定pH值的缓冲液中带有电荷,将其放入电场中,可向与其所带电荷电性相反的电极移动。聚丙烯酰胺凝胶具有分子筛效应,核酸分子大小、形状不同,故在电场作用下,核酸分子在聚丙烯酰胺凝胶中泳动速度不同,依此可达到分离纯化的目的。二、材料、仪器设备及试