TAILPCR（TermalAsymmetricInterlacedPCR）基础知识
很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL- PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经改良过的TAIL-PCR成功地从突变体中克隆到外源插入基因的旁侧序列，从而为启动子的克隆提供了有效的新方法。在利用特异引物和随机引物进行PCR中一般有3种产物生成：(1)由特异性引物和简并引物扩增出的产物； (2)由同一特异性弓l物扩增出的产物；(3)由同一简并引物扩增出的产物。在TAIL-PCR反应中，其中后2种目标产物可以通过以嵌套的特异性引物进行的后续反应来消除。TAIL-PCR的基本原理是利用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异性引物(specialprimer，简称 sp1，sp2，sp3，约20bp)，用它们分别和1个具有低Tm值......阅读全文
HPLC基础知识教程（八）
全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13＜10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7＜1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无
HPLC基础知识教程（十）
一、基质（担体） HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大，在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩，溶剂或溶质容易渗入有机基质中，导致填料颗粒膨胀，结果减少
HPLC基础知识教程（十一）
全屏显示表格硅胶氧化铝苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯耐有机溶剂++++++++++适用pH范围++++++++抗膨胀/收缩++++++++耐压+++++++++表面化学性质+++++++++效能+++++++注：+++好 ++一般 +差
HPLC基础知识教程（十四）
V．HPLC应用 一、样品测定 1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱
试验机基础知识
、什么叫试验机我们通常所见的试验机实际应叫做材料试验机，它是一种用来验测各种材料式部件的机械物理性能的仪器。二、材料试验机的分类材料试验机的分类方法很多，常见的有：a)按照出力源的类型分主要有电机、液压、气动、电磁等几种；b)按测量结束的指示类型分主要有数显、指针；c)按试样所受有载与时间的关系主要
气相色谱基础知识
气相色谱结果分析气相色谱层析是一种分离分析的方法，因此它的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。1．定性 对于一已知范围的混合物，用此法定性很容易，但对于范围未知的混合物来说，则需要配合化学分析及其它仪器分析等。⑴ 利用保留值定性法：同一种物质在一根层析柱上保留时间相同。取样品各可能组分
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡
显微镜基础知识
光学显微镜的发展历史 早在公元前一世纪，人们就已发现通过球形透明物体去观察微小物体时，可以使其放大成像。后来逐渐对球形玻璃表面能使物体放大成像的规律有了认识。 1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。1610年前后，意大利的伽利略和德国的开普勒在研究望远镜的同时，改变物
QPCR的基础知识问答
问：什么是QPCR？答：QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（Polymerase C
HPLC基础知识教程（一）
I．概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法
激光粒度仪基础知识
1、为什麽散射/衍射激光粒度仪必须采用激光作光源激光粒度仪是通过检测颗粒的散射谱来分析颗粒大小与分布的，因此能否获得清晰的散射谱至关重要，激光是一种准直性，单色性良好的光源，只有采用激光才能在散射/衍射粒度仪器中得到清晰的散射谱分布。用多种波长混合的光源不可能获得清晰的散射谱，只能获得多种散射谱的
HPLC基础知识教程（七）
几种检测器的主要性能全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射信号吸光度荧光强度电流离子流强度散射光强噪音10-510-310-9线性范围105104105宽选择性是是是否否流速影响无无有无温度影响小小大小
射频开关基础知识（二）
使用PIN二极管电路的开关产品具有更高的功率处理能力，而FET类型的开关产品通常具有更快的开关速度。当然，由于固态开关不包含活动部件，因此其使用寿命是无限的。此外，固态开关的隔离度较高（60~>80dB），开关速度极快（
白细胞检验基础知识
白细胞计数和白细胞分类(White blood cell count and differential count) (一)原理 将全血用稀酸溶液稀释一定倍数并破坏红细胞后充入血细胞计数池内，显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液内的白细胞数。 (二)方法 显微镜计数法 (三)参
HPLC基础知识教程(十三)
3．流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
HPLC基础知识教程(二)
II．基本概念和理论 一、基本概念和术语 1．色谱图和峰参数 色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elutionprofile)。 基线(baseline)——经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出
HPLC基础知识教程（九）
5）、池体积：除制备色谱外，大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ；l。在使用细管径柱时，池体积应减少到1~2µ；l甚至更低，不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计，否则会严重影响柱效和灵敏度。 3．紫外检测器(ul
涂料基础知识基本介绍
涂于物体表面能形成具有保护、装饰或特殊功能(如绝线、防腐、标识等)的固态涂膜的一类液体或面体材料之总称 。注:在具体的、涂料品种名称中可用“漆”字表示“涂料”,如调和漆、厚膝等二、涂料的作用l、保护作用 2、装飾作用 3、特殊功能作用 三、涂料的组成l、成膜物质漆基中能单独形成有一定强度
HPLC基础知识教程（五）
2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Mi
HPLC基础知识教程（六）
1．柱的构造 色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛
射频开关基础知识（一）
射频和微波开关可在传输路径内高效发送信号。此类开关的功能可由四个基本电气参数加以表征。虽然多个参数与射频和微波开关的性能相关，然而以下四个由于其相互间较强的相关性而被视为至关重要的参数：隔离度，插入损耗，开关时间，功率处理能力。隔离度即电路输入端和输出端之间的衰减度，是衡量开关截止有效性的指标。插入
多重耐药菌基础知识
1.多重耐药菌是如何定义的？答：多重耐药菌（ Multiple Drug Resistant Organism，MDRO）是指对三类或三类以上结构不同（作用机制不同）抗菌药物同时耐药（每类中一种或一种以上）的细菌。2.广泛耐药菌是如何定义的？答：广泛耐药菌（ Extensive Drug Resis
HPLC基础知识教程（四）
III．HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还
HPLC基础知识教程(三)
4．相平衡参数 分配系数(distributioncoefficient，K)——在一定温度下，化合物在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。K＝。 分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡培
PCR简介/PCR仪
PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制
Troubleshooting－for－PCR－and－multiplex－PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多