定量PCR(PolymeraseChainReaction)技术
定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行 PCR起始模板量的定量。广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型:(1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。这种类型没有对样本进行质控监测,易出现假阴假阳结果,没有监测扩增效率,定量不准。(2)内参法+终产物分析。所谓“内参法”是指样本与阳性参照在一个反应容器内反应。这种类型对样本进行质控监测,排除假阴结果,但是定量不准。(3)外标法+过程监测。这种类型监测扩增效率,阳性样本定量准,但是无法排除假阴结果。(4)内参法+过程监测。由于样本与阳性参照在一个容器内反应,用同样的Taq酶和反应参与物,存在竟争性抑制,起始模板量浓度高的反应会抑制起始模板量浓度低的反应,所以定量不准。(5)外标法+过程监测+内对照。......阅读全文
聚合酶链[式]反应
中文名称聚合酶链[式]反应英文名称polymerase chain reaction;PCR定 义通过DNA互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增DNA特定序列的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
聚合酶链[式]反应的定义
中文名称聚合酶链[式]反应英文名称polymerase chain reaction;PCR定 义通过DNA互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增DNA特定序列的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
PCR基因扩增仪的用途
西安天隆科技有限公司DTC-3G型PCR基因扩增仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测D
关于聚合酶连式反应的简介
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction PCR) 又称为无细胞克隆系统或特异性DNA 序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。PCR 是利用单链寡核苷酸引物对特异DNA 片段进行体外快速扩增的一种方法。该反应是一个指数式反应,可在短时间内使极微量的目
DNA连接酶的用途
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶扩增的PCR产物,3’末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基,而这个碱基几乎总是A,因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性,故可用T载体克隆。
荧光定量PCR技术
荧光定量pcr(也称taqmanpcr,以下简称fq-pcr)是美国pe(perkinelmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规pcr基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通pcr相比,fq-pcr具有许多优点。
DNA聚合酶的用途
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶扩增的PCR产物,3'末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基,而这个碱基几乎总是A,因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性,故可用T载体克隆。
PCR-Primer-Design(一)
Molecular Biology Today 2001. 2(2): 27-32. Vinay K. Singh and Anil Kumar Bioinformatics Sub-centr
大肠杆菌的检测技术PCR检测技术
PCR(polymerase chain reaction) 即聚合酶链反应技术,PCR 是指利用耐热 DNA 聚合酶的作用,通过变性 -延伸 -复性的循环操作, 在体外迅速将DNA 模板扩增数百万倍的一种克隆技术。采用琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增产物的荧光条带。 在食品微生物领域中,
什么是PCR实验室?
PCR实验室又叫基因扩增实验室,PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,是用来研究聚合酶链式反应,放大特定DNA片段,其目的在于通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精度可达纳米级别,能够对患者的病情进行科学、准确、
多重PCR反应中关键因素和实验步骤(4)
琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶琼脂糖 . 长度彼此相差 30–40bp 的多重 PCR 产物在通常使用的 SeaKem 或 NuSieve(FMC BioProducts) 3% 的琼脂糖凝胶可以很好的区分开。在低电场强度下过夜电泳可以优化每个 PCR 产物条带的电泳效果,特别是当 PCR 产物小于 4
标准PCR
What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos
标准PCR
· What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not onl
关于实验仪器PCR板的介绍
PCR板是一种在聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中主要作为参与扩增反应的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、缓冲液等的承载物。 PCR板材质 其本身材质在当今主要以聚丙烯(PP)为主,能更好适应PCR反应过程中反复高低温设定,并
梯度PCR的应用领域
分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。
DNA测序
DNA测序(主要内容如下)· Sequencing Gel Preparation· Preparation of Templates · DNA Sequencing by the Dideoxy Method· DNA Sequen
PCR引物是什么
聚合酶链式反应简称PCR(Polymerase Chain Reaction) (又称:多聚酶链式反应) PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可
荧光定量PCR技术的荧光定量PCR的方法
接下来我们就来了解一下荧光定量的主要方法,我们如何选择合适的方法?荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而荧光定量 PCR 的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反
实时逆转录聚合酶链反应的简介
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而
什么是普通PCR技术?
Kary Mullis于1983年发明了聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction ,PCR),据说是载着女友开车的时候,忽然灵光一闪,想到了PCR原理(论开车的好处)。Kary Mullis于1993 年获诺贝尔化学奖。《纽约时报》如此评价:" 具有高度原创性和重大意义,
基因扩增仪PCR的原理作用
聚合酶链式反应,简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
Complete-PCR-Guide
In the polymerase chain reaction (PCR), a thermostable DNA polymerase amplifies DNA that is flanked by known sequences. The known sequences correspond
荧光定量PCR耗材的使用和选择注意几点
高通量的96孔PCR板和8联管是在聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中,主要作为参与扩增反应的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、缓冲液等的承载物。医疗级聚丙烯(PP)材质因其的纯净度和稳定性,能更好适应PCR反应过程中反复高低温设定,
DNA聚合酶的用途和缺陷
用途聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶扩增的PCR产物,3’末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基,而这个碱基几乎总是A,因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性,故可用T载体克隆。缺点无3’→5’阅读校正功能,在PCR扩增过程可引起错配,30次循环
定量PCR实验技术-QPCR
Quantitative PCRJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwes
RealTime-or-Kinetic-PCR
The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument, the Applied Biosystems Model 7700 sequence detection system (the TaqMan instrument)
反转录聚合酶链反应的功能和特点
RT—PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用,从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,在DNA聚合酶作用下扩增合成目的片段。RT—PCR
RTPCR技术的简介
RT—PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用,从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,在DNA聚合酶作用下扩增合成目的片段。RT—PCR
PCR实验室的简介
Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别,精确检测乙肝病毒在患者体内存
其它PCR方法
· Standard PCR Protocol (Molecular Biology Techniques Manual)The followings are described in detailRecommended Reagent ConcentrationsRecommend