定量PCR(PolymeraseChainReaction)技术

定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行 PCR起始模板量的定量。广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型:(1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。这种类型没有对样本进行质控监测,易出现假阴假阳结果,没有监测扩增效率,定量不准。(2)内参法+终产物分析。所谓“内参法”是指样本与阳性参照在一个反应容器内反应。这种类型对样本进行质控监测,排除假阴结果,但是定量不准。(3)外标法+过程监测。这种类型监测扩增效率,阳性样本定量准,但是无法排除假阴结果。(4)内参法+过程监测。由于样本与阳性参照在一个容器内反应,用同样的Taq酶和反应参与物,存在竟争性抑制,起始模板量浓度高的反应会抑制起始模板量浓度低的反应,所以定量不准。(5)外标法+过程监测+内对照。......阅读全文

定量PCR(Polymerase-Chain-Reaction)技术

定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行 PCR起始模板量的定量。广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型:(1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指

Polymerase-Chain-Reaction-(PCR)-cont.

Polymerase Chain Reaction (PCR) cont.Choice of Polymerases for PCROne of the important advances which allowed development of PCR was the availability

Polymerase-Chain-Reaction-(PCR)-to-Amplify-rRNA-Gene-Fragment

Polymerase Chain Reaction (PCR) to Amplify rRNA Gene FragmentPrepare sufficient master mix for both partners (45 mL/50 mL reaction)10 mL 10x PCR buffe

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PCR-RFLP分析技术(Polymerase-Chain-Reaction–Restriction-Fr...

【实验目的】1.熟悉PCR—RFLP分析技术原理及实验步骤。2.掌握琼脂糖凝胶电泳检测方法。3.了解PCR— RFLP在遗传病基因诊断中的作用。【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的

PCR基因扩增仪简介

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Standard-PCR-reaction

Steps for Standard PCR ReactionDesign primers. In general, primers should have the following properties:Tip: Primer3 is an excellent resource for choo

PCR的原理

聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction), 聚合酶链式反应简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期

PCR技术拓展知识

1.逆转录PCR(RT-PCR)用来扩增RNA的方法。2.竞争逆转录PCR(competitive reverse transcription-polymerase chain rection C-RT-PCR)低丰度RNA定量的好方法。3.多重PCR(multiples PCR)在同一PCR体系中

逆转录聚合酶链反应(RTPCR,rtpcr)

逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的转录产物;(2)获取目的基因;(3)合成cDNA探针;(4)构建RNA高效转录系统。实验方法原理逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Tran

一文了解荧光PCR通量

  自从1983年K. Mullis发明聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)以来,PCR技术很快成为科研、临床诊断的热点技术。  而实时荧光定量PCR技术,顾名思义,就是在PCR的基础上加入荧光基团,通过荧光信号的变化的实时监测PCR的反应过程,最后通过对未知

实时荧光定量PCR检测系统的介绍

  实时荧光定量PCR检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统(英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System),简称实时荧光qPCR,qPCR的核心是实时荧光定量PCR仪及与其配套的检测分析软件系统。聚合酶链式反应(Polymerase Chain

Realtime-PCR

实验概要The  exponential amplification via reverse transcription polymerase chain  reaction provides for a highly sensitive technique in which a very low

RTPCR技术的定义

RT-PCR,反转录·聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是将RNA的反转录(reverse transcription )和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。

PCR-Primer-Design(三)

  References   Albert, J., and Fenyo, E.M. 1990. Simple, sensitive and specific detection of human immunodeficiency virus type 1 in clinical speci

RNAi实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程

RNAi 实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程,本实验方法来自于加州大学Jim教授实验,很权威!Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim

PCR-PRIMER-DESIGN-AND-REACTION-OPTIMISATION

ContentsFactors Affecting the PCR  Nested Primer PCRPrimer LengthDegenerate PrimersElongation Temperature and TimeReaction BufferCycle NumberDenaturin

什么是PCR聚合酶链式反应-?

 PCR即聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction,以下简称PCR),是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可理解为生物体外特殊的DNA复制。

实时荧光定量PCR原理、特点和应用领域(一)

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在

实验室PCR扩增仪的原理和应用

PCR:PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。PCR仪实际就是一个温控设

定量PCR仪的应用

定量PCR仪的应用实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推

定量PCR技术

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PCR是什么意思

“PCR"的意思是:abbr. 光电导继电器(Photo-conductive Relay);程序控制暂存器(program control register)1、相关短语:数字PCR  digital PCR ; ddPCRrt pcr   逆转录聚合酶链反应 ; SARS病毒 ; 逆转录 ; 聚

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反向pcr和反式pcr一样么

反式PCR,或者称反转录PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)、逆转录PCR,是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形.在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增.P

新冠病毒核酸检测PCR技术知识点梳理(二)

定量PCR,也就是qPCR,由于其英文全称是real-time quantitative polymerase chain reaction,有些也称为RT-qPCR,国外通常简称为qPCR,是由美国Applied Bisystems公司于1996年研制出的一种新型核酸定量技术,并随着荧光P

PCR扩增仪简介

  PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备,被广泛运用于医学、生物学实验室中,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制

分子生态学词汇聚合酶链式反应

中文名称:聚合酶链式反应外文名称:Polymerase Chain Reaction定      义:聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。

PCR扩增仪

聚合酶链锁反应,Polymerase chain reaction,简称PCR,是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA片段,这种方法可在生物体外进行,不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。PCR这项技术,被广泛地运用在医学和生物学的实验室,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊