分离培养技术的材料与方法

1、材料(1)培养基:培养支原体用培养基。(2)器材及试剂:L玻棒、马血清、抑菌剂。2、方法(1)标本的采集;支原体常侵及人和动物的黏膜表面,可用灭菌棉拭子取分泌物接种于2—3ml支原体液体培养基的小管中。若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆器中研成乳浆后接种。取样后应尽快接种培养。分离培养:接种固体培养基时转动拭子使标本液体尽量挤出,用无菌毛细吸管吸取标本1—2滴约0.2ml接种于平板固体培养基上,用L玻捧涂抹使液体标本分布均匀,放在5%—10%CO2环境中37℃培育,3—5d后观察结果。接种半固体培养基或液体培养基时,接种前半固体培养基在水浴中煮沸至完全融化后,待冷却至50℃左右加入马血清、抑菌剂等,摇动使均匀,并待培养基冷至37℃左右,用无菌吸管接种标本0.5ml于培养基中,摇匀后盖以灭菌胶塞,37℃培育,观察支原体菌落。液体培养基也如上接种。若有支原体生长,培养基即出现颜色变化。(2)菌种的纯化:在平板固体培养基上用放......阅读全文

分离培养技术的材料与方法

1、材料(1)培养基:培养支原体用培养基。(2)器材及试剂:L玻棒、马血清、抑菌剂。2、方法(1)标本的采集;支原体常侵及人和动物的黏膜表面,可用灭菌棉拭子取分泌物接种于2—3ml支原体液体培养基的小管中。若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆器中研成乳浆后接种。取样后应尽快接种培养。分离培养:接种

细菌的分离培养与接种技术

绝大多数细菌在适宜的条件下可以生长,细菌感染性患者标本只有经过细菌的分离培养、鉴定和药物敏感试验,才可对感染性疾病进行病原学诊断并指导临床用药。因此,细菌培养对疾病的诊断、预防和治疗具有重要的作用。细菌分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。通过分离,

微生物的培养与分离方法

  大多数细菌均可以通过人工方法培养,只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。  接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。  1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散

微生物的培养与分离方法

  核心提示:大多数细菌均可以通过人工方法培养,只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。接种与分离方法根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。       1.平板划线分离培养法对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,

原代细胞分离与培养方法介绍

  前言   凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。   原代细胞最接近和最能反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。

微生物培养与分离方法

  接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。  1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法:  ①分区划线分离法:此法常用于含

微生物检验培养与分离方法

大多数细菌均可以通过人工方法培养,而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。一、接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌的临床标本,采用划

细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂  平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌  在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长

细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂  平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌  在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长

植物组织培养材料与方法

从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液(

核酸分离与纯化过程中材料与方法

 (一)费氏弧菌发光杆菌材料与方法的选择临床常见的标本有血液、尿液、唾液、组织及培养细胞等;核酸分离与纯化的方法非常多,如何恰当地收集与准备材料,选择适宜的分离与纯化方法是一个首要的问题。首先我们应当明确核酸的分离与纯化并不是zui终的目的,不同的实验研究与应用对核酸的产量、完整性、纯度和浓度可能有

细胞培养的基本方法细胞分离技术(一)

细胞分离技术一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。1.胰蛋

细胞分离技术是细胞培养的基本方法

从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。1.胰蛋白酶 (Tryp

细胞培养的基本方法细胞分离技术(二)

1.悬浮细胞 ●计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。 ●以1×107到5×107细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×107到1×107在无血清培养基中,再次悬浮细胞。 ●

原代细胞分离与培养

对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实是个

一些微生物培养与分离的方法

接种与分离方法根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。 1.平板划线分离培养法对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法: ①分区划线分离法:此法常用于含菌量较多的细菌的

细菌的接种与分离技术方法有哪些?

(一)平板划线分离法在被检标本中,常混杂有多种细菌,平板划线分离法可使这多种细菌在培养基表面分散生长,各自形成菌落,以便根据菌落的形态及特征,挑选单个菌落进行纯培养。常用的平板划线分离法有以下两种:1.连续划线分离法 此法主要用于杂菌不多的标本。用接种环取标本少许,于平板1/5处密集涂布,然后来回作

酵母菌的培养与分离

实验概要学习培养和分离酵母菌的技术和方法。实验原理大多数酵母菌为腐生,其生活最适pH为4.5-6,常见于含糖分较高的环境中,例如果园土、菜地土及果皮等植物表面。酵母菌生长迅速,易于分离培养,在液体培养基中,酵母菌比霉菌生长得快。利用酵母菌喜欢酸性环境的特点,常用酸性液体培养基获得酵母菌的培养液(这样

大鼠原代细胞分离与培养

  一、大鼠神经元细胞(酶消化法)   简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。   二、大鼠雪旺细胞(植块法)   简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C

接种、分离纯化和培养技术

一、接种  将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法  在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面

接种、分离纯化和培养技术

一、接种    将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法    在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培

接种、分离纯化和培养技术

一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液

膜分离技术的重中之重:洽谈膜材料

  在化工单元操作中,常见的分离方法有筛分、过滤、蒸馏、蒸发、重结晶、萃取、离心分离等。  然而,对于高层次的分离,如分子尺寸的分离、生物体组分的分离等,采用常规的分离方法是难以实现的,或达不到精度,或需要损耗极大的能源而无实用价值。  然而,随着膜分离技术的出现,该类问题得到解决。膜分离过程的主要

胚胎干细胞的分离与培养

分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是

植物病原物的分离、培养与接种

一、 目的和要求 要求学会植物病原真菌、细菌、病毒和线虫的分离、培养和接种的一般方法,并掌握其基本原理;学习植物传染性病害研究中常用的接种方法,比较不同接种方法对病害发生发展过程与外界环境的差异。二、材料和用具 新鲜的真菌和细菌病害材料(辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病叶片、水稻白叶枯病叶、烟草花叶病和番

植物病原物的分离、培养与接种

一、目的和要求要求学会植物病原真菌、细菌、病毒和线虫的分离、培养和接种的一般方法,并掌握其基本原理;学习植物传染性病害研究中常用的接种方法,比较不同接种方法对病害发生发展过程与外界环境的差异。二、材料和用具新鲜的真菌和细菌病害材料(辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病叶片、水稻白叶枯病叶、烟草花叶病和番茄根结

植物病原物的分离、培养与接种

一、 目的和要求要求学会植物病原真菌、细菌、病毒和线虫的分离、培养和接种的一般方法,并掌握其基本原理;学习植物传染性病害研究中常用的接种方法,比较不同接种方法对病害发生发展过程与外界环境的差异。二、材料和用具新鲜的真菌和细菌病害材料(辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病叶片、水稻白叶枯病叶、烟草花叶病和番茄根

分离技术的地位与作用

两种或多种物质的混合是一个自发的过程,而要将混合物分开或将其变成产物,必须采用适当的分离手段(技术)并耗费一定的能量或分离剂。待分离的混合物可以是原料、中间产物或废弃物料,制得产物的组成依需求而定,仍然可以是混合物,也可以为纯度极高的单体。分离工程通常贯穿在整个生产工艺过程中是获得最终产品必不可少的

接种、分离纯化和培养技术(一)

一、接种  将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法  在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面

接种、分离纯化和培养技术(二)

二、分离纯化  含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。1、倾注平板法