胚胎干细胞的分离与培养

分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是先用蛋白酶分解透明带的蛋白质(囊胚外围的一层细胞外基质),再利用免疫手术(immunosurgery)专一地使滋养层细胞裂解,从而取得内部的内细胞群细胞,之后体外培养和繁殖取得的内细胞群细胞,即可建立胚胎干细胞系。目前胚胎干细胞的分离方法已有了一定的改进,比如现在已有使用激光去除透明带的技术。获取胚胎干细胞的成功率相当低,即使成功取得胚胎干细胞,维持其不分化的状态也十分困难。为了阻止胚胎干细胞在培养过程中分化,培养基需加入如白血病抑制因子(LIF)等因子。最初,胚胎干细胞需要在含有喂养层细胞的培养基上培养。喂养层细胞能为胚胎干细胞提供......阅读全文

胚胎干细胞的分离与培养

分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是

细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂  平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌  在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长

细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂  平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌  在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长

原代细胞分离与培养

对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实是个

分离培养技术的材料与方法

1、材料(1)培养基:培养支原体用培养基。(2)器材及试剂:L玻棒、马血清、抑菌剂。2、方法(1)标本的采集;支原体常侵及人和动物的黏膜表面,可用灭菌棉拭子取分泌物接种于2—3ml支原体液体培养基的小管中。若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆器中研成乳浆后接种。取样后应尽快接种培养。分离培养:接种

酵母菌的培养与分离

实验概要学习培养和分离酵母菌的技术和方法。实验原理大多数酵母菌为腐生,其生活最适pH为4.5-6,常见于含糖分较高的环境中,例如果园土、菜地土及果皮等植物表面。酵母菌生长迅速,易于分离培养,在液体培养基中,酵母菌比霉菌生长得快。利用酵母菌喜欢酸性环境的特点,常用酸性液体培养基获得酵母菌的培养液(这样

细菌的分离培养与接种技术

绝大多数细菌在适宜的条件下可以生长,细菌感染性患者标本只有经过细菌的分离培养、鉴定和药物敏感试验,才可对感染性疾病进行病原学诊断并指导临床用药。因此,细菌培养对疾病的诊断、预防和治疗具有重要的作用。细菌分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。通过分离,

大鼠原代细胞分离与培养

  一、大鼠神经元细胞(酶消化法)   简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。   二、大鼠雪旺细胞(植块法)   简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C

胚胎干细胞的分离方法介绍

分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是

人胚胎干细胞系:衍生与培养实验

细 胞 培 养 基 成 分 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立 h E S 细 胞 的 手 工 传 代 采 用 玻 璃 化 方 法 冻 存 h E S 细胞 通 过 焚 光

人胚胎干细胞系:衍生与培养实验

细 胞 培 养 基 成 分 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立 h E S 细 胞 的 手 工 传 代 采 用 玻 璃 化 方 法 冻 存 h E S 细胞 通 过 焚 光

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

小鼠胚胎干细胞的培养

完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1

植物病原物的分离、培养与接种

一、 目的和要求 要求学会植物病原真菌、细菌、病毒和线虫的分离、培养和接种的一般方法,并掌握其基本原理;学习植物传染性病害研究中常用的接种方法,比较不同接种方法对病害发生发展过程与外界环境的差异。二、材料和用具 新鲜的真菌和细菌病害材料(辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病叶片、水稻白叶枯病叶、烟草花叶病和番

微生物的培养与分离方法

  核心提示:大多数细菌均可以通过人工方法培养,只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。接种与分离方法根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。       1.平板划线分离培养法对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,

微生物的培养与分离方法

  大多数细菌均可以通过人工方法培养,只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。  接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。  1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散

植物病原物的分离、培养与接种

一、 目的和要求要求学会植物病原真菌、细菌、病毒和线虫的分离、培养和接种的一般方法,并掌握其基本原理;学习植物传染性病害研究中常用的接种方法,比较不同接种方法对病害发生发展过程与外界环境的差异。二、材料和用具新鲜的真菌和细菌病害材料(辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病叶片、水稻白叶枯病叶、烟草花叶病和番茄根

植物病原物的分离、培养与接种

一、目的和要求要求学会植物病原真菌、细菌、病毒和线虫的分离、培养和接种的一般方法,并掌握其基本原理;学习植物传染性病害研究中常用的接种方法,比较不同接种方法对病害发生发展过程与外界环境的差异。二、材料和用具新鲜的真菌和细菌病害材料(辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病叶片、水稻白叶枯病叶、烟草花叶病和番茄根结

胚胎干细胞培养

Media and Solution required for ES Cell Culture (Bowtell Lab)   Routine Culturing of ES Cells (Bowtell Lab)  Routine Splitting and freezing of cells (

微生物培养与分离方法

  接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。  1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法:  ①分区划线分离法:此法常用于含

原代细胞分离与培养方法介绍

  前言   凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。   原代细胞最接近和最能反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。

人胚胎干细胞系:衍生与培养实验—人胚胎干细胞系的建立

实验步骤方 案 2. 6 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立试剂与材料无菌或无菌制备□ 5〜6 天的人胚泡,经 H F E A 允许,并且像先前讨论的完全经病人同意。 HFEA所要求的全部细节能够在 H E F A 的网站找到(http//:www.hfea.g0v.uk)。□链霉蛋白酶, 0

痢疾杆菌的分离培养与鉴定诊断

  标本  在用药前取粪便的脓血或粘液部分,标本不能混有尿液。如不能及时送检,应将标本保存于30%甘油缓冲盐水或增菌培养液中。中毒性菌痢可取肛门拭子检查。  分离培养与鉴定  接种肠道杆菌选择性培养基,37℃孵育18~24小时,挑取无色半透明的可疑菌落,作生化反应和血清学凝集试验,确定菌群和菌型。如

微生物检验培养与分离方法

大多数细菌均可以通过人工方法培养,而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。一、接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌的临床标本,采用划

猴胚胎干细胞的分离及建系

实验概要猴胚胎干细胞(monkey Embryonic Stem Cells,monESCs)的分离及建系主要试剂重组人卵泡刺激素(recombinant human Follicle Stimulating Hormone,rhFSH)、hCG、豚鼠补体、抗猴全血清、TL-HEPES、0.5

细菌的纯种分离与培养的要求和原理

原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长繁殖,形成单个菌落,以达到分离纯种的目的.若需从平板上获取纯种,则挑取一个单个菌落作纯培养.

厌氧菌的分离培养

厌氧菌的分离培养主要分初代培养和次代培养两个阶段,其中初代培养相对比较困难,关键的问题就是厌氧环境和培养基的选择。  初代培养的一般原则是:  (1)先将标本涂片染色直接镜检,指导培养基的选择。  (2)尽量选用在厌氧菌中覆盖面宽的非选择性培养基。  (3)最好多选1~2种覆盖面不同的选择性培养基。

原代细胞分离与培养,你都掌握了吗?

  对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实

胚胎干细胞培养技术大全

MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURERoutine Culturing of ES CellsISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTSMITOMYCIN C TREATMEN

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存