pfu及噬菌体滴度测定方法
pfu指的是噬菌体的空斑形成单位。以下是关于测定M13效价的一个方法：测定噬菌体滴度只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时（即细胞过量时），噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此，建议检测噬菌体贮液的滴度时，在感染前进行稀释，而不是在高MOI值的情况下稀释被感染的细胞。低MOI值有助于确保每个噬菌斑仅含一个DNA序列。1. 接种ER2738单菌落于5-10 ml LB培养基中，摇床培养至对数中期（OD600 ~0.5）。2. 细胞生长时，微波炉融化上层琼脂，分成3 ml等份于灭菌试管中，每个噬菌体稀释度一管。保存于45℃备用。3. 37℃预温LB/IPTG/Xgal平板，每个噬菌体稀释度取一个平板备用。4. 在LB中准备10倍系列稀释的噬菌体。建议稀释范围：扩增的噬菌体培养物上清：108-1011；未扩增的淘选洗脱物：101-104。每个稀释度换一新......阅读全文
用小量液体培养物制备λ噬菌体原种实验
可通过小量液体培养物制备高滴度 λ 噬菌体原种。这一方法最早由 Leder 等（1977）采用。一般来说，它所得到的 λ 噬菌体的产量比平板裂解低且不稳定，另外噬菌体最初的接种量也大。但是，在液体培养物中制备的 λ 噬菌体原种将更清亮，并且也不含污染平板裂解物的硫酸盐多糖。本实验来源「分子克隆实验指
通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验
来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备，通常有两种方法：① 平板裂解，这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法；② 小量液体培养，这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备
用小量液体培养物制备λ噬菌体原种实验
实验方法原理 可通过小量液体培养物制备高滴度 λ 噬菌体原种。这一方法最早由 Leder 等（1977）采用。一般来说，它所得到的 λ 噬菌体的产量比平板裂解低且不稳定，另外噬菌体最初的接种量也大。但是，在液体培养物中制备的 λ 噬菌体原种将更清亮，并且也不含污染平板裂解物的硫酸盐多糖。
用小量液体培养物制备λ噬菌体原种实验
实验方法原理 可通过小量液体培养物制备高滴度 λ 噬菌体原种。这一方法最早由 Leder 等（1977）采用。一般来说，它所得到的 λ 噬菌体的产量比平板裂解低且不稳定，另外噬菌体最初的接种量也大。但是，在液体培养物中制备的 λ 噬菌
血清学筛选噬菌体
1. 准备 NZY agar plates（至少用前 24 小时倒好） ，用前在37℃培养箱中烘烤1-2 小时以去除水滴。2. 将过夜培养的 XL1-blueMRF' 细菌 2000 转/ 分，离心10 分钟，将细菌溶解在10mMMgSO4 中，调整细菌浓度为 OD600=0.5。3. 融化
噬菌体的分离、纯化及效价测定
一、目的要求 1、学习分离、纯化噬菌体的基本原理和方法。 2、学习噬菌体效价测定的基本方法。 二、基本原理 因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现奇特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容
噬菌体的检查及效价测定（二）
六、结果：1. 噬菌体检查① 离心分离加热法OD650光密度值正常发酵液（对照） 异常发酵液（试验）离心上清液(A1)离心上清液加热煮沸后(A2)A2/A1② 绘出平板上的噬菌斑检测结果，指出噬菌斑和宿主细菌。2. 噬菌体效价测定① 平板上噬菌斑数目噬菌体稀释度10-4、10-5、10-6 对照噬菌
噬菌体的检查及效价测定（一）
一、目的：1. 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。2. 学会检查噬菌体的方法。3. 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。二、原理：噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒，其个体形态极其微小，用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量
杆状病毒储液制备实验——噬斑试验测定滴度
实验材料对数生长期单层培养的 Sf 9 细胞试剂、试剂盒杆状病毒储液昆虫细胞培养液仪器、耗材琼脂糖顶层覆盖物台盼蓝顶层覆盖物（选用）60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱1.5 ml 带螺口盖的冻存管实验步骤1. 用含 10％ 胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验
实验方法原理 空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验，是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合，当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时，会造成细胞被溶解而形成空斑，每个空斑系由一个病毒颗粒所造成，计算空斑数目再乘以稀释倍数，即可得知原来的病毒感
面粉白度存在的原因及测定方法
随着社会的发展和人民生活水平的不断提高,人们对小麦粉的消费需求已从特二粉、特一粉转向特精粉以至高精粉,对面粉白度的要求随着社会进步越来越高。由此引发的面粉增白剂等添加剂猖狂。商家与消费者之间的博弈，最后受苦的还是消费者。那么，为什么面粉白度怎么难达到呢，面粉白度在工业上一般是通过什么来进行测
噬菌体展示技术研究RNA结合蛋白实验
实验方法原理噬菌体展示技术是将外源基因与噬菌体的表面蛋白基因融合，在融合了外源基因的噬菌体颗粒的表面就会表达相应的外源蛋白，即外源基因编码的蛋白被展示在噬菌体颗粒的表面。实验材料载体tRNA抗体寡核苷酸试剂、试剂盒抗生素储存液BCIP葡萄糖储存液X-Gal磁珠洗液蛋白酶抑制剂RNase 抑制剂TEN
氯霉素滴耳液的含量测定方法
含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含氯霉素0.1mg的溶液对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见氯霉素含量测定项下。
杆状病毒滴度检测
实验概要本实验介绍了检测病毒滴度的方法。实验原理根据噬菌斑数计算病毒滴度。主要试剂1. 4% agarose gel：2g agrose 50ml 水，高压灭菌2. 2×Grace（unsupplemented）：9.14g粉末（invitrogen） 0.07gNaHCO3 H2O，调PH6.
通过平板裂解和刮取制备λ噬菌体原种
方法：1、铺平板感染培养物的制备：对直径为10cm的培养皿，取105pfu的噬菌体（通常约为一个噬菌斑重悬液的1/10或一个大噬菌斑重悬液的1/100）与0.1ml铺平板细菌混匀。对直径为15cm的培养皿，去2*105pfu的噬菌体与0.2ml铺平板细菌混匀。至少要置一个含为感染细胞的对照管，将感染
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验4
在细胞培养板内做病毒空斑形成单位试验实验材料病毒试剂、试剂盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle仪器、耗材细胞培养板实验步骤(1) 用细胞培养板 (6孔)，若用旧板，洗净后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外线照射 2-4 h备用，新板可直接使用。(2) 将传代细胞系经胰酶消化分散后
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验3
用传代细胞系平皿法测量病毒空斑形成单位实验材料病毒细胞系试剂、试剂盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液仪器、耗材培养皿实验步骤(1) 将单层细胞 (2X 106/ml, 6 ml)培养在直径 60 mm 的平皿上，生长液为含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液，加
用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验2
虫媒病毒在鸡胚成纤维细胞中的空斑形成单位试验实验方法原理病毒常杀死被病毒感染的细胞 即产生致细胞病变作用。用只染活细胞（如中性红）或只染死细胞（如台盼兰）的染料对单层细胞染色以检测空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT) 进行染色，使用 MTT 的优点是黄色的 MTT 能将活细胞染成深蓝色
噬菌体的分离和鉴定
部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤：1、噬菌体分离(1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内，放入37 ℃温箱培养24h。(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前，建议测定噬菌体制备物的得率。实验材料 大肠杆菌培养物试剂、试剂盒 氯仿NaCl聚乙二醇SM胰 DNaseⅠ仪器、耗材 S
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前，建议测定噬菌体制备物的得率。
病毒蚀斑技术（1）
1952年，Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学，从而使病毒蚀斑技术 (Virus plaque formation)成为许多病毒的滴定和研究方法。(一) 原理 病毒感染细胞后，由于固体介质的限制，释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期，便形成一个局限性病变细胞区
病毒蚀斑技术介绍
1952年，Dulbecco把噬菌体空斑技术应用于动物病毒学，从而使病毒蚀斑技术（Virus plaque formation）成为许多病毒的滴定和研究方法。 1、原理 病毒感染细胞后，由于固体介质的限制，释放的病毒只能由最初感染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期，便形成一个局限性病变细胞区，此
进口胎牛血清对细胞及病毒滴度的影响
进口胎牛血清是妊娠后期未出生的剖腹取胎牛的血清。胎牛血清营养成分完全而丰富，代谢产物极少，微生物感染的可能性zui小，品质zui高，是组织细胞培养和病毒增殖培养的重要营养来源。 血清是一种成分复杂的混合物，不同批次血清对细胞生长的促进作用不同大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴
噬菌体效价的计算和技术优点
又称噬菌斑形成单位（pfu）数,指每毫升试样中含有侵染性噬菌体的粒子数。测定方法有双层平板法，其优点有：1）弥补平板不平2）噬菌斑位于同个平面，较清晰3）上层为半固体培养基，有利噬菌体扩散
盐酸林可霉素滴耳液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。对照品溶液取林可霉素对照品适量,精密称定,加流动相定量稀释成每1ml中约含林可霉素1mg的溶液,摇匀。供试品溶液、色谱条件与系统适用性要求见林可霉素B项下。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算供试品中C18H
从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒实验
从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的办法从裂解物中回收得到。残余的细胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在进一步纯化之前，建议测定噬菌体制备物的得率。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理从大规模培养物中制备的 λ 噬菌体，可在高盐存
淀粉细度测定方法
淀粉细度测定方法Method for determination of fineness of starchesGB 12096-89，国家技术监督局1989-12-29批准，1990-08-01实施1.主题内容与适用范围本标准规定了筛分法测定淀粉细度的方法。本标准适用于干燥成粉末的精制淀粉。2.术
大米白度测定方法
随着生活水平的提高，人们对大米品质要求也越来越高，对大米的综合评价也越来越客观和全面。大米白度检测也是评价大米质量的重要指标。我们知道，颜色可以通过我们肉眼观察，但是在两种白色很相近的情况下，如何去区分呢？这就需要一个具体的值去衡量了。白度可以通过专业的白度仪进行检测。白度仪用于测量物体表面的兰光白
关于乙肝抗体滴度的简介
乙肝抗体指的是乙肝保护性抗体，即乙肝表面抗体，而乙肝抗体滴度指的是乙肝表面抗体的浓度。当乙肝表面抗体浓度达到一定程度时才能够更有效的保护人体免受乙肝病毒的入侵。