用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D,长度约10cm的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl,置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛,均匀分散,置Hanks液中浸泡。取1ml注射器,出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中,排净空气,柱高约 5~6cm。此柱可分离约2×107细胞。将柱置-20℃可保存2~3个月。二、分离细胞1.取分离的单个核细胞,用细胞培养液将细胞配成2×107/0.5ml。2.融化尼龙毛柱,以每分钟5~7滴的速度放出Hanks液,并用5ml预温至37℃的细胞培养液洗涤尼龙毛柱。小心将细胞悬液加入尼龙毛柱中,待细胞悬液全部进入尼龙毛柱后,立即加0.2ml细胞培养液,夹住塑料管。3.在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中静置1小时。用5ml预温至37℃的细胞培养液洗脱细胞。洗脱液中含有纯的T细胞。再用5ml预温至37℃的细胞培养液洗涤尼龙毛柱,洗净不粘附的细胞。4.加入0......阅读全文
T细胞尼龙毛柱分离法的操作使用
在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所
用尼龙毛法分离B细胞
用尼龙毛法分离B细胞1)尼龙毛柱的制备1.取直接3D,长度约250px的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl,置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛,均匀分散,置Hanks液中浸泡。取1ml注射器,出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中,排净空气,柱高约5~1
用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D,长度约10cm的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl,置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛,均匀分散,置Hanks液中浸泡。取1ml注射器,出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中,排净空气,柱高约 5~6cm。此柱可分离约2
用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D,长度约10cm的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl,置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛,均匀分散,置Hanks液中浸泡。取1ml注射器,出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中,排净空气,柱高约 5~6cm。此柱可分离约2
T淋巴细胞的分离技术尼龙毛法
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛( Nylon Wool Fiber)。2.烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3.装填尼龙毛柱,一次性注射
从单个核细胞中分离T细胞(玫瑰花结形成试验、尼龙毛、...
从单个核细胞中分离T细胞一、用玫瑰花结形成试验分离E+细胞1.制备AET-绵羊红细胞1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反
T淋巴细胞的分离技术
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leukocyte Filte
T淋巴细胞的分离技术
(一)原理混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。 (二)材料及试剂 1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leukocyte F
T淋巴细胞的分离技术
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。 (二)材料及试剂 1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leu
淋巴细胞的分离技术
实验概要淋巴细胞的分离方法是免疫学研究的重要技术,稳定、高效地分离出高纯度且活性不受影响的T淋巴细胞是进行一系列免疫学研究的前提与基础,进而能够在体外对机体各种免疫细胞分别作鉴定、计数或功能测定。实验原理混合的单核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上
离心机分离生物T淋巴细胞的技术介绍
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leukocyte Filters
尼龙塑料改性技术
ps材料耐低温尼龙塑料改性 尼龙塑料改性技术 改性配方 微谱技术致力于从事尼龙塑料改性技术,塑料配方组分还原,塑料改性等技术援助,综合采取红外光谱分析、NMR分析、TGA热重分析仪、气相色谱、XRD荧光等仪器分析方法,绘制谱图,分析塑料配方成分,优化产品配方及
血细胞分离技术(二)
(二)操作方法1.取抗凝血,自然沉降,如是马属动物的血液,可直接直立试管架上,让其自然沉降1h,取上层血浆。如是牛、羊血液,由于其血沉速度非常慢,可加等量3%明胶液,混匀后让其自然沉降,1h后取上层血浆。2.2 000r/min离心10min,弃上清。3.沉淀用Hank’s液混悬后,再2 000r/
从单个核细胞中分离T细胞
从单个核细胞中分离T细胞1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞1.制备AET-绵羊红细胞1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反
从单个核细胞中分离T细胞的方法
1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞:1.制备AET-绵羊红细胞:1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反应30分钟。3)用无
大容量离心机分离血细胞的技术(二)
(2)泛影葡胺—右旋糖酐(dextran)液 34%泛影葡胺液10份 60%右旋糖酐液12.5份混合,即为比重1.07~1.09的分层液。分装于棕色瓶中,4℃冰箱保存备用。2.3%的明胶液称取明胶3g,溶于0.9%的灭菌生理盐水,终体积100ml,114.3℃高压灭菌10min,冷却后4
尼龙拉伸弹性模量试验机-尼龙拉力测试仪
尼龙又叫聚酰胺是分子主链上含有重复酰胺基团—[NHCO]—的热塑性树脂总称,包括脂肪族PA,脂肪—芳香族PA和芳香族PA,其中脂肪族PA品种多,产量大,应用广泛,其命名由合成单体具体的碳原子数而定。 PA具有良好的综合性能,包括力学性能、耐热性、耐磨损性、耐化学药品性和自润滑性,且摩擦系数
T淋巴细胞分离技术的注意事项
1.此种分离法,T淋巴细胞也常有一部分被吸附,吸附的多少与尼龙毛的质量有关,与装柱的松紧也有关系。 2.此法的T淋巴细胞的回收率约20%~30%。 3.用过的尼龙毛可回收,以盐水洗涤,然后浸入0.1Mol/L的HCl中过夜,然后再同前法清洗。
尼龙拉伸弹性模量试验机/尼龙拉力测试仪介绍
尼龙又叫聚酰胺是分子主链上含有重复酰胺基团—[NHCO]—的热塑性树脂总称,包括脂肪族PA,脂肪—芳香族PA和芳香族PA,其中脂肪族PA品种多,产量大,应用广泛,其命名由合成单体具体的碳原子数而定。PA具有良好的综合性能,包括力学性能、耐热性、耐磨损性、耐化学药品性和自润滑性,且摩擦系数低,有一定的
纯淋巴细胞群的采集及分离原则
1.纯淋巴细胞群的采集: 利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时,能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性,从单个核细胞悬液中除去单核细胞,从而获得纯淋巴细胞群。 主要的方法有: ①粘附贴壁法; ②吸附柱过滤法; ③磁铁吸引法。 2.淋巴细胞亚群的分离原则: 选择纯
纯淋巴细胞群的采集及分离原则有哪些?
1.纯淋巴细胞群的采集: 利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时,能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性,从单个核细胞悬液中除去单核细胞,从而获得纯淋巴细胞群。 主要的方法有: ①粘附贴壁法; ②吸附柱过滤法; ③磁铁吸引法。 2.淋巴细胞亚群的分离原则: 选择纯
关于甲泼尼龙的简介
中文名称:甲泼尼龙 英文名称:meprednisone CAS号:83-43-2 EINECS号:214-996-1 分子式:C22H30O5 分子量:374.5 熔点:228-237℃ 性状:白色或几乎白色的结晶性粉末,无臭,初无味而后苦。溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于水
甲泼尼龙的药物说明
分类内分泌系统药物>肾上腺皮质激素类药剂型1.粉针剂:40mg;2.片剂:4mg;3.注射剂:20mg(1mL)。4.片剂:醋酸酯2mg,4mg;5.注射剂:醋酸酯40mg(1mL),80mg(2mL),琥珀酸钠40mg;6.洗剂或霜剂:醋酸酯0.25%。药理作用甲泼尼龙抗炎作用较强,钠潴留作用较弱
甲泼尼龙的基本特性
中文名称:甲泼尼龙英文名称:meprednisoneCAS号:83-43-2EINECS号:214-996-1分子式:C22H30O5分子量:374.5熔点:228-237℃性状:白色或几乎白色的结晶性粉末,无臭,初无味而后苦。溶于乙醇和氯仿,几乎不溶于水
甲泼尼龙的用法用量
⒈口服开始时一般为每日16~40mg,分次服用。维持剂量为每日4~8mg。⒉静脉滴注或推注(甲泼尼龙琥珀酸钠)一般剂量(相当于甲泼尼龙):每次10~40mg,最大剂量可用至按体重30mg/kg,大剂量静脉输注时速度不应过快,一般控制在10~20分钟左右,必要时每隔4小时可重复用药,剂量为每次10~4
血细胞分离技术之大容量离心机
血细胞分离技术大容量离心机采血 (一)材料与试剂1.抗凝剂(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。(2)乙二胺四
血细胞分离技术
采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
大容量离心机分离血细胞的技术
(一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
甲泼尼龙的结构功能介绍
甲泼尼龙,是一种有机化合物,分子式为C22H30O5,具有较强的抗炎作用。
甲泼尼龙的适应症
用于危重疾病的急救,还可用于内分泌失调、风湿性疾病、胶原性病、皮肤疾病、过敏反应、眼科疾病、胃肠道疾病、血液疾病、白血病、休克、脑水肿、多发性神经炎、脊髓炎及防止癌症化疗引起的呕吐等。目前临床上主要用于脏器移植。