从单个核细胞中分离T细胞（玫瑰花结形成试验、尼龙毛、...
从单个核细胞中分离T细胞一、用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞1．制备AET-绵羊红细胞1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反应30分钟。3）用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤AET-绵羊红细胞5次，每次离心500×g，10分钟。用含10％小牛血清的RPMI-1640培养液将细胞悬浮至10％（v/v）浓度。10％ AET-绵羊红细胞悬液可在4℃保存三周。2．用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞（Ficoll分离法）1）用含10％小牛血清的RPMI-1640培养液将单个核细胞悬浮至107/ml，加入1/10~1/20量的10％ AET-绵羊红细胞悬液。混合后，室温放置1小时。离心500×g 10分钟，4℃过夜。2）吸去上清液，用手轻轻旋转离心管，使细胞悬浮，不......阅读全文
从单个核细胞中分离T细胞（玫瑰花结形成试验、尼龙毛、...
从单个核细胞中分离T细胞一、用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞1．制备AET-绵羊红细胞1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反
从单个核细胞中分离T细胞
从单个核细胞中分离T细胞1）用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞1．制备AET-绵羊红细胞1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反
从单个核细胞中分离T细胞的方法
1）用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞：1．制备AET-绵羊红细胞：1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反应30分钟。3）用无
T淋巴细胞的分离技术-尼龙毛法
（一）原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，而多数T细胞则通过尼龙毛柱，这是获得富含T细胞群的有效方法。（二）材料及试剂1．尼龙毛（ Nylon Wool Fiber）。2．烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3．装填尼龙毛柱，一次性注射
T细胞尼龙毛柱分离法的操作使用
在研究体内及体外的免疫系统时，分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清，所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力，从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵，而且操作简便，所
用尼龙毛法分离B细胞
用尼龙毛法分离B细胞1）尼龙毛柱的制备1．取直接3D，长度约250px的尼龙毛，用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl，置37℃烘干备用。2．称取50mg尼龙毛，均匀分散，置Hanks液中浸泡。取1ml注射器，出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中，排净空气，柱高约5～1
单个核细胞的分离
实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密
用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D，长度约10cm的尼龙毛，用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl，置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛，均匀分散，置Hanks液中浸泡。取1ml注射器，出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中，排净空气，柱高约 5～6cm。此柱可分离约2
用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D，长度约10cm的尼龙毛，用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl，置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛，均匀分散，置Hanks液中浸泡。取1ml注射器，出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中，排净空气，柱高约 5～6cm。此柱可分离约2
人单个核细胞的分离
实验概要人单个核细胞的分离主要试剂DPBS、0.5%甲基纤维素、人淋巴细胞分离液、人HSCs培养液主要设备离心机，超净台，体视镜，倒置显微镜，96孔培养板，T75培养瓶，25mL/10mL/5mL移液管实验材料脐带血100 mL，取自医院，并和产妇签知情同意书实验步骤（1）用血袋从医院取脐带血100