噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(1)
在流行病学和细菌学的研究中,噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus,简称蛭弧菌)、噬菌体、细菌素的研究及其应用已越来越引起人们的关注。蛭弧菌、噬菌体、细菌素是分属于细菌、病毒、抗菌物质3种不同的有机物,但它们有许多相似的生物特性,而且往往引起人们产生错误的概念。蛭弧菌是一类专门以捕食细菌为生的寄生性细菌,它比通常的细菌小,有噬菌体、细菌素的作用,且具有细菌的特性。其宿主范围广泛,对大部分阴性菌都有裂解作用,敏感性较高,特异性不强,但作用方式类似噬菌体和细菌素。蛭弧菌繁殖一代需4~6h,每次可复制6~36个子代细胞。蛭弧菌可以在死菌上生长而与噬菌体、细菌素有别。蛭弧菌的作用可吸附到宿主细胞上并进入宿主细胞内,在其中生长繁殖。最终导致宿主菌裂解。噬菌体是一类细菌特异性的病毒,它有典型的病毒形态和结构。噬菌体对宿主有高度的特异性,噬菌体的宿主范围是鉴别菌株的一个有用的特性,但并不是一个不变的特性。噬菌体的......阅读全文
噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(1)
在流行病学和细菌学的研究中,噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus,简称蛭弧菌)、噬菌体、细菌素的研究及其应用已越来越引起人们的关注。蛭弧菌、噬菌体、细菌素是分属于细菌、病毒、抗菌物质3种不同的有机物,但它们有许多相似的生物特性,而且往往引起人们产生错误的概念。蛭弧菌是
噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(5)
蛭弧菌、噬菌体和细菌素作用敏感细菌,在含有敏感细菌的双层琼脂上均可形成透明的噬菌斑。形成的噬菌斑随敏感菌株的生长代谢停止而停止扩展。蛭弧菌噬菌斑可随培养时间而扩展,直至宿主菌耗尽。蛭弧菌在死菌上形成噬菌斑的速度更快、数目更多。用检查噬菌体、细菌素的方法很难检出蛭弧菌,用检查蛭弧菌的方法不能检出噬菌体
噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(3)
T偶数噬菌体除头部蛋白和可收缩尾部蛋白质外,还有一些功能不明的内部蛋白占总蛋白质的3%,此外还含有少量其他物质,如酸溶性肽类,主要为门冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸;两种酸溶性多胺——腐胺和精胺。 (三)细菌素的化学组分及理化性质 细菌素是一种具有生物活性蛋白质类物质。大多数细菌素是含有蛋白质
噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(4)
噬菌体侵入宿主细胞进行系列合成反应时,宿主菌细胞本身进行了一系列工作,以修复噬菌体侵入所引起的创伤,并加固胞壁的结构,阻止细胞质的继续渗出。噬菌体巧妙地利用宿主菌细胞的“机器”而有效地合成自身。 (三)细菌素对敏感菌株的作用 细菌素的作用范围很窄,与噬菌体一样有很强的特异性。有的细菌素
噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素(2)
(二)噬菌体的形态与结构噬菌体不能在光学显微镜下观察到,因此,对噬菌体形态、结构的认识,得从电子显微镜开始,这一点与细菌素是相同的。噬菌体个体叫做病毒粒子,它的形状有3种,包括蝌蚪形、微球形和纤丝形。目前已知大部分噬菌体是属于蝌蚪形,它由头和尾两部分组成。噬菌体尾部的结构比较复杂,是感染、吸附、侵入
食肉细菌或能对抗超级病菌
一种自然存在的食肉性细菌能与免疫系统合作清除斑马鱼体内多重耐药菌志贺氏杆菌。研究人员近日将相关成果发表于《当代生物学》期刊。这是噬菌蛭弧菌首次成功被用于抗菌治疗,标志着人们向战胜耐药菌或超级细菌迈出了重要一步。 志贺氏杆菌感染能引发腹泻,每年造成1.6亿病例,其中超过100万人死亡。而且,该
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
实验方法原理 遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物,也可用于以后的分析。
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物,也可用于以后的分析。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个
λ噬菌体噬菌斑的挑取实验
实验方法原理 遗传上同源的 λ 噬菌体原种是通过 "挑取” 一个完全独立的噬菌斑并将含有裂解物的琼脂/琼脂糖保存于贮存液中而获得的。获得的原种可用于制备噬菌体的平板裂解物或液体培养物,也可用于以后的分析。实验材料 λ 噬菌体试剂、试剂盒 氯仿SM仪器、耗材 硼硅酸盐巴斯德设管(配有橡皮球)或微量移液
噬菌体的形态与结构
噬菌体不能在光学显微镜下观察到,因此,对噬菌体形态、结构的认识,得从电子显微镜开始,这一点与细菌素是相同的。噬菌体个体叫做病毒粒子,它的形状有3种,包括蝌蚪形、微球形和纤丝形。目前已知大部分噬菌体是属于蝌蚪形,它由头和尾两部分组成。噬菌体尾部的结构比较复杂,是感染、吸附、侵入宿主细胞的器官。蛭弧菌、
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
实验方法原理 一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用 32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。实验材料 λ 噬菌体文库大肠杆菌铺平板细菌试剂、试剂盒 变性液中和液SM
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
实验方法原理 一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用 32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用 32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理一个从 λ 噬菌体文库中鉴
科学家在人唾液中发现了新的细菌--蛭弧菌
近日美国的研究者在人的唾液中发现了一种新的寄生细菌,该细菌名为蛭弧菌(Bdellovibrio)。这种细菌只有700个基因,并且是发现的第一种晚期靠寄生在其他细菌中存活的细菌。并且这种细菌还与人类的很多疾病相关,包括肠道疾病、囊胞性纤维症和对抗生素的耐药性。 虽然之前科学家也发现了一些细菌可以
噬菌体的分离和鉴定
部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤:1、噬菌体分离(1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内,放入37 ℃温箱培养24h。(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1
表达β半乳糖苷酶噬菌体的噬菌斑分析
材料:LB或NZCYM顶层琼脂或琼脂糖,含有X-gal对于3ml顶层琼脂,加40ul 2%X-gal。X-gal要在临用前才加入已冷却的顶层琼脂(47℃)中。大肠杆菌铺平板细菌只有不是β-半乳糖苷酶的过量表达株,可采用任何支持特异性λ噬菌体裂解生长的大肠杆菌。细菌染色体上单拷贝lacZ基因的存在不影
噬茵体展示技术和噬菌体抗体库
噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术,1985年首次由美国科学家SmithMl在(Science)杂志进行了阐述。噬菌体展示技术的基本原理是将外源蛋白的基因克隆到噬菌体的基因组DNA中,从而在噬菌体的表面表达特定的外源蛋白。Ellis SEp等指出利用噬菌体展示多肽库可以筛选和确定线虫疫苗的
噬茵体展示技术和噬菌体抗体库
噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术,1985年首次由美国科学家SmithMl在(Science))杂志进行了阐述。噬菌体展示技术的基本原理是将外源蛋白的基因克隆到噬菌体的基因组DNA中,从而在噬菌体的表面表达特定的外源蛋白。Ellis SEp等指出利用噬菌体展示多肽库可以筛选和确定线虫
巨-噬-细-胞-吞-噬-功-能-和-杀-伤-功-能-的-检-测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞:如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤],或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液(balanced salt solution, BSS)细菌(如单核
概述噬茵体展示技术和噬菌体抗体库
噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术,1985年首次由美国科学家SmithMl在(Science)杂志进行了阐述。噬菌体展示技术的基本原理是将外源蛋白的基因克隆到噬菌体的基因组DNA中,从而在噬菌体的表面表达特定的外源蛋白。 Ellis SEp等指出利用噬菌体展示多肽库可以筛选和确定线
空斑的概念
空斑( lacuna)在将产生大肠杆菌素的细菌和对该种大肠杆菌素敏感的指示菌与软琼脂混合涂在琼脂面上培养时,即可见到单个细胞产生的大肠杆菌素对指示菌起生长抑制作用的小形抑制斑,这就是空斑。初看似如细菌噬菌体形成的噬菌斑,但它没有感染性,为了与噬菌斑相区别,H.Ozeki(1959)将之命名为空斑。
关于溶藻细菌的方法及机理介绍
溶藻菌对藻细胞作用的方式和可能机理主要有以下5种:直接接触溶藻、释放杀藻物质、细菌与藻竞争营养物、形成菌胶膜及进入藻细胞内杀灭藻细胞。 1、溶藻细菌的— 直接接触溶藻 一些溶藻菌直接与藻细胞接触,通过释放可溶解纤维素的酶而消化藻细胞的细胞壁,进而逐渐溶解整个藻细胞。如前所述的黏细菌对蓝藻、鱼
简述罗伊氏菌素的生化特性及其广谱抗菌性
大多数乳酸菌所产生的细菌素或类细菌素只有很窄的抗菌谱,只能抑制与产生菌种属相近的一些细菌。而罗伊氏菌素是一种广谱有效的抗菌物质,能抑制埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、李斯特菌、弧菌、梭菌、葡萄球菌的生长。研究表明,罗伊氏菌素浓度在15~30μg/ml,可抑制革兰氏阳性菌和阴性菌、酵母、真菌及原生动
弧菌和弯曲菌——霍乱弧菌
弧菌属(Vibrio)广泛分布于自然界,尤以水中为多,有100多种。主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血弧菌(致病性嗜盐菌)。前者引起霍乱;后者引起食物中毒。弯曲菌属(Camphlobacter)形态似弧菌,因G+C含量与弧菌不同,因此另立新属为弯曲菌属。对人致病的主要是空肠弯曲菌和肠道弯曲菌。前者引起急性
分子克隆常用载体(质粒、单链丝状噬菌体和噬粒)
DNA 片段的克隆需要合适的载体,载体或是质粒,或是噬菌体,或是病毒,通常大多经过人工改造[地的。作为载体必须具备两条件:一是该载体在细胞内必须能自主复制,即必须具备复制原点;二是该载体必须具备适合的酶切位点,且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条,保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于获
单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体...
单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体展示系统一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位
小-鼠-巨-噬-细-胞-的-分-离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠,洁 净 环 境 中 饲 养(最好置层流柜中饲养)7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤(Brewerthioglycollate medium,分离炎性腹腔巨嗤细
细菌和噬菌体的遗传分析-1
遗传重组是生命的重要现象之一,在生物进化过程中起着极其重要的作用。从低等的原核生物到高等的哺乳动物其重组方式是多种多样的。真核生物中的遗传重组,主要是通过染色体上的基因自由组合或交换实现的,是生物有性生殖过程的一部分,形成的二倍性合子的遗传组分,一半来自父体,一半来自母体,基因的自由结合和交换是在两
霍乱弧菌及其检验
1.分类(1)血清分型 霍乱弧菌(V.cholerae)有不耐热的H抗原和耐热的O抗原。前者为共同抗原,特异性低,后者具有群特异性和型特异性,是霍乱弧菌分群和分型的基础。根据O抗原的不同,霍乱弧菌现有155个血清群,其中仅O1群和O139群引起霍乱。O139血清群是新出现的型别,与O1群抗血清无交
细菌和噬菌体的遗传分析-4
(2)重组发生在部分二倍体中; (3)只出现一种重组子,不出现相反的重组子(如gal-消失,只剩下gal+)。 三、噬菌体遗传分析 噬菌体是指浸染细菌、放线菌以及真菌的病毒。包括温和、烈性两种,都没有细胞结构,由一个蛋白质外壳包围一段DNA或RNA(烟草花叶病毒为RNA病毒)