微生物的分离、接种和培养技术
一、实验的目的和内容目的：掌握微生物接种和分离纯化技术，掌握无菌操作技术。内容：用平板划线法分离微生物；学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。二、基本原理在自然界中，各种微生物是在互为依赖的关系下共同生活的。因此，为了取出特定的微生物进行纯培养，必须从中把他们分离出来。微生物接种技术是进行微生物实验和相关研究的基本操作技能。无菌操作是微生物接种技术的关键。接种是将微生物或微生物悬液引入新鲜培养基的过程。由于实验目的、培养基种类及实验器皿等不同，所用接种方法不尽相同。斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获得生长良好的纯种微生物为目的。分离培养微生物时，要考虑微生物对外界的物理、化学等因素的影响。即选择该类微生物最适合的培养基和培养条件。在分离、接种、培养过程中，均需严格的无菌操作，防止杂菌侵入，所用的器具必须经过灭菌，接种工具无论使用前后都要经过灭菌，且在无菌室或无菌箱中进行。三、 材料及器材（一）菌种：大肠杆菌、枯草杆......阅读全文
细菌的纯种分离和接种技术注意事项有哪些
细菌的纯种分离和接种技术中，需要注意的事项有：稀释度的问题纯种分离的时候，无非是把菌液稀释一定梯度后，涂布在诸如LB培养基上。如果没有稀释好，就会导致细菌长得太密，或者是细菌根本不长。最优的稀释梯度是最后在平板上的菌落数在30至300之间。此时，能清楚地看清菌落的形态，便于挑取单菌落。基本形态与大小
临床微生物实验室细菌分离接种技术研究进展
近年来, 随着现代医学和科学技术的发展, 新的科技成果正不断地被迅速应用于医学科学研究和临床实践。其中, 临床微生物检验技术也得到快速发展, 各种非培养快速诊断方法的建立缩短了检验时间。但作为循证医学的直接证据, 病原菌分离培养仍然是诊断感染性疾病的金标准, 也是进行体外药物
微生物的培养与分离方法
核心提示：大多数细菌均可以通过人工方法培养，只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。接种与分离方法根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类，采用不同的接种方法。 1．平板划线分离培养法对混有多种细菌，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，
微生物的培养与分离方法
大多数细菌均可以通过人工方法培养，只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。 接种与分离方法 根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类，采用不同的接种方法。 1．平板划线分离培养法 对混有多种细菌，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散
微生物培养与分离方法
接种与分离方法 根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类，采用不同的接种方法。 1．平板划线分离培养法 对混有多种细菌，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法： ①分区划线分离法：此法常用于含
细菌的接种与分离技术方法有哪些？
（一）平板划线分离法在被检标本中，常混杂有多种细菌，平板划线分离法可使这多种细菌在培养基表面分散生长，各自形成菌落，以便根据菌落的形态及特征，挑选单个菌落进行纯培养。常用的平板划线分离法有以下两种：1.连续划线分离法 此法主要用于杂菌不多的标本。用接种环取标本少许，于平板1/5处密集涂布，然后来回作
厌氧菌的分离和培养
1 目的1.1 了解厌氧微生物的生长特性1.2 观察厌氧微生物(双歧杆菌)的形态特征1.3 掌握厌氧微生物的滚管分离、培养与计数技术 2 原理目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;亨盖特厌氧滚管技术.这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术.亨盖特厌氧滚
细菌分离之斜面培养基接种法实验
实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种，也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环（针）灭菌， 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线，然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可，鉴别培养基斜面接种是用接种针，挑取待鉴定菌落的细菌，一般应取菌落
细菌分离之斜面培养基接种法实验
实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种，也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环（针）灭菌， 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线，然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可，鉴别培养基斜面接种是用接种针，挑取待鉴定菌落的细菌，一般应取菌落的顶
土壤中微生物分离纯化培养
一、实验原理从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法。稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落。平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。二、试剂与器材
微生物检验培养与分离方法
大多数细菌均可以通过人工方法培养，而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。一、接种与分离方法 根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类，采用不同的接种方法。1．平板划线分离培养法 对混有多种细菌的临床标本，采用划
土壤中微生物分离纯化培养
一、实验目的掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物 的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。 二、实验原理：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的
微生物的分离和纯化
实验概要本文介绍了倒平板的方法和几种分离纯化微生物的基本操作技术。实验原理在土壤、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，当我们希望获得某一种微生物时，就必须从混杂的微生物类群中分离它，以得到只含有这一种微生物的纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。为了
微生物的分离和纯化
实验原理在土壤、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，当我们希望获得某一种微生物时，就必须从混杂的微生物类群中分离它，以得到只含有这一种微生物的纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件
血培养概述及血样采集和培养瓶接种
血培养是把静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶或培养管中，用来发现、识别细菌或其它可培养分离的微生物（如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等），这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。当细菌或真菌在血液中迅速繁殖超出单核吞噬
血培养概述及血样采集和培养瓶接种
血培养是把静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶或培养管中，用来发现、识别细菌或其它可培养分离的微生物（如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等），这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。当细菌或真菌在血液中迅速繁殖超出单核吞噬
人PBMC分离和培养
1、将静脉血20ｍl用ACD抗凝剂以容积比血：抗凝剂＝9：1抗凝处理2、按血：分离液＝1：2注入国产淋巴细胞分离液上层，400g 20℃离心30分钟3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g，10min洗三次4、获得细胞可做分选或其他实验。体会：1、实验中我用过肝素方法抗凝，但效
新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序
实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内，放一个加热搅拌台，上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯，加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个
土壤中微生物怎样分离纯化培养
1、土样采集：取10cm左右深层土壤10g备用。 2、制备土壤稀释液：称取土壤1g，放入有99mL无菌水的三角瓶中，振荡均匀，即为稀释10－2的土壤悬液。然后进行十倍梯度稀释，依次制备 10－3、10－4、10－5、10－6 、10－7 稀释度的土壤稀释液。
细菌的分离培养、纯培养和生化试验
一、目的掌握细菌 培养、纯培养与基本微生物操作技能，了解生化试验原理、方法和意义。二、实验内容（一）细菌的分离培养：倾注法和划线法（倾注法：此法很少应用）本次试验采用前一种方法）划线法：融化普通琼脂 培养基，倒平板，杂检。取1号菌如图1之一方法划线，37℃培养24h。(二) 钓菌和纯培养：观察菌
细菌的分离培养、纯培养和生化试验
一、目的 掌握细菌 培养、纯培养与基本微生物操作技能，了解生化试验原理、方法和意义。 二、实验内容（一）细菌的分离培养：倾注法和划线法（倾注法：此法很少应用）本次试验采用前一种方法）划线法： 融化普通琼脂 培养基，倒平板，杂检。取1号菌如图1之一方法划线，37℃培养24h。
分离培养技术的材料与方法
1、材料（1）培养基：培养支原体用培养基。（2）器材及试剂：L玻棒、马血清、抑菌剂。2、方法（1）标本的采集;支原体常侵及人和动物的黏膜表面，可用灭菌棉拭子取分泌物接种于2—3ml支原体液体培养基的小管中。若标本是组织块，可在灭菌乳钵或玻璃匀浆器中研成乳浆后接种。取样后应尽快接种培养。分离培养：接种
微生物接种方法之平板划线分离法介绍
平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品
微生物接种方法之液体和半固体接种法介绍
1）液体接种法包括从外面菌种接人培养液，或从液体菌种接入液体培养液，两种情况都可以用接种环接种。但在培养量比较大的情况下，液体接种宜采用移液管接种，要求无菌操作。左手持试管，右手将烧灼过的接种环伸入菌种管，待冷却后，取菌液一环，立即移入培养基管中，在接近液面的管壁上轻轻研磨，然后将试管稍倾斜，并沾取
微生物的分离和纯化实验
在土壤、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，（1）用于细胞分离（2）细胞纯化（3）细胞增殖培养。实验方法原理为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长
微生物的分离和纯化实验
实验方法原理 为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物，直至得到纯菌株。土
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS： NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠，流
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口，用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮
小鼠角质细胞的分离和培养
实验概要本实验是根据Hennings等（1980）的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS： NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口，用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下，用一把镊子夹住身体，另一把镊子拉开皮肤。4) 将