离子交换层析法(ionexchangechromatography)分离氨基酸
实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果。试剂和器材一、试剂与材料苯乙烯磺酸钠型树脂(强酸1×8,100—200目);2mol/L盐酸溶液;2mol/L氢氧化钠溶液。标准氨基酸溶液:天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸均配制成2mg/mL的0.1mol/L的盐酸溶液。混合氨基酸溶液:将3种标准氨基酸溶液按1∶2.5∶10的比例混合。柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液(pH5.8,钠离子浓度0.45mol/L):取柠檬酸(C6O7H8?H2O)14.25g,氢氧化钠9.30g和浓盐酸5.25mL溶于少量水后,定容至500mL,冰箱保存。显色剂:2g水合茚三酮溶于75mL乙二醇单甲醚中,加水至100mL。二、器材20cm×1cm层析管; 恒压洗脱瓶; 部分收集器; 分光光度......阅读全文
离子交换法(ion-exchange-method)进行蛋白质纯化
一、仪器设备:1.塑料管柱(Bio-Rad Econo-Pac column 732-1010, 1.5×12 cm)2.分划收集器(fraction collector, 另需准备干净试管约60 支)3.浓缩用离心机(低速5,000 rpm)及浓缩离心管Centriplus二、药品试剂:1.DEA
色谱术语的常用中英文对照
液相色谱法 liquid chromatography,LC液液色谱法 liquid liquid chromatography,LLC液固色谱法 liquid solid chromatography,LSC正相液相色谱法 normal phase liquid chromatography反相液
ic离子色谱仪与液相色谱仪hplc的区别
1. 离子色谱法 ion chromatography, IC 狭义地讲,是基于离子性化合物与固定相表面离子性功能基团之间的电荷相互作用实现离子性物质分离和分析的色谱方法;广义地讲,是基于被测物的可离解性(离子性)进行分离的液相色谱方法。1975年Small发明的离子色谱是以低交换容量离子交换剂作固
ic离子色谱仪与液相色谱仪hplc的区别
1. 离子色谱法 ion chromatography, IC 狭义地讲,是基于离子性化合物与固定相表面离子性功能基团之间的电荷相互作用实现离子性物质分离和分析的色谱方法;广义地讲,是基于被测物的可离解性(离子性)进行分离的液相色谱方法。1975年Small发明的离子色谱是以低交换容量离子交换剂作固
实验室分析方法离子交换色谱法概念介绍
离子交换色谱法(IEC, ion exchange chromatography)物的液相色谱法。以离子交换作用分离离子型化合物的液相色谱法。
离子交换柱层析分离核苷酸实验_离子交换层析法
本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法,掌握离子交换柱层析的分离原理和方法,熟练掌握紫外吸收分析方法。实验方法原理本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离
凝胶层析法(gel-chromatography)脱盐和分离蛋白质1
(一)原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽,所
凝胶层析法(gel-chromatography)脱盐和分离蛋白质3
灌注凝胶时要求将均匀的凝胶一直加到所需柱床高度,不能时断时续,否则将出现分层或“纹路”等毛病。若中途出现这些现象,可以用玻璃棒将已形成的柱床逐步搅起,直至出毛病的部分再让凝胶重新沉降或继续加入搅匀的凝胶悬液。若在灌好胶后才发现“纹路”、分层等现象时,要重新装柱,以免影响层析效果。在做大型的凝胶柱时,
凝胶层析法(gel-chromatography)脱盐和分离蛋白质2
葡聚糖具有较强的亲水性,在水和电解质溶液中膨胀成为柔软而富于弹性的凝胶,其吸水能力与葡聚糖凝胶的交联度有密切关系。交联度大的,孔径小,吸水少,膨胀的程度小;交联度小的,孔径大,吸水多,膨胀的程度大。因此,葡聚糖凝胶孔径的大小可以其吸水量的大小来表示,常以G–10至G–200号码标记。G后面的数字是其
离子交换层析实验——基本方案
离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒离子交换缓冲液仪器、耗材离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤1.
实验室分析常用的缩写中英文对照和概念介绍
缩略语英文名称中文名称AAAamino acid analysis氨基酸分析AASatomic absorption spectrophotometry原子吸收分光光度法AEDatomic emission detection原子发射检测AESatomic emission spectrometry
生化分离技术——柱层析(colum-chromatography)分离(1)
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱
生化分离技术——柱层析(colum-chromatography)分离(2)
由于某些原因,用到的淋洗剂多是大包装的(便宜嘛),我们这里是用10升或25升的塑料桶装的,就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质,其他的杂质就可想而知了,所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了,反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后
色谱术语收录大全
色谱图chromatogram;色谱峰chromatographic peak;峰底peak base;峰高h,peak height;峰宽W,peak width;半高峰宽Wh/2,peak width at halfheight;峰面积A,peak area;拖尾峰taili
《生物化学》――名词解释
氨基酸(amino acids): 是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物,氨基一般连接在α-碳上。氨基酸是肽和蛋白质的构件分子。 必需氨基酸(essential amino acids): 指人(或其它脊椎动物)自己不能合成,需要从饮食中获得的氨基酸,例如赖氨酸、苏氨酸等
色谱分析法按分离原理分类
按分离原理分类 :吸附色谱(Absorption chromatography);分配色谱(Partition Chromatography);离子交换色谱(Ion Exchange Chromatography);凝胶色谱(Gel Chromatography)。
关于蛋白质纯化技术—色谱法的基本介绍
色谱法(chromatography)是蛋白纯化中最常用的一种方法,这种方法既可以制备大量的纯化蛋白质,又可以保持蛋白质的生物学活性。色谱的种类很多,可分为常规色谱和高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)。凝胶过滤色谱、离子交换色谱
离子排斥层析的概念和原理
中文名称离子排斥层析英文名称ion exclusion chromatography;ion chromatography exclusion;ICE定 义基于离子交换剂的唐南(Donnan)排斥力为基础的层析法。可使强电解质与弱电解质或非电解质分离。分离阴离子用强酸性高交换容量的阳离子交换树脂,
离子色谱(ion-chromatography,IC)分离方式和检测方式的选择
分析者对待测离子应有一些一般信息,首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况,如无机还是有机离子,离子的电荷数,是酸还是碱,亲水还是疏水,是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子,如Cl-或K+,最好用HPIC分离。水合能
离子色谱法(Ion-Chromatography)的基本内容介绍
用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器,为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰,设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。 以阴离子交换树脂(R-OH)作固定相,分离阴离子(如Br-)为例。当待测阴离子Br-随流动相(NaO
如何应用离子交换层析分离氨基酸混合物
离子交换树脂是一种合成的高聚物,不溶于水,能吸水膨胀.高聚物分子由能电离的极性基团及非极性的树脂组成.极性基团上的离子能与溶液中的离子起交换作用,而非极性的树脂本身物性不变.通常离子交换树脂按所带的基团分为强酸(=R=S03H)
离子交换色谱法介绍
离子交换色谱法(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中)
离子交换层析法
离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处
你必须知道的色谱词汇(一)
色谱图 chromatogram 色谱峰 chromatographic peak 峰底 peak base 峰高 h,peak height 峰宽 W,peak width 半高峰宽 Wh/2,peak width at half height
蛋白质纯化技术—离子交换色谱法的介绍
离子交换色谱法(ion exchange chromatography,IEC)是根据物质的酸碱度、极性和分子大小的不同进行分离的技术,通常包括吸附、吸收、扩散、穿透、静电引力等复杂的物理化学过程。自然界的包括蛋白质在内的生物大分子都带有电荷,当所需分离的物质通过离子交换色谱柱时,由于所带电荷、
关于高效液相色谱的离子交换的原理介绍
(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流 动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:X-(溶剂中) (树脂
高效液相色谱法离子交换分离原理介绍
(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流 动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中) (
离子交换色谱法的分离原理
(Ion-exchange Chromatography)IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:X-(溶剂中) (树脂-R4N C
关于离子对色谱法(Ion-Pair-Chromatography)的简介
离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子) 加到流动相或固定相中,使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物,从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示: X+水相+ Y-水相=== X+Y-有机相 式中:X+水相--流动相中待分离的有机离子(
离子交换层析实验
离子交换层析技术 实验方法原理 离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离