蛋白质分析技术(AnalyticalTechniquesforProtein)2
二、透析和超滤1.透析（Dialysis）：就是利用蛋白质分子不能通过半透膜（Semipermeable membrane）而小分子可以自由透过的性质，使蛋白质与小分子物质分开。作用：脱盐、无机离子和小分子物质等。透析膜：动物膜、羊皮纸、火棉胶、赛璐玢或其他材料等。2.超滤（ultrafiltration）：是利用压力和离心力，借助于超滤膜将不同分子量的物质分离的技术。Ultrafiltration的功能：纯化和浓缩（同PEG，聚乙二醇）。Ultrafiltration膜：丙烯晴、醋酸纤维素、硝酸纤维素和尼龙等。第三节 蛋白质的电泳技术（electrophoresis） 一、基本原理 1. 分子的运动速度与迁移率 （1）蛋白质分子在电场中的泳动速度（v） F电场力 = (E/d) q；F阻力 = 6πrηv； 当F电场力 = F阻力时， (E/d)q = 6πrηv， v = Eq/(6πrηd)。r：分......阅读全文
大连色谱会最新通知－80余场邀请报告确定
尊敬的各位同行： 第2 届大连国际色谱学术报告会及仪器展览会包含第37届国际高效液相色谱及相关技术会议(含仪器展览会) (HPLC 2011 Dalian) 及第18届全国色谱学术报告会及仪器展览会(18th NSEC)，将于2011年10月8-11日在大连召开。 为使更多色谱工作者
酵母表达外源蛋白（foreign－protein）（2）
如果是用自己配置的培养基，如玉米浸提液、麦芽浸提液、麦麸浸提液等等，可以不用换液，采取添料来维持酵母对培养基的营养需要。用无机盐进行大规模发酵，更省钱。大规模发酵时，甲醇的流加速度增加不要太快。另外使用纯氧并不昂贵，在武汉买个钢瓶600元左右，一瓶纯氧20元。一个批次100h左右估计3－4 瓶氧气。
Mapping－Protein－Distributions－on－Polytene－Chromosomes－by－Immunostaining2
12. Hold the salivary glands at the common duct with tweezers.Transfer the glands to a drop of fixing solution on a siliconizedcoverslip. 13. Incubate
Bleeding－and－intravenous－techniques－in－pigs
The ear veinsThe marginal ear veins are the only veins that are easily visible on pigs of any size. Usually there are three prominent veins. The later
蛋白质提取与纯化技术2
2、等电点沉淀法 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最小，因而溶解度也最小，各种蛋白质的等电点有差别，可利用调节溶液的pH达到某一蛋白质的等电点使之沉淀，但此法很少单独使用，可与盐析法结合用。 3、低温有机溶剂沉淀法 用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出，此法分
BCEIA2023环境分析主题分会：探讨环境与健康新关系
2023 年9月6-8日，第二十届北京分析测试学术报告会暨展览会(简称BCEIA2023)在北京·中国国际展览中心（顺义馆）召开。大会同期设置了多个主题论坛以及电子显微学与材料科学、质谱学、光谱学、色谱学、磁共振波谱学、电分析化学、生命科学中的分析技术、环境分析、化学计量与标准物质、标记免疫分析
蛋白质提取与制备(Protein－Extraction－and－Preparation)1
蛋白质提取与制备蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的，大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、
蛋白质提取与制备(Protein－Extraction－and－Preparation)6
PH 值：与沉淀蛋白质或酶原理相同，结晶的溶液PH 值一般选择在被结晶的蛋白质或酶的等电点附近，以利于晶体的析出。温度：除少数情况外，通常选择低温条件进行。低温条件对蛋白质和酶不仅溶解度低且不易变性。在中性盐溶液中结晶时，温度可在0℃至室温范围内选择，在有机溶剂中结晶一般要求温度较低。晶种：不易结晶
蛋白质提取与制备(Protein－Extraction－and－Preparation)4
蛋白质提取液中，除包含所需要的蛋白质（或酶）外，还含有其它蛋白质、多糖、脂类、核酸及肽类等杂质。除去的方法有：1）核酸沉淀法该法可用核酸沉淀剂和氯化锰、硫酸鱼精蛋白或链霉素等。必要时也可用脱氧核糖核酸酶除去核酸。即在粗匀浆中加入少量DNase,于4℃保温30～60min，可使DNA 降解为足够小的碎
蛋白质提取与制备(Protein－Extraction－and－Preparation)5
确定沉淀蛋白质所需硫酸铵浓度的方法将少量样品冷却到0～5℃，然后搅拌加入固体硫酸铵粉末，见蛋白质产生沉淀时，离心除去沉淀，分析上清液确定所要蛋白质的浓度，如它仍在溶液中则弃去沉淀，再加更多的硫酸铵于上清液中，直到产生蛋白质沉淀时止。以所要提取的蛋白质在溶液中的浓度对硫酸铵浓度作图，得沉淀曲线，找出蛋
蛋白质提取与制备(Protein－Extraction－and－Preparation)3
水溶液提取：大部分蛋白质均溶于水、稀盐、稀碱或稀酸溶液中。因此蛋白质的提取一般以水为主。稀盐溶液和缓冲溶液对蛋白质稳定性好、溶度大，也是提取蛋白质的最常用溶剂。盐溶液提取：以盐溶液及缓冲液提取蛋白质进常注意下面几个因素。盐浓度等渗盐溶液尤以0.02～0.05mol/L 磷酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液常用
尿素对蛋白质的变性作用(denaturation－of－protein)
一、实验目的深入了解蛋白质的变性作用的含义。2.掌握常用蛋白质变性剂的种类。二、实验原理天然蛋自质分子中的肽链以一定的方式盘绕曲折，形成特定的构象。这种构象的维持，主要依赖于蛋白质分子中的氢键。尿素能破坏氢键，导致蛋白质分子结构松弛，使蛋白质变性，变性后，蛋白质的肽链就伸展开来，从而使原来包藏在分子
RAPD分析技术2
（2）扩增结果差，条带模糊或难以辨认。――更换Taq聚合酶缓冲液。――检查引物（使用另外一个引物，或者将引物末端标记，在 16% 6mol/L尿素聚丙烯酰胺胶上电泳检测）。――检查Taq聚合酶活性（与不同批量的酶作比较）。――改变DNA浓度。（3）高相对分子质量产物弥散状分布>4kb。――降低DNA
Sample－preparation－(analytical－gels)
Sample preparation and solubilization are crucial factors for the overall performance of the 2-D PAGE technique. Protein complexes and aggregates shou
核酸和蛋白质序列分析2
（2）输出：除了以文本形式外，还可以通过JalView显示和编辑结果。此外，还可以另外使用GeneDoc（常见于文献）及DNAStar软件等显示结果。多序列比对的结果还用于进一步绘制进化树。3、ORF(Open Reading Frame)分析从核酸序列翻译得到蛋白质序列，需要进行ORF分析，每个生
Antibody－Purification－using－Protein－A,－Protein－G,－or－Protein－L－Agarose
实验概要This protocol is designed as a quick purification method for antibodies from mammalian sera, ascites, and cell culture supernatants. It should
Antibody－Purification－using－Protein－A,－Protein－G,－or－Protein－L－Agarose
实验概要This protocol is designed as a quick purification method for antibodies from mammalian sera, ascites, and cell culture supernatants主要试剂 Protein
蛋白质分析技术(WesternBlot－ELISA免疫荧光与免疫组化技术)2
2 类型（1）间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体，检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。 常用于临床血清中自身抗体的检测，以及杂交瘤上清特异性抗体的筛选。如血清中PDCD5自身抗体的检测。(2) 双抗体夹心法测抗原是检测抗原最常用的方法。只要获得针对受检抗原的特
蛋白质相互作用(protein－interaction)实验方法
免疫共沉淀和亲和层析共分离：免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法，如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体，无论用抗A或抗B的抗体或与A或 B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来。因此广泛用于蛋白质相互作用研究。常用的小珠：GST-Agarose（不需要抗
标记免疫分析技术2
四、发光免疫分析：发光免疫分析：直接用发光物质标记抗原或抗体生物的发光剂：荧火虫荧光素（酶催化发光）化学的发光剂：鲁米那、吖啶脂等在有过氧化氢的弱碱溶液中即可迅速发光。美国CHIRON公司生产的ACS-180使用类均相的包被抗体的磁性微粒，扩大了反应面，加速了免疫反应，又应用吖啶脂作标记的化学发光分
DNA序列分析技术2
3)电泳电极缓冲液 1 倍TBE（pH 值8.0）预电泳 30 分钟至1 小时恒温方式 测序胶板上夹盖铝恒温板电泳温度 50℃左右电泳条件 恒功率 90～110W电泳时间 2.5 小时至5 小时4)干胶制备和压片电泳结束后取下胶板，用工具撬开玻璃板，使胶留在其中一块板上。将裁剪好的新华3 号滤纸在胶
蛋白质的微量测序分析实验2
测定N-末端封闭蛋白质的内部序列实验材料蛋白质试剂、试剂盒乙酸NaOH丽春红染料三氟乙酸仪器、耗材纤维素膜离心管滤膜实验步骤1. 电泳分离目标蛋白并转移到硝酸纤维素膜。 2. 将硝酸纤维素膜放入盛有50 ml 含0.1%丽春红S料的1%乙酸水溶液的经酸洗的petri 玻璃培养皿。轻轻摇动1 mi
2010全国质谱大会大会报告（三）
美国力可公司 李莉博士 美国力可公司的李莉博士做了题为“高通量飞行时间质谱及全二维气相色谱在代谢组学及环境分析中的最新应用研究”的报告。李博士介绍了力可公司的高通量飞行时间质谱TOFMS和全二维气相-飞行时间质谱联用仪GC×GC-TOFMS。前者是一款高通量的仪器，李博士称之为“全世界最快的质谱”
蛋白质二级结构预测(protein－secondary－structure－prediction)
蛋白质二级结构的预测开始于20世纪60年代中期。二级结构预测的方法大体分为三代，第一代是基于单个氨基酸残基统计分析，从有限的数据集中提取各种残基形成特定二级结构的倾向，以此作为二级结构预测的依据。第二代预测方法是基于氨基酸片段的统计分析，使用大量的数据作为统计基础，统计的对象不再是单个氨基酸残基，而
蛋白质二级结构(protein－secondary－structure)预测软件
蛋白质二级结构的预测通常被认为是蛋白结构预测的第一步，二级结构是指α螺旋和β折叠等规则的蛋白质局部结构元件。不同的氨基酸残基对于形成不同的二级结构元件具有不同的倾向性。按蛋白质中二级结构的成分可以把球形蛋白分为全α蛋白、全β蛋白、α＋β蛋白和α/β蛋白等四个折叠类型。预测蛋白质二级结构的算法大多以已
TEM－Specimen－Preparation：Preparative－Techniques－for－the－TEM
For routine transmission electron microscopy (TEM), it is generally accepted that specimens should be thin, dry and contain molecules which diffract e
Azalea－Phylogeny－Reconstructed－by－Means－of－Molecular－Techniques
Plants belonging to the Rhododendron subgenera Pentanthera (deciduous) and Tsutsusi and Azaleastrum (evergreen) are called azaleas. Concerning their m
Size－and－Shape－of－Protein－Molecules4
Determining the Molecular Weight of a Protein Molecule—Combining S and R s à la Siegel and MonteWith the completion of multiple genomes and increasing
分析细胞学技术2
显微吸收光度测量需满足朗伯-比尔定律条件，待测物质需为均质，但生物学物质很少是均质的，而且显微镜成像过程中，经过光路系统各界面多次折射反射后会导致测量中的分布误差、闪烁误差、系统误差等，影响测量精度。所以除校正系统至最佳状态外，常用双波长法、一波二区法和扫描法来消除误差。扫描法是最令人满意的方法。测
Radioiodination－of－protein
Radioiodination (by Jun Takagi,6/16/2000)Purpose and backgroundsPrinciple of radioiodinationAddition of oxidizing reagents (such as chloramine-T or pe