胰蛋白酶的制备及活力的测定2

(9)0.8 mol/L pH9.0硼酸缓冲液:取20ml 0.8 mol/L硼酸溶液,加80ml 0.2 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计检查校正。(10)0.4 mol/L pH9.0硼酸缓冲液(用0.8 mol/L稀释1倍即可);(11)0.2 mol/L pH8.0硼酸缓冲液:取70ml 0.2 mol/L硼酸溶液,加30ml 0.5 mol/L四硼酸钠溶液,混合后,用pH计校正。(12)0.05 mol/L pH8.0 Tris-HCl 缓冲液:取50mL 0.1 mol/LTris加29.2 mL mol/L HCl 加水定容至100mL。(13)底物溶液的配制:即每毫升0.05 mol/L pH8.0 Tris-HCl 缓冲液中加0.34mgBAEE和2.22mg的氯化钙。2、器材(1)新鲜或冰冻猪胰脏(2)食品加工机和高速分散器。(3)研钵。(4)大玻璃漏斗。(5)布氏漏斗。(6)抽滤瓶。(7)纱布。(8......阅读全文

血清胰蛋白酶的测定意义

  正常时胰蛋白酶很少进入血循环,健康人血清中存在的主要为游离胰蛋白酶原-1,没有游离的胰蛋白酶。  急性胰腺炎时,血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高,其峰值可达参考值上限的2~400倍,两种胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的类型及严重程度有关。  轻型者:80%~99%为游离胰蛋白酶原-1及极少的结合型的胰蛋

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定2

试剂和器材试剂1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度):取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 µg/mL的溶液。2.样品待测液:准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 µg/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时,要求RNA制品的每mL待

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定3

同时,为了监测分离纯化的效果,我们必须对相应的结果进行检测。对于酶而言,主要通过其催化特异的反应进行监测。溶菌酶对革兰氏阳性菌的细胞壁有明显的破坏作用,可利用这一特性进行溶菌酶活性的监测,以便我们区分在纯化过程中,含有溶菌酶的组分。类似的采用 DEAE- 纤维素对抗体进行精制,特别是经过初步纯化后的

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定1

一、实验目的和内容目的:1. 通过本次实验的学习和操作,要求学生掌握离子层析的原理以及离子交换层析的操作方法;2. 掌握离子交换树脂的再生和保存;3.掌握比色法测定溶菌酶的酶活。内容:采用离子交换层析对实验二获得的初提液,进行进一步的分离纯化以得到较高纯度的溶菌酶。具体来说包括:1.离子交换层析分离

种子活力测定方法

(一)红四氮唑( TTC)染色法1.将种子用温水(约30℃)浸泡2--6小时,使种子充分吸胀。2.随机取种子100粒,红花、蓖麻等具有外壳的需要去掉外壳,豆类种子要去皮。然后沿种胚中央准确切开,取一半备用。3.将准备好的种子浸于2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中,于恒温箱( 30~35℃)

抗原的制备方法2

表2-1 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数  0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242 278 3

植物组织中蔗糖酶活力的测定

一、目的 了解植物  组织中提取蔗糖酶的方法,掌握蔗糖酶活力测定的原理。二、原理 本实验以Nelson 方法测定酶活力,其原理是:蔗糖酶可将非还原性的蔗糖水解为葡萄糖和果糖,而葡萄糖作为还原糖含有的自由醛基,在碱性溶液中将Cu 2+ 还原,还原糖本身被氧化成羟酸;砷钼酸试剂与氧化亚铜生成蓝色复合物(

酶的提取、分离、纯化及其活力测定

一、实验目的酶是植物体内具有催化作用的蛋白质,植物体内的生化反应,一般都是在酶的作用下进行的,没有酶的催化反应,植物的生命也就停止了,因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来,加以分离、纯化,不同的研究目的对酶制剂的纯度要求也不相同,有些工作只需要粗的酶

蛋白酶的活力测定方法介绍

蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1 福林酚法蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基氨基酸的多少

蛋白酶的活力测定方法介绍

蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1福林酚法蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基氨基酸的多少成正比

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

免疫血清的制备及效价测定

制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、

白细胞介素2的制备及鉴定实验

实验概要本实验制备了白细胞介素2(IL2),并进行了鉴定实验。IL2是Th细胞受有丝分裂原或特异性抗原刺激后,并在白细胞介素1的辅助下,产生的一种可溶性糖蛋白。IL2是体内重要的广谱免疫增强因子,临床上常用于治疗免疫缺陷病及肿瘤等。实验步骤1. 制备粗制IL2无菌采血,肝素抗凝,用RPMI1640按

多克隆抗体的制备、纯化及免疫电泳2

⒊ 注射抗原 ⑴ 准备两只成年兔,将100µg抗原/兔溶入1ml磷酸缓冲溶液中待用。在1ml福氏不完全佐剂中加入分枝杆菌制成完全佐剂,并加入1ml抗原溶液,剧烈震荡使之充分乳化,用3ml注射器抽取该乳化液,接上25G针头,排除注射器中的气泡。从笼中取出兔子放在平坦处,在4个不同的部位进行皮下注射

血清ALP活力测定生化检验

在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。1.血清ALP活性升高:见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移医学教育网整理、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。2.血清ALP活性降低:比较少见,主要见于呆小病,磷酸酶

植物花粉生活力测定

在育种工作中,有时需要将花粉保存一段时间。虽然人们已经知道,花粉保存以温度较低(0~15℃),空气湿度稍干(不能太干)、黑暗条件下为宜。但是各种不同植物花粉寿命长短相差悬殊,这一是由花粉本身的特征决定的,二是由贮藏条件决定的。一般来说,禾谷类作物花粉的寿命较短,自花授粉植物花粉的寿命尤其短,如小麦在

碱性卵白酶活力测定方法

酶活力是指酶催化某些化学反映的能力。酶活力的巨细可以用在一定条件下它所催化的某一化学反映的速率来表现。测定酶活力现实就是测定被酶所催化的化学反映的速率。酶促反映的速率可以用单元时间内反映底物的淘汰量或产物的增加量来表现,为了敏捷起见,通常是测定单元时间内产物的天生量。由于酶促反映速率可随时间的推移而

血清ALP活力测定生化检验

在临床上,血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。尤其是黄疸的鉴别诊断。 1.血清ALP活性升高: 见于骨paget病、胆道梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移医学教育网整理、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。 2.血清ALP活性降低: 比较少见,主要见于

果胶酶的固定化及其活力测定

一、实验目的:果胶酶(EC.3.2.1.15)广泛存在于植物界,参与果实的成熟及其它代谢过程。在果品加工业中,果胶酶主要用于果汁的澄清和提高榨汁率。果胶酶的固定化将有助于提高酶的利用率,同时还可减少外源物质对果制品的污染。果胶酶需求量大,且多为一次性使用,既造成了很大的浪费,又大大提高了产品生产成本

Denovix-Celldrop™-FL在花粉活力测定的应用

Denovix CellDrop™ FL 推出全新应用方向—花粉活力测定,助力您的科研之旅,摆脱繁复的血球计数板花粉计数,轻松高效解决花粉计数问题。传统花粉活力测定多使用发芽测定和使用血细胞计数器结合手动计数,既费时又费力也带来较多的人为误差,CellDrop™ FL使用Fluorescein di

硝酸还原酶活力的测定(离体法)

一、原理硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活

尿胰蛋白酶的测定的临床意义

  (1)胰蛋白酶原的分子量比较小(25kd),很容易由肾小球滤出,但是肾小管对胰蛋白酶原-2的回吸收低于胰蛋白酶原-1,尿中前者的浓度较大。  (2)在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原-2的浓度明显升高。  有报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原-2的特异性为95%,敏感性为94%,说明其优于淀粉酶,是一个比较

关于胰蛋白酶的测定法介绍

  取底物溶液3.0ml,加0.001mol/L盐酸溶液200μl,混匀,作为空白。另取供试品溶液200μl,加底物溶液(恒温于25.0℃±0.5℃)3.0ml,立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25℃±0.5℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ A),在253nm的波长处,每

细胞计数及活力测定实验——台盼兰染色法

实验方法原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损

胰蛋白酶的类别及贮藏方法

类别蛋白分解酶贮藏遮光,密封,在阴凉干燥处保存。制剂注射用胰蛋白酶

植物花粉生活力测定技术

在育种工作中,有时需要将花粉保存一段时间。虽然人们已经知道,花粉保存以温度较低(0~15℃),空气湿度稍干(不能太干)、黑暗条件下为宜。但是各种不同植物  花粉寿命长短相差悬殊,这一是由花粉本身的特征决定的,二是由贮藏条件决定的。一般来说,禾谷类作物花粉的寿命较短,自花授粉植物花粉的寿命尤其短,

细胞色素c活力测定方法概况

  细胞色素c氧化晦 (Cytochrome e oxidase,COX)亦称细胞色素氧化酶,存在于真核生物细胞的线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量,是线粒体电子传递链末端氧化。COX单体为2-亚铁血红素,23)铜蛋白,相对分子质量为150~200kuKD)COX的每个单体由至少13条不同的

种子生活力的剥皮法快速测定实验

实验方法原理:此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料:苹果

种子生活力的剥皮法快速测定实验

实验方法原理此法适于测定休眠状态的种子的生活力。种子深休眠的原因很多,有些是因为果皮或种皮的束缚(如不透水、不透气)造成的,也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂,这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后,胚就很快萌发。实验材料苹果柑桔玉