细胞计数及活力测定实验——台盼兰染色法

实验方法原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力,了解冻存和复苏的效果。 用台盼兰染细胞,死细胞着色,活细胞不着色,从而可以区分死细胞与活细胞。利用细胞内某些酶与特定的试剂发生显色反应,也可测定细胞相对数和相对活力。实验材料细胞悬液试剂、试剂盒台盼兰四甲基偶氮唑盐酸化异丙醇仪器、耗材普通显微镜血球计数板试管吸管酶标仪 分光光度计实验步骤一、细胞计数 1. 将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。 2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。 ......阅读全文

细胞计数及活力测定实验——台盼兰染色法

实验方法原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损

如何用台盼兰计数活细胞?

用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2000个/毫升,在0.1毫升细胞悬液中加0.1毫升0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色细胞是死细胞。

如何用台盼兰计数活细胞?

将样品适当稀释后,用稀释后的样品和0.4%的台盼兰溶液按1:1混合后,用移液枪点样到血球计数板,置于倒置显微镜下观察、计数,其中蓝色细胞是死细胞,因活细胞排斥台盼兰,不被染色。

细胞计数及活力测定实验

台盼兰染色法             实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞

细胞计数及活力测定实验

台盼兰染色法             实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞

细胞计数及活力测定实验

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用

细胞计数及活力测定

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。计算细胞数目可用血球计数盘或是 Coulter counter 粒子计数器自动计数。 血球计数盘一般有二个 chambers,每个 chamber 中细刻

细胞计数及活力测定

实验方法原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有

细胞计数及活力测定

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用

细胞计数及活力测定实验的实验原理

  培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。  在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用

细胞活性检测台盼蓝细胞计数

台盼蓝(Trypan Blue)计数法台盼蓝(BI,货号:03-102-1B)是一种蓝色细胞活性染料,无法通过结构完整的细胞膜进入细胞内部;但细胞死后,丧失细胞膜稳定性,台盼蓝会进入细胞将细胞染成蓝色,因此在细胞实验中,常规地搭配自动细胞计数仪或血球计数板,应用于分辨活细胞和死细胞、及检测细胞膜的完

台盼蓝染色法

材料:1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管;2. 试剂:0.4%台盼蓝染液;3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g;4. 生理盐水:100ml;操作步骤:1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;3. 再加入适量H

台盼蓝染色法

材料:      1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴

细胞计数及活力的测定

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用

细胞计数及活力测定方法1

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。 血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber 中细刻9 个

细胞计数及活力测定方法2

(三)MTT法测细胞相对数和相对活力活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使 MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。l、细胞悬液以 1000rpm离心 10分钟,弃上清液。2、沉淀加入 0.5-1ml MTT,吹打成悬液。3、37℃下保温 2小时。4、加入

细胞计数和活力测定实验方法

器材和试剂: 1. 倒置相差显微镜,具有10×物镜;2. 标注体积刻度的试管(圆锥形底);3. 改良的Neubauer血细胞计数器;4. 计数器盖玻片;5. 袖珍管或等体积的塑料容器,如试管或离心管;6. 巴斯德吸管(短型和长型);7. 可调体积的微量加样器(100—250μl);8. 无菌枪尖;9

细胞计数及活力测定原理和操作步骤

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞 ,总细胞 中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞 一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损

细胞培养细胞计数时为什么要用台盼蓝染色?

参加台盼蓝后,活细胞不上色,台盼蓝上色的细胞呈深蓝色,是不健康或已逝世的细胞,不能计数。

原代细胞计数的操作步骤

一、原代细胞计数 将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。 静置3分钟。 镜下观察,计算计数板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算:     细胞数/ml=4大格细胞总数/ 4×10000 注意:镜下偶

台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(一)

台盼蓝 (Trypan Blue) 染色法是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不被染色;而死细胞的胞膜不完整,通透性增加,可使台盼蓝渗入将细胞染成蓝色。因此,借助台盼蓝染色可以简单、快速地区分活细胞和死细胞。想当年小编还是初入实验室的

台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(三)

台盼蓝浓度不同的台盼蓝浓度对细胞染色会有不同影响吗?Nexcelom的科学家们将同一Jurkat细胞样本与0.4%,0.2%,0.1%,0.05%和0.025%的台盼蓝以1:1比例混合,以下是部分浓度染色后的细胞图片: 下面的直方图统计了不同浓度台盼蓝检测到的死细胞(较深着色)和“气球”状细胞的浓度

台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(二)

在下面的小视频中,台盼蓝染料被缓缓加入在室温培养了168小时的Jurkat细胞。大家可以清楚地看到部分细胞被染成蓝色后迅速膨胀和破裂,染色随即变浅,细胞失去形态变成“气球“。整个过程仅几秒钟。 有视频为证,这些“气球“状物体就是死细胞的残骸。但当我们在显微镜下计数时,这些“气球”由于颜色太浅通常不会

目前细胞计数的常用方法

Countstar自动细胞计数仪技术特点:1.宽泛的样本检测范围:测量浓度范围:1×104—3×107/ml;直径范围:5-180µm,可检测各种传代细胞及原代细胞,干细胞,藻类,浮游生物,酵母细胞,白细胞等。2.经济节约的配套耗材成本:每个样品测量盘可检测5个样品,提供实验结果的平行性及可重复性检

【实验技巧】台盼蓝染色

台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。机理 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,

如何解决台盼蓝染色PBMCs进行细胞计数的问题?

“为什么很难用台盼蓝染色剂来计数PBMC!有大的,小的,成团的……;你能告诉我怎么在未染色的细胞中挑出有核细胞?”小编经常被问到各种各样关于如何计数PBMC的问题,今天就借此机会跟大家分享一下。 首先,了解下人类PBMCs的组成      外周血单核细胞(Peripheral blood monoc

细胞计数的原理

一、原理    培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。    在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细

细胞活力测定技术(荧光法和染色法)

用途 在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的;相反,不产生荧光的细胞,表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性,用染料处理时,活原生质体不吸收染料,细胞未染上颜色,而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。(一)荧光法操作步骤荧光法1、制备细胞和原生质体材料。取花药挤压花粉,取幼

细胞活力测定技术(荧光法和染色法)

用 途  在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的;相反,不产生荧光的细胞,表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性,用染料处理时,活原生质体不吸收染料,细胞未染上颜色,而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。操作步骤 (一)荧光法 1. 制备细胞和原生质体材料。取花药挤

台盼蓝(trypan-blue)排斥实验

实验方法原理台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。实验材料细胞试剂、试剂盒台盼蓝生理盐水仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及