动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定2

试剂和器材试剂1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度):取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 µg/mL的溶液。2.样品待测液:准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 µg/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时,要求RNA制品的每mL待测液中至少含有20µg DNA,才能进行测定。3.二苯胺试剂:使用前称取1g重结晶二苯胺,溶于100mL分析纯的冰乙酸中,再加入10mL过氯酸(60%以上),混匀待用。临用前加入1mL1.6%乙醛溶液。所配得试剂应为无色。器材1.分析天平 2.恒温水浴 3.试管 4.吸量管(2mL和5mL) 5.分光光度计 [附3]地衣酚显色法测定RNA含量 原理 核糖核酸与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变为糠醛,后者与3,5-二羟基甲苯(地衣酚)反应呈鲜绿色,该反应需用三氯化铁或氯化铜作催化剂,反应产物在670nm处有最大吸......阅读全文

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定2

试剂和器材试剂1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度):取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 µg/mL的溶液。2.样品待测液:准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 µg/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时,要求RNA制品的每mL待

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定1

原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液中沉淀RNA,大部分蛋白质仍处于溶解状态。(3)以去污剂如十二烷基硫

肝脏细胞RNA的提取

一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的,

动物肝脏DNA的提取

一、目的:了解分离提取DNA的一般原理,掌握从动物肝脏中提取DNA的方法。二、原理:在浓氯化钠(1—2mol·L-1)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠(0.14mol·L-1 )溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应,在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内,光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法...1

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA 与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液

从动物肝脏中提取DNA

一、原理:在浓氯化钠(1—2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。将抽提得的核蛋

动物RNA提取实验

SV总RNA试剂盒提取法 Trizol试剂提取法             实验方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA

动物RNA提取实验

实验方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA 纯化系统)可在1小时内从组织、培养细胞和白细胞中提取纯化完整总RNA,方法简单、快速。该系统以膜为基础,根据组织类型的不同,每次最多可纯化60 mg 组织。系统包含DNase 处理步骤,直接在小离

如何从动物肝脏中提取DNA?

  一、原理:   在浓氯化钠(1—2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。   将

肝脏细胞RNA的提取操作方法

一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是

动物RNA提取实验原理

RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关

肝脏细胞RNA的提取原理、材料和方法

一.原理 RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆和基因表达分析等实验是至关重要的,如

动物组织RNA提取及纯化

实验概要提取样品组织中的RNA并消除DNA污染实验原理Trizol裂解细胞使RNA释放beta巯基乙醇一直RNase活性酚-氯仿抽提分离RNARNase-Free DNase消除DNA污染主要试剂Trizol无水乙醇氯仿(三氯甲烷)异丙醇RQ1 RNase-Free DNase(Promega,M6

铁锅补铁效果有限-动物肝脏效果更好

  近日,“用铁壶烧水泡茶能够补铁”的消息在网上热传,对此,中国农业大学食品学院营养与食品安全系副教授范志红指出,铁锅溶出铁为非血红素铁,吸收率并不高,大概只有3%以下。在物质匮乏的年代,对于缺铁的人来说,铁锅溶出铁可以帮助预防贫血。但在物质丰富的今天,吃半斤动物肝脏,得到的铁远比用铁锅炒菜多得多。

提取动物关节软骨组织总RNA

实验目的       研磨破碎软骨组织(大鼠膝关节软骨),提取其总RNA。 实验原理       充分磨碎软骨样品(大鼠膝关节软骨),再用相关试剂提取其总RNA。 实验材料和器具样品:大鼠膝关节软骨仪器:多样品组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-24)耗材:研磨罐(上海净信,***ml),

动物RNA提取实验——SV总RNA试剂盒提取法

动物RNA提取可用于:(1)研究生物体基因调控机制;(2)分子克隆和基因表达以获得该性状基因;(3)可以对特定的基因表达进行定量的检测,从分子水平精确的了解细胞生命活动的规律。实验方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA 纯化系统)可在1小时内从组织、培养

哺乳动物RNAi技术-Mammalian-RNA-Interference

Mammalian RNA InterferenceThomas TuschlLaboratory for RNA Molecular BiologyThe Rockefeller University, New York Excerpted from RNAi: A Guide To Gene S

动物总RNA的提取及含量测定

一、实验目的(1)了解制备RNA几种方法的原理及优缺点(2)掌握稀碱法提取兔肝RNA的原理和操作技术二、实验原理 细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备

动物RNA提取实验——Trizol试剂提取法

实验方法原理Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70

Nature重磅!利用单细胞RNA测序构建人类肝脏细胞图谱

  肝脏是人体最大、功能最多的器官之一,在人体的新陈代谢及免疫过程中发挥着关键作用。更值得关注的是,肝脏还是人体唯一一种仅需原体积的25%,就能够完全再生的内脏器官。另外,包括脂肪肝、肝癌及肝炎在内的各类肝病是当今世界最大的健康问题之一,也是导致死亡的主要原因。  尽管肝脏对人类健康极为重要,但健康

Nature重磅!利用单细胞RNA测序构建人类肝脏细胞图谱

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动物实验表明――体细胞经诱导可转化为肝脏细胞

  中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所惠利健研究小组新近完成的关于转化型肝脏细胞研究,在国际上首次证明了肝脏以外的体细胞可以被诱导直接转化为肝脏细胞。该研究论文于5月12日在线发表在国际顶尖学术刊物《自然》杂志上。有关专家认为,该研究为将来从病人自身体细胞诱导获得肝脏细胞奠定了基

立式高速冷冻离心机分离动物肝脏细胞的方法

       动物肝脏细胞匀浆后,其成分大致可分为:一是完整的的细胞器,包括细胞核、线粒体、溶酶体、微粒体和分泌颗粒。二是膜相系统,包括细胞膜、内质膜和高尔基体等。在等渗介质中用匀浆器对动物肝脏细胞进行匀浆,通过立式高速冷冻离心机差速离心,各步沉淀中包含着不同的匀浆成分。分离过程如下:       

立式高速冷冻离心机分离动物肝脏细胞的方法

动物肝脏细胞匀浆后,其成分大致可分为:一是完整的的细胞器,包括细胞核、线粒体、溶酶体、微粒体和分泌颗粒。二是膜相系统,包括细胞膜、内质膜和高尔基体等。在等渗介质中用匀浆器对动物肝脏细胞进行匀浆,通过立式高速冷冻离心机差速离心,各步沉淀中包含着不同的匀浆成分。分离过程如下:第一次离心:用50mL尖底塑

立式高速冷冻离心机分离动物肝脏细胞的方法

    动物肝脏细胞匀浆后,其成分大致可分为:一是完整的的细胞器,包括细胞核、线粒体、溶酶体、微粒体和分泌颗粒。二是膜相系统,包括细胞膜、内质膜和高尔基体等。在等渗介质中用匀浆器对动物肝脏细胞进行匀浆,通过立式高速冷冻离心机差速离心,各步沉淀中包含着不同的匀浆成分。分离过程如下:        *次

哺乳动物细胞总RNA快速分离

试剂、试剂盒 尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 EDTASDS 乙酸钠水平衡的苯酚 乙醇 Tris-Cl NaCL实验步骤 一 材料与设备1)尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 (PBS)    2)10 mmol/L  EDTA (pH8.0 )    3)0.5% SDS   4)0. l mol/L 乙酸钠(p

哺乳动物细胞总RNA快速分离

            试剂、试剂盒 尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 EDTA SDS 乙酸钠 水平衡的苯酚  乙醇 Tris-Cl  NaCL

哺乳动物细胞总RNA的分离

哺乳动物细胞总RNA的分离细胞的裂解提取步骤注意事项  这一从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序系为Favaloro 等(1980)所介绍程序的改良。该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个细胞的哺乳动物组织中分离RNA。但不适用于从固体组织中提取RNA,因为用这种裂解

哺乳动物细胞总RNA的分离

实验概要本实验介绍了从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序,该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个细胞的哺乳动物组织中分离RNA。但不适用于从固体组织中提取RNA,因为用这种裂解细胞的方法(在SDS存在的条件下用蛋白酶K消化)去消化组织速度很慢,导致内源性RNA酶在被蛋