蛋白质的定量测定——福林酚法(Folin—酚试剂法)
实验原理 Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时较长,要严格控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。凡干扰双缩脲反应的基团,如 -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2以及Tris缓冲液、蔗糖、硫酸铵、巯基化合物均可干扰Folin—酚反应,而且对后者的影响还要大得多。此外,酚类、柠檬酸对此反应也有干扰作用。 Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠组成。蛋白质中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物。乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成。此试剂在碱性条......阅读全文
蛋白质含量测定实验——folin—酚试剂法
蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验方法原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即f
Folin酚试剂法的优缺点有哪些
优点:灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多。缺点:费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰folin-酚反应(Lowry反应)。而且对后者的影响还要大得多。
自动熔点仪法检测对苯二酚的熔点
对苯二酚是一种有机化合物,主要用于制取黑白显影剂、蒽醌染料、偶氮染料、橡胶防 老剂、稳定剂和抗氧剂。在有机化学领域中,对于纯粹的有机化合物一般都有固定的熔点, 熔点测定是辨认物质本性的基本手段,也是纯度测定的重要方法之一。在国家标准《工业用 对苯二酚》中对对苯二酚的熔点测定方法和结果有明确的规
盐酸地匹福林的类别及贮藏方法
类别眼科用药贮藏遮光,密封,在干燥处保存。
盐酸地匹福林滴眼液的鉴别方法
(1)取本品约5m1,加氢氧化钠试液2ml,放置数分钟,溶液显淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365nm)下观察,显黄色荧光。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
关于盐酸地匹福林滴眼液的使用禁忌
禁忌:未经手术的闭角型青光眼禁用。甲状腺功能亢进、高血压、冠状动脉供血不全、心律不齐、糖尿病等患者禁用。对本品过敏者禁用。 注意事项:无晶体的病人应用肾上腺素30%出现黄斑水肿。 孕妇及哺乳期妇女用药:由于妊娠期及哺乳期使用本品的安全性尚未确立,孕妇或哺乳期妇女应权衡利弊,在医生指导下方可使
盐酸地匹福林滴眼液的基本性状
本品为无色澄明液体。
盐酸地匹福林滴眼液的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品,即得。对照品溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见盐酸地匹福林含量测定项下。
盐酸地匹福林的杂质及制剂类型
制剂盐酸地匹福林滴眼液杂质质IH3CCH,, HCIO4CH3C19H27NO5·HClO4449.8(士)3,4二羟基2′甲氨基苯乙酮3,4二新戊酸酯高氯酸盐
盐酸地匹福林滴眼液的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品约5m1,加氢氧化钠试液2ml,放置数分钟,溶液显淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365nm)下观察,显黄色荧光(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。检查pH值应为3.5~5.0(通则0631)。有关物质照高效液相色谱法(通则051
简述盐酸地匹福林滴眼液的药理毒理
据文献报道,地匹福林是肾上腺素的前药(Pro-drug),本身无生物活性,进入眼组织后在催化酶的作用下,迅速水解成肾上腺素而发挥生物效应,引起散瞳、降眼压。 本品具有高度脂溶性,滴眼液滴眼后极易透过角膜屏障进入眼内。研究证明地匹福林的眼内通透性比肾上腺素强10~17倍。0.1%地匹福林的降眼压
盐酸地匹福林的性状鉴别检查方法
性状本品为白色或类白色结晶性粉末;无臭;有引湿性;与日光或空气接触易变质本品在水中极易溶解,在乙醇中易溶,在乙酸乙酯中极微溶解,在石油醚中几乎不溶熔点本品的熔点(通则0612)为161~166℃,熔距在2℃以内。鉴别(1)取本品约10mg,加氢氧化钠试液10ml使溶解,溶液缓缓呈淡黄色,将此溶液置紫
关于新福林滴眼剂的基本介绍
新福林滴眼液,由盐酸新福林、焦亚硫酸钠、尼泊金等成分制成。为2%-5%溶液,用于散瞳检查,特点是作用时间短,不麻痹调节机能,一般不引起眼内压升高,且可耐煮沸消毒。临床上用于感染中毒性及过敏性休克、室上性心动过速、防治全身麻醉及腰麻时的低血压、散瞳检查。 【药物名称】 品名:新福林滴眼液 别
关于地匹福林的适应症介绍
1、药品名称 中文名称:地匹福林 别名:肾上腺素异戊酯,双特戊酰肾上腺素 外文名:Dipivefrin,Dipivalyl Epinephrine,DPE 2、适应症 本身并无生物活性,进入眼组织后迅速水解成肾上腺素而发挥生物效应,引起散瞳、降眼压;主要治疗各型青光眼。主要适用于控制慢
关于新交感酚的基本信息介绍
新交感酚(Phenylephdrine),别名苯肾上腺素、新福林、新内弗林、苯福林、麦撒苯同肾上腺素、去氧肾上腺素、盐酸苯肾上腺素、盐酸去甲羟麻黄碱、新辛内弗林、Neo-Synephrine,为循环系统心肺复苏及抗休克药物。 用法用量: 1.用于升压,一次2~5mg,10~15min重复1次
高速逆流色谱法分离制备丹酚酸B
摘 要:采用高速逆流色谱法分离纯化丹参水溶性成分丹酚酸类物质,制备丹酚酸B 化学对照品。分离采用的溶剂系统为正己烷2乙酸乙酯2水2甲醇(1. 5 :5 :5 :1. 5) ,上相做固定相,下相做流动相,流速为1. 7 mL/ min ,仪器转速850 rpm ,进样量80 mg ,纯度用HPLC 方
酚试剂(Lowry)法测血清蛋白质含量
一、 相关理论1、 血清(浆)蛋白质是血清(浆)固体成分中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化和物。2、 血清(浆)蛋白质的分类:目前已研究的有300 余种,已分离提纯的有100 余种,大部分在肝脏合成。1) 盐析法可将血浆蛋白分为白蛋白(Albumin, Alb 或A)和球蛋白(Globulin,
多酚氧化酶活性的测定(氧电极法)
原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化生成醌。多酚氧化酶活性可以用氧电极测量反应耗氧的速度,或用比色法测量产物的形成,常用的底物如儿茶酚(邻苯二酚)和多巴(3,4-二羟苯丙氨酸)。 仪器药品 测氧仪
Folin酚法的标准曲线测定法概述
取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。再逐管加入0.5
植物组织总RNA的制备:异硫氰酸胍—酚法
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下:GIT与β-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性;GIT与 十二烷基肌氨酸钠 (Sarcosyl)作用使蛋白质变性,从而释放RNA;酸性条件下DNA极少发生解离,同蛋白质一起变性被离心下来,RNA则溶于上清中。该法所提RNA纯度高完整性好较适合纯化mRNA,
异硫氰酸胍酚法植物组织总RNA的制备
异硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下:GIT与β-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性;GIT与 十二烷基肌氨酸钠 (Sarcosyl)作用使蛋白质变性,从而释放RNA;酸性条件下DNA极少发生解离,同蛋白质一起变性被离心下来,RNA则溶于上清中。该法所提 RNA纯度高完整性好较适合纯化mR
Folin酚法的实验所需试剂与器材
试剂(1)试剂甲(A,B):(A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸钾钠 (KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。(B) 0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。(2)试剂乙:在
蛋白质浓度测定的标准曲线图
蛋白质浓度测定的标准曲线图如下:蛋白质浓度的测定方法有:1、 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。2、Lo
蛋白质浓度测定的标准曲线图
蛋白质浓度测定的标准曲线图如下:蛋白质浓度的测定方法有:1、 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。2、Lo
蛋白质含量的测定:Folin酚试剂法(Lowry法)和考马斯...
蛋白质含量的测定—Folin-酚试剂法(Lowry法)和考马斯亮蓝法 1.学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法。 2. 进一步掌握分光光度法——求标准曲线、准确测定未知样品、正确使用仪器。 原理 蛋白质浓度可以从它们
使用盐酸地匹福林滴眼液的不良反应
1、用法用量: 一次1~2滴,一日1~2次,滴于结膜囊内,滴后用手指压迫内毗角泪囊部3~5分钟。 2、不良反应: 地匹福林浓度仅为肾上腺素的1/10~1/20,因此不良反应的发生率要比肾上腺素低得多。溶液滴眼对血压和心率影响较小。但能引起散瞳(未经手术的闭角型青光眼禁用)和无晶体性黄斑病变
关于新福林滴眼剂的鉴别测定介绍
(1) 取药品10mg,加水1ml 溶解后,加硫酸铜试液1 滴与氢氧化钠试液1ml ,摇匀,即显紫色;加乙醚1ml 振摇,乙醚层应不显色。 (2) 取药品10mg,加水1ml 溶解后,加三氯化铁试液1 滴,即显紫色。 (3) 药品的水溶液显氯化物的鉴别反应(附录Ⅲ)。 (4) 药品的红外光
盐酸地匹福林的性状及鉴别方法
性状本品为白色或类白色结晶性粉末;无臭;有引湿性;与日光或空气接触易变质本品在水中极易溶解,在乙醇中易溶,在乙酸乙酯中极微溶解,在石油醚中几乎不溶熔点本品的熔点(通则0612)为161~166℃,熔距在2℃以内。鉴别(1)取本品约10mg,加氢氧化钠试液10ml使溶解,溶液缓缓呈淡黄色,将此溶液置紫
盐酸地匹福林滴眼液的性状及贮藏方法
性状本品为无色澄明液体。鉴别(1)取本品约5m1,加氢氧化钠试液2ml,放置数分钟,溶液显淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365nm)下观察,显黄色荧光(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
关于新福林滴眼剂的含量测定介绍
取药品约0.1g,精密称定,置碘瓶中,加水20ml使溶解,精密加溴滴定液(0.1mol/L)50ml,再加盐酸5ml,立即密塞,放置15分钟并时时振摇,注意微开瓶塞,加碘化钾试液10ml ,立即密塞,振摇后,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失