Folin酚法的标准曲线测定法概述
取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。再逐管加入0.5毫升试剂乙(Folin—酚试剂),同样立即混匀。这一步混合速度要快,否则会使显色程度减弱。然后在室温下放置30分钟,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于700nm处测定各管中溶液的吸光度值。以蛋白质的量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制出标准曲线。 注意:因Lowry反应的显色随时间不断加深,因此各项操作必须精确控制时间,即第1支试管加入5毫升试剂甲后,开始计时,1分钟后,第2支试管加入5毫升试剂甲,2分钟后加第3支试管,余此类推。全部试管加完试剂甲后若已超过10分钟,则第1支试管可立即加入0.5毫升试剂乙,1分钟后第2支试管......阅读全文
Folin酚法的标准曲线测定法概述
取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。再逐管加入0.5
概述Folin酚法的实验原理
这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(可订购),逐渐被考马斯亮兰法所取代。 此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在
概述Folin酚法的样品的测定内容
取1毫升样品溶液(其中约含蛋白质20~250微克),按上述方法进行操作,取1毫升蒸馏水代替样品作为空白对照。通常样品的测定也可与标准曲线的测定放在一起,同时进行。即在标准曲线测定的各试管后面,再增加3个试管。如上表中的8、9、10试管。 根据所测样品的吸光度值,在标准曲线上查出相应的蛋白质量,
Folin酚法的实验原理
这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(可订购),逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件
关于Folin酚法的相关介绍
Folin-酚法(Lowry法)最灵敏的蛋白质测定方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。
Folin酚法的用途和功效
Folin-酚法(Lowry法)最灵敏的蛋白质测定方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。
关于Folin酚法应用试剂的介绍
试剂 (1)试剂甲(A,B): (A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。 (B) 0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。
Folin酚法的实验操作方法
标准曲线测定取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/L)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。再逐管加入
Folin酚试剂法的优缺点有哪些
优点:灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多。缺点:费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰folin-酚反应(Lowry反应)。而且对后者的影响还要大得多。
Folin酚法的实验所需试剂与器材
试剂(1)试剂甲(A,B):(A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸钾钠 (KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。(B) 0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。(2)试剂乙:在
为什么酚标准曲线会弯曲
弯曲很正常,因为是做实验得出来的数据,是数据就有误差,但是总体来看还是直的酚,是羟基(-OH)与芳烃核(苯环或稠苯环)直接相连形成的有机化合物。羟基直接和芳烃核(苯环或稠苯环)的sp2杂化碳原子相连的分子称为酚,这种结构与脂肪烯醇有相似之处,故也会发生互变异构,称为酚式结构互变。但是,酚的结构较为稳
蛋白质含量的测定:Folin酚试剂法(Lowry法)和考马斯...
蛋白质含量的测定—Folin-酚试剂法(Lowry法)和考马斯亮蓝法 1.学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法。 2. 进一步掌握分光光度法——求标准曲线、准确测定未知样品、正确使用仪器。 原理 蛋白质浓度可以从它们
bca法标准曲线公式
bca法标准曲线公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的,然后在分光光度计上测出来,把读数跟已知的浓度做一个曲线(有可能是直线),这就是标准曲线 然后再测你的目标样品的浓度,用读数在标准曲线上找到对应的真实浓度。实验试剂① 试剂A,1
什么是标准曲线法
标准曲线法也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法.与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线.具体方法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线
bca法标准曲线公式
bca法标准曲线公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的,然后在分光光度计上测出来,把读数跟已知的浓度做一个曲线(有可能是直线),这就是标准曲线 然后再测你的目标样品的浓度,用读数在标准曲线上找到对应的真实浓度。实验试剂① 试剂A,1
bca法标准曲线公式
bca法标准曲线公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的,然后在分光光度计上测出来,把读数跟已知的浓度做一个曲线(有可能是直线),这就是标准曲线 然后再测你的目标样品的浓度,用读数在标准曲线上找到对应的真实浓度。实验试剂① 试剂A,1
bca法标准曲线公式
bca法标准曲线公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的,然后在分光光度计上测出来,把读数跟已知的浓度做一个曲线(有可能是直线),这就是标准曲线 然后再测你的目标样品的浓度,用读数在标准曲线上找到对应的真实浓度。实验试剂① 试剂A,1
标准曲线法和标准加入法,如何区分
在分析化学中,特别是仪器分析实验中,经常用某物质已校正的标准曲线来求相应物质的未知浓度。标准曲线通常是一条过原点的直线,被测组分含量可从标准曲线上求得。以分光光度计法为例,某特定波长的光经过某物质,可以被该物质吸收、反射等,并且其浓度(c)与吸光度(A)之间在一定浓度范围内符合朗伯-比尔定律。但有时
蛋白质含量测定法福林酚法(Lowry法)
本法系依据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与Cu2+螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋
标准曲线法和标准加入法有什么不同
标准曲线法:最常用的定量方法具体做法:采用相同的处理方式配制一系列已知浓度(c1
教你如何区分标准曲线法和标准加入法
在分析化学中,特别是仪器分析实验中,经常用某物质已校正的标准曲线来求相应物质的未知浓度。标准曲线通常是一条过原点的直线,被测组分含量可从标准曲线上求得。以分光光度计法为例,某特定波长的光经过某物质,可以被该物质吸收、反射等,并且其浓度(c)与吸光度(A)之间在一定浓度范围内符合朗伯-比尔定律。
外标法和标准曲线法的区别
外标法和标准曲线法的区别为:外标法:是与内标法相对,指按梯度添加一定量的标准品(对照品)于空白溶剂中制成对照样品,与未知试样平行地进行样品处理并检测。不同浓度的标准品进样,以峰面积为值绘制成标准曲线,从而推算出未知试样中被测组分浓度的定量方法。标准曲线法:也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定
蛋白质含量测定实验
folin—酚试剂法 考马斯亮蓝法 实验方法原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(
Folin酚试剂法测定蛋白质含量
一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨
关于标准曲线法的定量方法介绍
标准曲线法,也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法。与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线。 用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线应
原子吸收标准曲线法测含量
用标准曲线法及标准管法测定物质含量方法如下:1、标曲必须每次都得做。因为仪器自身的性能会影响到标曲的。2、得看样品的稳定性之类的因素。碰上在溶液中放一年也不变化的,3、碰上生物样品的话,还在是每次做含量测定前,老老实实的做一下标曲。
怎么用标准曲线法求含量
标准曲线是直角坐标中一条通过原点的直线,纵坐标为仪器相应信号(吸光光度法中为吸光度A),横坐标是对应的溶液中(吸光)物质的浓度。我们测定了未知样品中的A值,可在坐标系直线上找到对应的浓度值。由此按照原液稀释倍数等计算出原液的浓度或含量。
原子吸收标准曲线法测含量
用标准曲线法及标准管法测定物质含量方法如下:1、标曲必须每次都得做。因为仪器自身的性能会影响到标曲的。2、得看样品的稳定性之类的因素。碰上在溶液中放一年也不变化的,3、碰上生物样品的话,还在是每次做含量测定前,老老实实的做一下标曲。
内标法需要做标准曲线吗
对建立的方法进行验证时必须做标准曲线。需要注意的是内部法的标准曲线是样品浓度对样品与内标的风面积之比的直线回归。
蛋白质含量测定实验——folin—酚试剂法
蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验方法原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即f