蛋白质的定量测定——福林酚法(Folin—酚试剂法)

实验原理 Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时较长,要严格控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。凡干扰双缩脲反应的基团,如 -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2以及Tris缓冲液、蔗糖、硫酸铵、巯基化合物均可干扰Folin—酚反应,而且对后者的影响还要大得多。此外,酚类、柠檬酸对此反应也有干扰作用。 Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠组成。蛋白质中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物。乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成。此试剂在碱性条......阅读全文

盐酸地匹福林滴眼液的性状鉴别检查方法

性状本品为无色澄明液体。鉴别(1)取本品约5m1,加氢氧化钠试液2ml,放置数分钟,溶液显淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365nm)下观察,显黄色荧光(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。检查pH值应为3.5~5.0(通则0631)。有关物质照高

bradford法和lowry法是什么法

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

bradford法和lowry法是什么法

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

lowry法测定和酚酞试剂法有什么区别

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

烷基酚类化合物和双酚的测定固相萃取/高效液相色谱法

1 适用范围本标准规定了测定水中烷基酚类化合物和双酚 A 的高效液相色谱法。本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中 4-叔丁基苯酚、 4-丁基苯酚、 4-戊基苯酚、4-己基苯酚、 4-庚基苯酚、 4-辛基苯酚、 4-支链壬基酚、 4-叔辛基苯酚和 4-壬基酚等 9 种烷基酚类化合物和双酚

紫外可见分光光度计检测蛋白酶活性

蛋白酶【测定原理】中性蛋白酶在一定的温度和pH条件下,水解酪素底物产生含有酚基的氨基酸,在碱性条件下,将福林试剂还原,生成钼蓝与钨蓝,其颜色深浅与酚基氨基酸含量成正比。通过在660 nm测定其吸光度,可得到酶解产生的酚基氨基酸的量,计算出蛋白酶活力,以此代表蛋白酶的总酶活力。【酶活测定】取3支试

酚试剂分光光度法的目的和用途

是中华人民共和国国家标准室内空气质量标准规定中空气中甲醛测定方法之一,其基本原理为空气中的甲醛与酚试剂[盐酸3-甲基苯并瞻唑胺,C6H4SN(CH3)C=NNH2.HCI,简称MBTH 反应,生成嗪,在高铁离子存在下,嗪与酚试剂的氧化产物反应生成蓝绿色化合物,在波长630 nm处用分光光度法测定。采

关于酚试剂分光光度法的基本介绍

  是中华人民共和国国家标准室内空气质量标准规定中空气中甲醛测定方法之一,其基本原理为空气中的甲醛与酚试剂盐酸3-甲基苯并瞻唑胺,C6H4SN(CH3)C=NNH2.HCI,简称MBTH 反应,生成嗪,在高铁离子存在下,嗪与酚试剂的氧化产物反应生成蓝绿色化合物,在波长630 nm处用分光光度法测定。

国家药典委公示酚磺乙胺标准(高效液相法)

  近日,国家药典委员会就酚磺乙胺标准公示征求意见,标准涵盖高效液相等方法,具体原文如下:  我委拟修订酚磺乙胺标准(具体修订内容见附件),现公示征求意见,公示期自上网之日起三个月。该标准适用于生产上述品种的所有企业。请各有关单位认真复核。若有异议,请来函与我委联系,来函需加盖公章并附相关说明及充分

蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法所需试剂与器材

1.试剂(1)试剂甲:(A)10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。(B)0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。(2)试剂乙:在2升磨口回流瓶中

对乙酰氨基酚片溶出度测定——转篮法

实验材料对乙酰氨基酚片试剂、试剂盒盐酸水氢氧化钠仪器、耗材溶出度测定仪圆底烧杯转篮风光光度计水浴锅微孔滤膜不锈钢丝网对乙酰氨基酚片为解热镇痛类非处方药药品。用于普通感冒或流行性感冒引起的发热,也用于缓解轻至中度疼痛如头痛、关节痛、偏头痛、牙痛、肌肉痛、神经痛、痛经。必理通用于缓解轻中度疼痛,如头痛、

甲醛测定方法介绍酚试剂分光光度法

酚试剂分光光度法灵敏度高,但选择性较差;乙酰丙酮分光光度法灵敏度略低,但选择性较好。一、原理甲醛与酚试剂反应生成嗪,在高铁离子存在下,嗪与酚试剂的氧化产物反应生成蓝绿色化合物。根据颜色深浅,用分光光度法测定。本法检出限为0.1μg/5ml(按与吸光度0.02相对应的甲醛含量计),当采样体积为10L时

酚、挥发酚和不挥发酚的区别及含酚废水治理方法

   酚是一种重要的化工原料,广泛应用于杀虫剂、杀菌剂、化工、制药、合成纤维等行业。酚类化合物具有高毒性、难降解、持久性等特征,是重要的有机污染物之一。酚类为原生质毒,属高毒物质,人体摄入一定量会出现急性中毒症状;长期饮用被酚污染的水,可引起头痛、出疹、瘙痒、贫血及各种神经系统症状。当水中含酚0.1

蛋白质浓度测定的临床意义

  异常结果  1、 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。  2、Lowry法:Cu+与蛋白质在碱性溶液中

蛋白质浓度测定的正常值及临床意义

  正常值  人体正常值一般是60一80g/L。  临床意义  异常结果  1、 双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白

关于地匹福林的用法和注意事项介绍

  一、用量用法   0.1%滴眼剂,每次1滴,每12小时滴1次。0.1%滴眼剂1日2次滴眼,与2%肾上腺素1日2次滴眼相比,疗效稍差,而与2%毛果芸香碱1日4次滴眼的疗效相等。滴眼后30分钟内发生作用,1小时后作用达高峰 [2] 。   二、注意事项   1.滴后常有烧灼或刺痛感;有的病人还

关于新福林滴眼剂的物质检查介绍

  酸度 取药品0.50g ,加水50ml溶解后,依法测定(附录Ⅵ H),pH值应为4.5-5.5 。酮体 取药品,加水制成每1ml 中含2.0mg 的溶液,照分光光度法(附录Ⅳ A),在310nm 的波长处测定吸收度,不得大于0.20。有关物质避光操作。取药品,加甲醇制成每1ml 中含20mg的溶

关于盐酸地匹福林滴眼液的适应症介绍

  1、成份:  本品主要成份为盐酸地匹福林。  化学名称:(±)3,4―二羟基―α―〔(甲氨基)甲基〕―苯甲醇―3,4―二新戊酸酯盐酸盐  分子式:C19H29NO5·HCl  分子量:387.90  2、性状:本品为无色澄清液体。  3、适应症:治疗开角型青光眼、高眼压症、色素性青光眼、新生血管

BHA、BHT、PG混合使用时的测定方法

目前国内的一些食品厂,近年来,有的将三种或其中的两种,分别用于高油脂的食品中如饼干、巧克力、奶糖、花生米、核桃仁罐头等BHA、BHT、PG混合使用时BHA与 BHT的总量不得超过0.1g/kg,即100mg/kg, 而 PG不得超过50mg/kg。本法是用石油醚将食品中的三种抗氧化剂萃取出来,然后从

食品模拟物中双酚A的测定高效液相色谱法

食品接触材料高分子材料 食品模拟物中双酚A的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了食品模拟物中双酚A的测定方法本标准适用于食品模拟物水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液、橄榄油中双酚A的测定 2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包

蛋白浓度测定及常用方法

蛋白质溶液浓度测定方法有多种,下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定,往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。一、蛋白浓度的直接测定(UV法)这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测

血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定4

V 蛋白质含量测定一、双缩脲法测定蛋白质浓度(一)目的了解并掌握双缩脉法测定蛋白质浓度的原理和方法。(二)原理具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应,在碱性溶液中蛋白质与硫酸铜形成紫色络合物,在 540nm 处有最大吸收。在一定浓度的范围内,蛋白质浓度与双缩脲反应所呈的颜色深浅成正比,可用比色

改良LOWRY比色法与酚试剂法在原理上的不同

不同浓度 0.01 0.025 ,0.05,0.1, 0.2mol L-1尿素溶液和20mLpH6.7 柠檬酸缓冲液37培养,培养结束后滤液中被脲酶水解成的氨氮用靛酚兰比色测定

近红外光谱法快速检测烟草中总多酚含量

多酚是烟叶中重要的香气前体物之一,其含量与烟叶颜色和卷烟的香气味有关; 在抽吸过程中,多酚及其热解产物转移到烟气中,直接影响烟气香味; 测定烟叶中的多酚含量对了解烟叶品质和指导卷烟配方有很大意义。烟草多酚的检测方法有高锰酸钾滴定法,光谱分析法和色谱分析法等。本文是用分光光度法检测总多酚含量,而后用近

种子生活力溴麝香草酚兰(BTB)法鉴定实验

实验方法原理:凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用,吸收空气中的O2,同时放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不稳定解离成H+和HCO3-。由于H2CO3不断解离,就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图:   它的变色范围为pH6.0-7.6之间,它

种子生活力溴麝香草酚兰(BTB)法鉴定实验

实验方法原理凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用,吸收空气中的O2,同时放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不稳定解离成H+和HCO3-。由于H2CO3不断解离,就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图: 它的变色范围为pH6.0-7.6之间,它在酸性

种子生活力溴麝香草酚兰(BTB)法鉴定实验

实验方法原理 凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用,吸收空气中的O2,同时放出CO2,CO2溶于水生成H2CO3,H2CO3不稳定解离成H+和HCO3-。由于H2CO3不断解离,就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图: 它的变色范围为pH6.0-7.6之间,它在酸

治疗神经原性膀胱功能障碍的相关介绍

  一、治疗原则  1.非手术治疗:间歇导尿或长期导尿。药物治疗。封闭治疗和去神经治疗。电刺激治疗等。  2.手术治疗:尿流改道。经尿道膀胱颈切除。外括约肌切开术。膀胱颈部V-Y成形术。  二、用药原则  膀胱反射亢进(急迫性尿失禁)而无残余尿时,可选用普鲁本辛、羟丁宁、盐酸双环胺、黄酮呱酯。而有残

测定植物体内可溶性蛋白质含量(LoWry法与劳里法)

实验概要本文介绍了LoWry法与劳里法测定植物体内可溶性蛋白质含量的原理及操作步骤等。实验原理LoWry法是双缩脲法(BIureT)和福林酚法(FolIn-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在

血糖的测试方法

葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法:特异性强、价廉、方法简单。其正常值:空腹全血为3.6~5.3毫摩尔/升(65~95毫克/分升),血浆为3.9~6.1毫摩尔/升(70~110毫克/分升) 。福林——吴氏法福林——吴氏法:此法测得之血糖含量,并非全部为葡萄糖,有不少是非糖的还原物质。因而测得的数值比实际高