高通量植物(转)基因检测的利器植物材料直接PCR技术

摘要: 北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒(RP3301)成功解决了各种难提植物RNA的问题后,新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒(PR7501),该试剂盒不需要液氮和研磨杵研磨,也不需要钢珠破碎,更不借助任何特殊的仪器设备,方法及其方便快捷。 众所周知,在正向遗传学的基因定位,植物品质和品种鉴定,或者是植物有效成分检测,以及转基因检测等,都需要高通量植物的DNA提取,然后PCR检测。尤其是在基因图位克隆中,需要构建一个大的群体(少则几千株,多则上万株),然后提取DNA,PCR方法筛选性状的连锁标记(SSR,RAPD等),最后测序克隆基因。传统方法在DNA提取中,都要液氮研磨样品,然后氯仿抽提,最后再PCR。上千株系DNA的提取就需要几周的时间。一些公司进行改进,开发了相对简单些的方法,用96孔吸附板进行提取,完成整个实验也需要大约1个小时;也有些公司在......阅读全文

高通量植物(转)基因检测的利器——植物材料直接PCR技术

摘要:  北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒(RP3301)成功解决了各种难提植物RNA的问题后,新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒(PR7501),该试剂盒不需要液氮和研磨杵研磨,也不需要钢珠破碎,更不借助任何特殊的仪器设备,方法及其

高通量植物(转)基因检测的利器植物材料直接PCR技术

  高通量植物(转)基因检测的利器---植物材料直接PCR技术   摘要: 北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒(RP3301)成功解决了各种难提植物RNA的问题后,新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒(PR7501),该试剂盒不需要

高通量植物(转)基因检测的利器植物材料直接PCR技术

  摘要: 北京百泰克生物技术有限公司暨推出通用植物总RNA提取试剂盒(RP3301)成功解决了各种难提植物RNA的问题后,新近又针对高通量植物DNA的提取扩增推出了最新产品——植物直接PCR试剂盒(PR7501),该试剂盒不需要液氮和研磨杵研磨,也不需要钢珠破碎,更不借助任何特殊的仪器设备,方法及

植物组织直接PCR

实验概要本实验以拟南芥叶片为试材介绍了一个不用提取DNA直接进行PCR的简单方法。主要试剂0.25N   NaOH0.25N    HClNP-40缓冲液:0.5N Tris-HCI, pH8.0 ,25% NP-40实验步骤1. 取面积约为lmm2的植物叶片放在500ul离心管中,加入40ul的0

高通量的PCR模板植物基因组DNA制备方法(一)

摘  要:制备大量生物样品的模板DNA用于PCR检测是费时费人工的工作。本文介绍一种高通量的植物基因组DNA(gDNA)快速制备及其用于PCR基因型检测的操作方法。将一小段单子叶植物苗叶片(长度约30 mm或40 mm,与96方孔板的孔深大致相同) 或一小块(约2~4 mg)双子叶植物叶片放入9

高通量的PCR模板植物基因组DNA制备方法(四)

2.3  高通量的分子标记检测 本方法制备的DNA浓度虽然低,用96针复制器加入0.5~1 µL模板进行33~35个PCR循环就可获得足够浓度的产物,并不需要加入特别多的Taq酶(甚至使用量为每45~50 µL PCR反应液1 U也能扩增分子标记)。该方法已对数万份水稻样品进行了分子标记(S

高通量的PCR模板植物基因组DNA制备方法(三)

将纯化定量的水稻品种(93-11)基因组DNA标准样品(0.5~8 ng)与1.0 µL本方法制备的水稻品种(02428)基因组DNA混合作为模板,用InDel 标记引物(表1)进行PCR扩增和PAGE检测。箭头指某反应(或2个反应之间)其02428与93-11条带的信号值大致相等(即DNA

高通量的PCR模板植物基因组DNA制备方法(二)

1.2  植物材料  1.2.1 水稻秧苗。将1.6-mL 96方孔板底部用6 mm电钻头打穿,或将旧96孔PCR板的底部剪去约4 mm。使用时将方孔板压入少量泥巴。每孔放入1粒萌动的水稻种子,在自然日光下(或人工气候箱)生长至3~4片叶。其他植物小苗也可用类似方法种植。 1.2.2 水稻大植株的鲜

转基因植物的直接转入法

  这是将裸露的DNA直接导入植物细胞,然后将这些细胞在体外培养再生出植株。裸露的DNA的转化效率较低,因而要辅之以高效率的组织培养系统。  植物细胞有一层很厚的细胞壁,因此需先去除植物细胞壁,使之成为原生质体,然后用来直接转入外源DNA。当然,也可用机械的方法将DNA直接注入植物细胞而毋须去除细胞

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(三)

3.5 杂交混合变性和杂交( 1 ) 离心管中准备杂交液,见表14. 1,充分混合。 ( 2 ) 在离心管中加入 34 μl 杂交液、2 μl 转基因探针、1 μl 指示探针或对照探针,蒸馏水补齐至 40 μl,作为探针混合液。( 3 ) 探针变性,放入 70°C 水浴锅 10 min , 然后置冰

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(二)

3.2 染色体制备无论是荧光染色还是 FISH,分裂期和分裂间期的染色体制备均于载物片上进行。建议使用蛋白水解酶对材料进行预处理,以去除细胞壁和细胞质,再将样品置于载玻片上,滴上乙酸,然后盖上玻片压片。所有操作均于室温下进行,除非是特殊说明。在洗涤和材料准备时使用小培养皿,方法见 2. 2 节。(

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(一)

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段实验实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材 载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤 原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测

植物基因转化技术

相关知识植物基因转化技术是指将外源基因导入植物细胞或组织,获得转基因植物的技术。植物基因转化技术总体上可分为两大类:1 以生物体为介导的基因转移法;2 DNA直接导入法。前者如农杆菌介导法,植物病毒介导法;后者如基因枪法、电击法、聚乙二醇法、脂质体法及花粉管通道法。其中应用最广的是根癌农杆菌介导法。

植物转基因技术

1)农杆菌介导转化法 将外植体放入含有外源基因的农杆菌(Agrobacteriumtume/ociens)菌液中浸泡,然后转入共培养基,再转入筛选培养基诱导抗性愈伤组织和抗性芽,生根后的抗性植株移栽至营养钵生长。(2)基因枪法 又称微弹轰击法。其基本原理是将外源DNA黏附在微小的金粒或钨粒表面,然后

转基因植物产品数字PCR检测方法

转基因植物产品数字PCR检测方法 前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研究所。本

转基因植物产品数字PCR检测方法

转基因植物产品数字PCR检测方法 前言       本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。       本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。       本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农

转基因植物产品数字PCR检测方法

前言       本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。       本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。       本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研

PCR技术目的基因的直接克隆介绍

  与常规的基因克隆方法相比,PCR的优点是快速,简单,但是用PCR克隆目的基因的限制是必须知道侧接靶序列的核苷酸序列,以制备引物。因而该法具有很大的局限性。  可直接利用具有平端的PCR产物进行克隆,但利用合适的引物,在待克隆的目的基因二侧引入不同的限制性酶切点,则可将扩增之后的目的基因定向克隆到

植物组织pcr

   直接PCR(Direct PCR)使用未纯化的样本进行PCR扩增,无需核酸纯化步骤,为DNA扩增带来前所未有的便捷。如果您研究领域涉及基因分型、转基因、质粒检测、基因敲除分析、DNA来源鉴定、物种鉴定、SNP分析等,请看完下面的介绍吧。  直接PCR需要的试剂  样本裂解液   样本裂解液可自

国家植物基因研究中心植物激素检测平台举办技术讲座

  植物激素是植物体内合成的一系列天然微量有机物小分子化合物, 调控着植物生长发育过程中重要的生理反应,但其定量分析检测一直是限制研究深入的瓶颈问题。为了解决这一难题,国家植物基因研究中心(北京)从2007年开始致力于植物激素测定平台的建设,经过不断努力探索,目前已经建立了稳

植物转基因技术的特点

  利用植物来生产疫苗的最大优点是他可以作为食品直接口服。通过各种植物转基因技术将多台疫苗基因转入植物,从而得到表达多肽疫苗的转基因植物。随着抗体基因工程能将抗体基因(从小的活性单位到完整抗体的重、轻链基因)从单抗杂交瘤中分离出来,人们就开始想办法利用转基因植物来表达这些抗体。  1989年Hiat

植物细胞的微核检测技术材料、原理和步骤

一、原理: 微核(micronuclei)简称MCN,是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形或椭圆形,游离于主核之外,大小应有主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具合成DNA的能力。一般认为微核是由有丝分裂后期丧

转基因植物NPTⅡ基因PCR检测试剂盒流程步骤

  1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。   2. 为避免RNA降解,样本处理过

高通量小型植物光合表型测量系统的技术原理

  叶绿素a荧光作为光合作用研究的探针,是研究各种逆境胁迫(干旱、高温、低温、营养缺失、污染、病害等)对植物影响的强大工具,亦被广泛用于筛选同一植物品种的不同基因型。叶绿素a荧光不仅能反映光能吸收、激发能传递和光化学反应等光合作用的原初反应过程,而且与电子传递、质子梯度的建立及ATP合成和CO2固定

高通量植物表型平台简介

  高通量植物表型平台是植物表型组学、植物功能基因组学、现代遗传育种研究的强大工具。利用高通量植物表型平台可以快速获取大量植株的各种信息。现代农业育种的一个主要方向就是性状改良,获得更大的果实/种子,更高的含油量(油料作物),更发达的根系等等。通过高通量植物表型平台可以快速获取大量植物表型信息。

多糖多酚植物RNA提取的利器

众多文献报道,许多植物由于未能有效地分离纯化出其组织中的RNA, 而阻碍了其分子生物学方面的研究进展。比如Northern杂交分析,体外翻译分析或建cDNA文库,RT-PCR及差异显示分析等研究,都需要高质量的RNA。因此,提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。RNA提取的常见难

特异性PCR检测技术可高效准确鉴别植物线虫

近日,陕西省生物农业研究所科研人员研究开发了一种特异性PCR(聚合酶链反应)检测技术,能够高效精确地从土壤样品中鉴别出腐烂茎线虫和鳞球茎茎线虫。该技术将有助于缩短相关植物线虫的检测周期,提高检测准确度,为植物线虫的田间精准防控提供依据。植物线虫是导致植物病害的四大病原之一,危害几乎所有的粮食和经济作

转基因植物TETR基因PCR检测试剂盒样品DNA的制备

1.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。。也可以选购本公司的一管式病毒DNAOUT或其升级版柱式病毒 DNAOUT。本试剂盒免费赠送15次DNA病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAOUT的成分)。稀释阳性对照(以10E2-10E7这6个10倍稀释度为例。由于标

高通量小型植物光合表型测量系统的技术参数

  成像面积:24 cm x 24 cm  光照面积:30 cm x 30 cm  相机传感器类型:CCD  相机分辨率:600万像素,即2440 x 2440像素  光谱范围:350-950 nm  镜头类型:高质量百万像素镜头  光纤滤光片轮:6种高质量光学干涉滤光片,步进电机驱动  直角坐标机

植物病毒的电镜技术法检测

从20 世纪40 年代建立电子显微镜技术以来, 经过不断的改进和提高, 采用电子显微镜技术检测植物病毒已成为比较重要的病毒鉴定和检测手段。电子显微镜以电磁波为光源, 将感病植物组织制成检测样本, 利用短波电子流, 在电子显微镜下观察, 可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒的种