质粒DNA的转化(CaCl2法)
实验原理受体细胞经过一些特殊方法如化学试剂法的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子(即带有异源DNA分子的受体细胞)。CaCl2法的基本原理：细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，细胞膨胀成球形，外源DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸盐混合物黏附于细胞表面，经短时间42℃热激处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性培养基中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型，如氨苄青霉素耐药（Ampr）得到表达，然后将此细菌培养物涂在含Amp的选择性培养基上，倒置培养过夜，可获得细菌菌落。转化(Transformation)是将外源DNA分子引入受体细胞，使之获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技......阅读全文
色谱定量方法：标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是：组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例，选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组
峰面积归一法、内标法、外标法区别
色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候，通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析，从而确定待测组分的校正因子；实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样，虽然看上去是二次进样，但实际上未知样
各显神通！浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法，用哪一种呢？每一种的适用范围是什么呢？其优缺点又是什么？其标准物又有什么要求呢？看完你就都知道了。 1、归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法，各成分校正因子一致时可用该法。 归一化法的优点： 该法简便
氯化钙的制备方法介绍
1、二水氯化钙（脱水法）法： 将食用二水氯化钙于200～300℃下进行干燥脱水，制得食用无水氯化钙成品。 其化学反应方程式： 对于中性氯化钙溶液，可采用喷雾干燥塔，在300℃热气流下进行喷雾干燥脱水，制得无水氯化钙粉末状成品。 2、喷雾干燥脱水法：将已除去砷和重金属的精制中性氯化钙溶液，
关于无水氯化钙的制备方法介绍
1、二水氯化钙（脱水法）法： 将食用二水氯化钙于200～300℃下进行干燥脱水，制得食用无水氯化钙成品。 其化学反应方程式： 对于中性氯化钙溶液，可采用喷雾干燥塔，在300℃热气流下进行喷雾干燥脱水，制得无水氯化钙粉末状成品。 2、喷雾干燥脱水法：将已除去砷和重金属的精制中性氯化钙溶液，
重组质粒转化感受态大肠杆菌
实验概要 细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。转化(Transformation)是指重组质粒导入受体细胞的过程，使之获得新的遗传性状的一种手段。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于
土壤养分速测技术的现代化发展情况介绍
据美国科学家分析，在未来一段时间后，土壤肥力评估将以遥感为主，辅以少量参比土样分析。 在该阶段实现以前（约5 ~ 10年），由于精细管理（Sitespecific management，SSM）和变量施肥（Variable ratefertilizer application，VRA）的要求，将有
浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法区别很重要！
1.归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法。 各成分校正因子一致时可用该法，该法简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样浓度及进样量的变化的影响很小。 其他操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。
大肠秆菌感受态细胞的制备
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 CaCl2水仪器、耗材 震荡仪三角瓶试管离心管离心机实验步骤 1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2 ml LB培养基的试管中，37 ℃振荡培养过夜。 2、取0.1ml过夜培养物转种于含10 ml LB培养基的三角瓶中，37 ℃振荡培养3h至OD600=0.3。 3
大肠杆菌感受态细胞的制备经验之谈
细菌处于容易接受外源DNA的状态称之为感受态，通过物理或化学的方法，人工诱导细菌细胞成为敏感的感受态细胞是重组DNA转化细菌技术的关键。制备出感受态细胞，我们就可以方便的将需要克隆的质粒导入其中，使其繁殖，从而获得大量的质粒。CaCl2转化法是常用的感受态细胞制备方法，其制备流程简单，快捷，成本低
电导率仪测水中TDS方法介绍
用电导率仪法测定生活饮用水中溶解性总固体的方法。操作极为简便、快捷，每次可测定大批量水样，回收率与称量法（ 除采用加CaCL2、105℃ ±3℃烘烤之外） 基本一致，而且该法的精密度比称量法好，耗能又极低。该法不用与称量法那样需多种实验用品（如电热恒温水浴箱、电热恒温干燥箱等实验器材和Na2CO3
消化道接种法、鼻腔接种法及角膜接种法
实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤消化道接种。在分离腹泻病毒或经由消化道病毒感染的研究中，可采用灌胃接种法将所接种的临床标本或病毒用灌胃器灌到动物胃内。抓取固定小鼠，用灌胃器吸取接种物，将灌胃针从鼠的口腔插入，使口腔与食道成一条直线，再将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道，可感到轻
吸附法纯化病毒实验
实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5
吸附法纯化病毒实验_凝胶吸附法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用
看电导率仪如何在水中测试TDS值的方法
TDS溶解性总固体是衡量生活饮用水的质量指标之一，当水样中含有大量能形成结晶水的无机盐类时还需加某些试剂( 如Na2CO3) 、每次不能测定大批量水样等缺点。为了解决这些问题, 下面的主要内容就是介绍如何测量饮用水中的TDS，在使用电导率仪DDS-11A型的帮助下，按照下面的使用说明方法进行详细操作
看电导率仪如何在水中测试TDS值的方法
TDS溶解性总固体是衡量生活饮用水的质量指标之一，当水样中含有大量能形成结晶水的无机盐类时还需加某些试剂( 如Na2CO3) 、每次不能测定大批量水样等缺点。为了解决这些问题, 下面的主要内容就是介绍如何测量饮用水中的TDS，在使用电导率仪DDS-11A型的帮助下，按照下面的使用说明方法进行
电导率仪如何在水中测试TDS值的方法
TDS溶解性总固体是衡量生活饮用水的质量指标之一，当水样中含有大量能形成结晶水的无机盐类时还需加某些试剂(如Na2CO3)、每次不能测定大批量水样等缺点。为了解决这些问题,下面的主要内容就是介绍如何测量饮用水中的TDS，在使用电导率仪DDS-11A型的帮助下，按照下面的使用说明方法进行详细操作。方法
气相色谱法—内标法
什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不
动态色谱法和静态法
动态色谱法是将待测粉体样品装在U型的样品管内，使含有一定比例吸附质的混合气体流过样品，根据吸附前后气体浓度变化来确定被测样品对吸附质分子准确度差、对设备要求很高等缺陷已很少使用。另一种可行的方法是采用CO2作吸附质在室温进行吸附，可以无需分子涡轮泵级的真空度。可以很方便的得到比表面积、微孔孔径、微孔
药物鉴别法呈色反应鉴别法
呈色反应鉴别法是指供试品溶液中加入适当的试剂溶液,在一定条件下进行反应,生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的呈色反应类型有以下几个。(1)三氯化铁呈色反应:应用于含有酚羟基或水解后产生酚羟基的药物,如水杨酸及其盐。(2)异羟肟酸铁反应:应用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的药物,如β-内酰胺类。(
气相色谱法—内标法
1）什么叫内标法?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。2）怎样选择内标物?内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分
药物鉴别法薄层色谱鉴别法
薄层色谱鉴别法薄层色谱法鉴别原理为同一种药物在同样条件下的薄层色行为相同。一般采用对照品(或标准品)比较法,将供试品和对照品(或标准品)按药典规定,用同种溶剂配成同样浓度的溶液。在同一层板上点样、展开、显色,要求供试品斑点应与对照品(或标准品)斑点的位置(Rf)和颜色一致。薄层色谱法简单易行,适用于
感受态菌的制备原理、仪器试剂和操作步骤
1．目的学会CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。2．原理细菌在0℃ CaCl2低渗溶液中胀成球形，丢失部分膜蛋白，成为容易吸收外源DNA的状态。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，50ml 微量离心管，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式冷冻离心机，制冰机，恒温摇床，分光光度计
大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法protocol1
常态的细胞不能摄入外部溶液中的DNA，所以要转化质粒DNA进入大肠杆菌必须首先制备感受态的大肠杆菌细胞。受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl，RuCl等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞(competent cell) 。转化，是将
植物组织小液流法水势测定实验
实验材料小麦玉米甘蓝棉花叶片马铃薯块茎甜菜块根试剂、试剂盒CaCl2溶液亚甲蓝粉末仪器、耗材试管架解剖针指形试管具塞刻度试管移液管毛细滴管实验步骤一、材料与设备材料：小麦、玉米、甘蓝、棉花叶片或马铃薯块茎、甜菜块根每组：10 ml 指形试管7支、10ｍｌ具塞刻度试管7支、5 ml 移液管1支、10
植物组织小液流法水势测定实验
实验材料小麦 玉米 甘蓝
植物组织小液流法水势测定实验
实验材料 小麦玉米甘蓝棉花叶片马铃薯块茎甜菜块根试剂、试剂盒 CaCl2溶液亚甲蓝粉末仪器、耗材 试管架解剖针指形试管具塞刻度试管移液管毛细滴管实验步骤 一、材料与设备材料：小麦、玉米、甘蓝、棉花叶片或马铃薯块茎、甜菜块根每组：10 ml 指形试管7支、10ｍｌ具塞刻度试管7支、5 ml 移液管1
大肠杆菌感受态细胞的制备、重组DNA的转化、克隆筛选－一
1. 实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2. 相关知识及原理感受态细胞(Competent cells)：受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl等化学试剂法）
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
拟南芥的转化
实验概要本实验采用花浸泡法利用农杆菌介导将目的基因转入拟南芥。主要试剂YEB液体培养基，LB培养基，0.1 M CaCl2，0.05 M MgSO4，花浸泡缓冲液(0.5XMS，5%蔗糖，0. 03%Silwet L-77 )，Rif，Kan主要设备摇床，离心机，培养钵，温室，托盘，塑料薄膜实验材料