免疫组织化学技术简介
免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原((多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究的一种方法。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(第一抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗原放大,由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂 DAB显示为棕黄色颗粒)。通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细......阅读全文
免疫组织化学的定义
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。
免疫组织化学法实验
实验方法原理 实验材料 在3〜5 cm培养皿上生长的单层细胞(培养皿越小所需的抗体就越少 但培养皿应适合显微镜下观察)试剂、试剂盒 VPBS 40℃2% (m V)高聚甲醛(PFA)固定液 4℃ 用于细胞表面抗原固定100%甲醇 -10〜-20℃ (置于冰箱的结冻室冷却较为理想);或含0.1
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗
免疫组织化学的概念
免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原
免疫组织化学染色方法
实验概要免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗
亲和免疫组织化学实验
实验方法原理 ABC 法即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法,是许世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基础上改良的,其特点是利用亲和素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。ABC 法与 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗体不为生物素所标记,生物素标记的第二抗体与
激光技术简介
激光技术(英文:laser technology),是采用激光的手段,对特定目标进行加工或者检测的技术 。被认为是人类在智能化社会生存和发展的必不可少的工具之一。在国家重点研发计划“增材制造与激光制造”重点专项拟立项的2018年度项目公示清单中,不乏像高效精密激光增材制造-电解加工整体制造技术和飞
防雷技术简介
常规避雷装置及其发展 1750年,富兰克林提出以针尖放出电荷缓慢中和雷云中的电荷的避雷针用来防雷。后来的实践证明,它不能“避雷”,而是将雷引向自身来保护其周围的设备。随后俄国罗蒙诺索夫在重复了富兰克林的著名风筝试验(他的朋友利赫曼和他一起试验,因被引下的直击闪电击中而牺牲)之后,于1753年发表的论
RIP技术简介
由于miRNA被发现在癌症机理中起重要的作用,尤其是与肿瘤转移相关联,因此对于miRNA的研究来说,最让人兴奋的是有希望应有于癌症治疗中的RNA 抑制疗法或模拟miRNA表达疗法,尤其是对于出现肿瘤转移的癌症病人的治疗。但是miRNA具有成百上千个靶标,所以要完全理解一个miRNA和靶标的特异性反应
SMART技术简介
真核细胞的mRNA在加工过程中有一个比喻为“穿鞋戴帽”的过程,因此mRNA的3’末端都带有一段Poly A,这是利用逆转录酶制备cDNA文库的基础。但是由于cDNA的5’端的序列各不相同,如何获得全长的cDNA,如何扩增由微量的mRNA逆转录得到的cDNA文库、如何利用已知片断序列得到全长的cDNA
NIR技术简介
1.1 NIR 分析技术的原理近红外光是一种电磁波,其波长在 780~2526nm 间,根据波长通常可分为两类,分别为短波近红外光谱区(SW-NIR),其波长范围为 780~1100nm,也称之为透射光谱;其次是长波近红外光谱区(LW-NIR),波长范围为 1100~2526 nm,也可称之为反射
RTCA技术简介
什么是RTCA?RTCA,即实时无标记细胞分析技术。(Real Time Cellular Analysis,RTCA)该技术采用特殊工艺,将微电子细胞传感器芯片整合到表面适于微藻细胞贴附与生长的细胞检测板的底部或细胞浸润迁移板的微孔膜,用以构建实时、动态、定量跟踪微藻细胞形态和增殖分化等改变的细胞
免疫组织化学常用染色方法
根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
免疫组织化学的抗体反应
交叉反应原因 指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。产生的原因有以下几个方面: 1. 抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子,它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体。任何其它物质只要含有一种或多种与上述物质相同的抗原分子,必将与上述多特异性的抗血
免疫组织化学检查的介绍
免疫组化是最近10多年来迅速发展起来的一门新兴技术。它已被广泛运用肿瘤研究和诊断,其原理是利用抗原与抗体的特异性结合反应来检测组织中的未知抗原或者抗体,主要是肿瘤相关抗原(肿瘤分化抗原和肿瘤胚胎抗原),借以判断肿瘤的来源和分化程度,协助肿瘤的病理诊断和鉴别诊断。目前常用的染色方法有过氧化物酶-抗
免疫组织化学的临床应用
⑴恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;⑵确定转移性恶性肿瘤的原发部位;⑶对某类肿瘤进行进一步的病理分型;⑷软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的;⑸发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定,包括手
简述免疫组织化学的定义
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。
常用的免疫组织化学方法
一. 直接法: 是zui早出现的方法,是将酶直接标记在特异性抗体上,与标本中的抗原结合,让酶催化底物反应产生有色物质,可以在光镜下检测. 直接法放大作用小,不够敏感, 且标记一种抗体只能检测一种抗原,所以应用就受到了限制.二 . 间接法是将酶标记在第二抗体上,形成抗原/一抗 /二抗-酶复合物,zui
免疫组织化学交叉反应原因
免疫组织化学交叉反应原因: 指抗体除与其相应的抗原发生特异性反应外还与其它抗原发生反应。产生的原因有以下几个方面: 1.抗原特异性指用于免疫动物的抗原性物质中含有多种抗原分子,它引起动物产生针对多种抗原分子特异性的相应抗体医|学教育网整理。任何其它物质只要含有一种或多种与上述物质相同的抗原分
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸;染色架;保湿盒;晾片盘;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟;2. 脱蜡和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
基因枪技术技术简介
基因转移技术是一种将外源基因以在体(in vivo)或离体(in vitro)的方式导入到靶细胞核内的技术, 属于基因工程技术(亦称重组DNA 技术)的一个重要组成部分。基因工程技术以分子生物学等学科发展为基础, 使人类拥有了构造生物遗传物质新组合的能力。对在体方式而言, 基因转移技术需要跨越细胞外
分子杂交技术的技术简介
杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的,也可以在细胞内杂交, 即细胞原位杂交。探针必须经过标记,以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素, 但由于同位素的安全性,近年来发展了许多非同
内调制技术简介
在激光形成过程中,以调制信号的规律去改变激光振荡的某一参数,即用调制信号控制着激光的形成,叫做内调制。内调制直接输入激光器驱动电路调制信号以控制其输出。区别于外调制,外调制中激光器不受控制,只对输出后的激光进行调制。内调制是信号对光源本身直接调制,以调制信号改变激光器的振荡参数,通过偏置电流的变化或
超滤机技术简介
超滤机 超滤机即使用超滤技术对水进行净化处理的设备。与其它净水设备的区别在于它的设备中使用有超滤膜。中文名 超滤机 外文名 Ultrafiltration machine 作 用 过滤 区 别 它的设备中使用有超滤膜技术简介超滤是一种加压膜分离技术,即在一定的压力下,使小分子溶质和溶剂穿
声光调制技术简介
声光调制是一种外调制技术,通常把控制激光束强度变化的器件称作调制器。调制信号是以电信号(调幅)形式作用于换能器上,再转化为以电信号形式变化的波场,当光波通过介质时,使光载波受到调制而成为“携带”信息的强度调制波。
电融合技术简介
当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电融合,又叫电穿孔。
光全息技术简介
全息照相技术制作的光栅,holographic grating 。光全息技术,主要是利用光相干迭加原理,简单讲就是通过对复数项(时间项)的调整,使两束光波列的峰值迭加,峰谷迭加,达到相干场具有较高的对比度的技术。
融合蛋白技术简介
在基因操作中,对一些分子数小的多肽基因常采用融合的方法与某一基因(如lac)相连,二者之间接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在体内表达后产物的稳定性,也有的故意使两个分子串连融合以提高疗效,如IL-3与GM-CSF。也有与分泌性蛋白的信号肽基因组成融合基因,以使表达产物分泌到膜外或胞外。融合蛋白技
酸碱萃取技术简介
酸碱萃取是一种化学分离技术,根据酸或碱不同的化学性质,经一系列的萃取过程后以达致提纯效果。酸碱萃取是化学合成后一连串提纯过程中的常见步骤,也多见于离析过程中。生成物中大部分的中性、酸性及碱性杂质均被去除。虽然如此,但当该反应生成的酸或碱的性质相似时,此方法将不能有效地将它们分离。