免疫组织化学技术简介

免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原((多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究的一种方法。众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(第一抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,将抗原放大,由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂 DAB显示为棕黄色颗粒)。通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细......阅读全文

基因敲除技术简介

基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成功的有基因

电色谱技术简介

电色谱是化学学科的分析化学专业的色谱分析类中的一种新兴分析技术。全称为毛细管电色谱(Capillary Electrochromatography),简称CEC.公认的现代CEC的鼻祖是美国北卡大学的Jorgenson教授,其在20世纪80年代初期在美国分析化学杂志上发表了关于CEC的第一篇文章。在

干燥技术的简介

  干燥是指在化学工业中,常指借热能使物料中水分(或溶剂)气化,并由惰性气体带走所生成的蒸气的过程。例如干燥固体时,水分(或溶剂)从固体内部扩散到表面再从固体表面气化。干燥可分为自然干燥和人工干燥两种。并有真空干燥、冷冻干燥、气流干燥、微波干燥、红外线干燥和高频率干燥等方法。

类器官技术简介

类器官技术是一种利用细胞培养技术构建人工器官的方法。它通过将不同类型的细胞种植在三维支架上,使其形成类似于真实器官的结构和功能。类器官通常来源于干细胞(多能干细胞、胎儿或成人来源的),也可以由组织衍生细胞培养而成,这些细胞包括正常干细胞/祖细胞、分化细胞和癌细胞等。其组成类器官的细胞可衍生自诱导多能

反渗透技术简介

  渗透是一种物理现象,当两种不同浓度盐类的水,如用一张半渗透性的薄膜分开就会发现,含盐量少的一边的水分会透过膜渗到含盐量高的水中,而其中的盐分并不渗透,这样逐渐把两边的含盐浓度融合到均等为止。然而,要完成这一过程需要很长时间,这一过程也称为渗透。  但如果在含盐量高的水侧,施加一个压力,其结果可以

转基因技术简介

  转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的基因片段。基因片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技术可以使重组生物增

分子蒸馏技术简介

  分子蒸馏是一种特殊的液--液分离技术,它不同于传统蒸馏依靠沸点差分离原理,而是靠不同物质分子运动平均自由程的差别实现分离。当液体混合物沿加热板流动并被加热,轻、重分子会逸出液面而进入气相,由于轻、重分子的自由程不同,因此,不同物质的分子从液面逸出后移动距离不同,若能恰当地设置一块冷凝板,则轻分子

内调制技术简介

在激光形成过程中,以调制信号的规律去改变激光振荡的某一参数,即用调制信号控制着激光的形成,叫做内调制。内调制直接输入激光器驱动电路调制信号以控制其输出。区别于外调制,外调制中激光器不受控制,只对输出后的激光进行调制。内调制是信号对光源本身直接调制,以调制信号改变激光器的振荡参数,通过偏置电流的变化或

基因敲除技术简介

基因敲除是一种遗传工程技术,是指通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。基因敲除针对某个序列已知但功能未知的序列,改变生物的遗传基因,令特定的基因功能丧失作用,从而使部分功能被屏蔽,并可进一步对生物体造成影响,进而推测出该基因的生物学功能。基因敲除技术克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理

基因敲除技术简介

动物实验和实验动物都要求达到实验室操作规范(good laboratory practice, GLP)和标准操作程序(standard operating procedure, SOP)这些规范和操作对实验动物和实验室条件,工作人员素质,技术水平和操作方法都要求标准化。所有药物的安全评价试

融合蛋白技术简介

在基因操作中,对一些分子数小的多肽基因常采用融合的方法与某一基因(如lac)相连,二者之间接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在体内表达后产物的稳定性,也有的故意使两个分子串连融合以提高疗效,如IL-3与GM-CSF。也有与分泌性蛋白的信号肽基因组成融合基因,以使表达产物分泌到膜外或胞外。融合蛋白技

RNA探针技术简介

许多载体如pBluescript, pGEM等均带有来自噬菌体SP6或E.coli噬菌体T7或T3的启动子,它们能特异性地被各自噬菌体编码的依赖于DNA的RNA聚合酶所识别,合成特异性的RNA。在反应体系中若加入经标记的NTP,则可合成RNA探针。RNA探针一般都是单链,它具有单链DNA探针的优点,

类器官技术简介

类器官技术 是一种新兴的、具有巨大潜力的生物技术。它是指在体外利用干细胞或特定组织的细胞,通过特定的培养条件和生物材料的支持,诱导其形成具有三维结构和一定功能的类似于体内器官的细胞聚集体。类器官技术的关键步骤包括:细胞获取:通常从胚胎干细胞、诱导多能干细胞或成体组织中的干细胞分离得到起始细胞。培养体

超薄切片技术简介

由于电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染

膜分离技术简介

一、膜分离的概念:        膜分离是利用膜的选择性,以膜两侧存在的能量差作为推动力,将流体组分进行分离的方法。膜分离的核心是膜,膜必须是半透膜,即能透过一种物质,而阻碍另一种物质。膜分离常与离心机分离技术结合使用。二、膜的概念:        把流体分隔成两部分的一层薄的凝聚相物称为膜。   

电穿孔技术简介

电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。

石蜡切片技术简介

石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

热解吸技术简介

热解吸,也叫热脱附。本技术是指以加热方式将受有机物污染的土壤加热至有机物沸点以上,使吸附于土壤中的有机物挥发成气态后再分离处理。本技术基本上分为2个单元,第一为加热单元,用以加热待处理的物质,将物质中有机污染物挥发成气态后分离;另一单元为气态污染物处理单元,本处理单元能将含有污染物的气体处理至法规标

膜分离技术简介

一、膜分离的概念:膜分离是利用膜的选择性,以膜两侧存在的能量差作为推动力,将流体组分进行分离的方法。膜分离的核心是膜,膜必须是半透膜,即能透过一种物质,而阻碍另一种物质。膜分离常与离心机分离技术结合使用。二、膜的概念:把流体分隔成两部分的一层薄的凝聚相物称为膜。膜是均一的一相,或由两相以上凝聚物构成

免疫酶技术的技术原理简介

  免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。  目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),

膜分离技术的技术特点简介

  膜分离技术的特点膜分离过程是一个高效、环保的分离过程,是多学科交叉的高新技术,在物理、化学和生物性质上呈现出各种各样的特性,具有较多的优势。膜是具有选择性分离功能的材料,利用膜的选择性分离实现料液的不同组分的分离、纯化、浓缩的过程称作膜分离。它与传统过滤的不同在于,膜可以在分子范围内进行分离,并

常用免疫组织化学染色方法-2

五)免疫组化双染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method) 1.切片脱蜡至水。2.0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。3.水洗。4.抗原修复。5.PBS洗3次,每次1分钟。6.加入非免疫性动物血清,孵育 10分钟。7.PBS洗3次

常用免疫组织化学染色方法-1

一)、ABC法: (注,下面各种方法,均为手工操作,如没特别说明,均在室温下进行)1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。3. 无水酒精Ⅰ 30秒。4. 无水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9

免疫组织化学(HRPDAB系统)

1. 溶液准备:PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4 ,1.8mM KH2PO4 , 50mM NaCl , 2.7mM KCl封闭缓冲液:3%BSA-PBS2. 程序:1 ) 对石蜡切片进行脱蜡和水化:3×10min 二甲苯,5min 100%乙醇,5min 95%乙醇,5min

免疫组织化学常用的检测方法

  免疫组织化学(immunohistochemistry)技术的基本原理是抗原-抗体的反应。利用带有标记物(如荧光素或辣根过氧化物酶等)的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起

常用免疫组织化学方法的原理

  1. 免疫荧光细胞化学技术  将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.  2. 免疫酶细胞化学技术  是免疫组织化学研究中最常用的技术.基本原理是先以酶标

常用免疫组织化学方法的原理

  1. 免疫荧光细胞化学技术  将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.  2. 免疫酶细胞化学技术  是免疫组织化学研究中最常用的技术.基本原理是先以酶标

免疫组织化学的临床应用范围

  免疫组织化学的临床应用范围:  ⑴恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;  ⑵确定转移性恶性肿瘤的原发部位;  ⑶对某类肿瘤进行进一步的病理分型;  ⑷软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的; 

免疫组织化学工作流程

1 石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS(PH7.4)冲洗三次,每次5分钟。PBS配制 (2000ml)PH7.4氯化钠: 17g磷酸二氢钠:0.4g磷酸氢二钠:6.3g2 根据每一种抗体的要求,对组织抗原进行相应的修复。我科采用压力锅进行抗原修复,取一定量的修复液于压力锅中,加热至沸腾,将脱蜡水化后的组

免疫组织化学法的方法特点

免疫组织化学法,英文名称:immunohistochemistry,是通过标记抗体与特异性抗原反应显色的组织化学法。