免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。常用的标记物有荧光素和酶。荧光素标记的称为免疫荧光法（immunofluorescent technique），常用的萤光素有异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate）、罗丹明（rhodamine）等。酶标记的称为酶标免疫法（enzyme-labeled antibody method），常用的酶有辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase），酶与底物发生反应后形成不透明的沉积物，从而显示出抗原存在的部位。抗体与抗原的结合方法可分为直接法和间接法两种，......阅读全文
免疫组织/细胞化学染色1
一 基本原理免疫组织/细胞化学是利用抗原抗体具有高度特异性结合反应的原理，采用已知抗体检测组织或细胞的抗原物质，然后以适当的方式显示其结合信号以证明组织或细胞是否存在未知抗原，并进行定性、定位或定量的研究。二 基本步骤 1 三步法：以SP（链霉卵白素-过氧化物酶）试剂盒为例： 石蜡切片脱蜡至
免疫组织/细胞化学染色2
四 结果分析 编号 阳性片 待检片 阴性对照 结论 1 - -
免疫组织化学染色
实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system（如 Shandon Sequenza）等的实验室。可用移液器人工加试剂，也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒，底部铺上
免疫组织化学染色
实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system（如 Shandon Sequenza）等的实验室。可用移液器人工加试剂，也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒，底部铺上
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗
免疫金组织化学染色实验
实验方法原理 免疫金染色（immunogold staining，IGS）法是由 Geoghegan 等（1978）首次应用金标探针检测 B 淋巴细胞表面抗原，将胶体金颗粒（大于 20 nm）标记在第二抗体或 SPA 分子上，制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后，用金标二抗或金标
免疫组织化学染色方法
实验原理免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗
免疫组织化学染色方法
实验概要免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法
一、其它荧光抗体染色方法1、膜抗原荧光抗体染色法本法应用直接法或间接法的原理和步骤，可对活细胞在试管内进行染色，常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究，阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。2、双重染色法在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的
免疫组织化学常用染色方法
根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原（抗体）在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸；染色架；保湿盒；晾片盘；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟；2. 脱蜡和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
免疫金组织化学染色实验——CIGSS－法
实验方法原理彩色免疫金银染色方法（coloured IGSS，CIGSS）是由 Frite 和 Hoenes 等（1986）建立的一种新方法，刘彦仿等1988）在《中华病理学杂志》上也报道了改进后的 CIGSS 方法。其基本原理是在 IGSS 法的基础上，根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的，即 I
光镜免疫金组织化学染色方法
一、原理本法是由Geoghegan等（1978）首次应用金标探针检测B淋巴细胞表面抗原，将胶体金颗粒（大于20nm）标记在第二抗体或SPA分子上，制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后，用金标二抗或金标SPA与特异性抗体结合，形成抗原-抗体-金标抗体复合物，此时在光镜（10X100倍）下可
免疫金组织化学染色实验——IGSS－法
实验方法原理免疫金银染色（immunogold silver staining；IGSS）的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用，用对苯二酚还原剂将银离子（Ag+）还原成银原子（Ag），被还原的银原子围绕金颗粒形成一个「银壳」，「银壳」一旦形成本身亦具有催化作用，从而使
免疫荧光组织化学染色法
一)免疫荧光组织化学原理 将已知抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受到激发光的照射会发出明亮的荧光(黄绿色或橘红色)，荧光素受激发光照
常用免疫组织化学染色方法－2
五)免疫组化双染色法。(ⅰ) (Ionmuno- Histochemistry double staimimg method) 1.切片脱蜡至水。2.0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。3.水洗。4.抗原修复。5.PBS洗3次，每次1分钟。6.加入非免疫性动物血清，孵育 10分钟。7.PBS洗3次
免疫组织化学染色注意事项
一、抗体的保存 浓缩抗体，在有效期以内，一般只需放在普通4 ℃冰箱内保存，保存时间可达5-10年以上（免疫荧光试剂例外）。最好不要用塑料管分装，因为塑料对抗体有吸附作。用-20℃至-40℃低温冰箱冷冻，避免反复冻融使抗体效价降低。而即用型抗体保存时间一般在一年以内。 用TBS稀释的抗体，一般
免疫荧光组织（细胞）化学染色方法：间接法
一、原理与意义 免疫荧光组织（细胞）化学染色方法——间接法，是一种荧光抗体染色法。该方法只需制备一种荧光抗体可以检出多种抗原，敏感性较高，操作方法较易掌握，而且能解决一些不易制备动物免疫血清的病原体（如麻疹）等的研究和检查，所以已被广泛应用于自身抗体和感染病人血清的试验。 二、操作流程 （一）双层法
常用免疫组织化学染色方法－1
一)、ABC法： (注，下面各种方法，均为手工操作，如没特别说明，均在室温下进行)1.切片经二甲苯Ⅰ 5分钟。2.切片经二甲苯Ⅱ 5分钟。3. 无水酒精Ⅰ 30秒。4. 无水酒精Ⅱ 30秒。5. 95% 酒精Ⅰ 30秒。6. 95%酒精Ⅱ 30秒。7. 90%酒精 30秒。8.80%酒精 30秒。9
双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤
1．一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。2．二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫
免疫组织化染色
实验材料 新鲜组织试剂、试剂盒 二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材 恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤 一．石蜡切片免疫组化染色实验步骤：1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置
免疫组织化染色
验材料新鲜组织试剂、试剂盒二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤一．石蜡切片免疫组化染色实验步骤：1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置60℃ 1
组织免疫荧光染色
概述： 织免疫荧光染色多是使用组织的冰冻切片，因为在切片过程中基本上暴露了细胞和细胞核内结构，故不需要使用细胞通透剂(Triton-100,NP-40)。染色后的切片应放置冰箱内避光保存，防止荧光淬灭。常用的荧光素有：异硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,发
免疫细胞或组织化学染色的相关问题
附上我们这里的组化步鄹：（切片复温凉干完毕）1。加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液（甲醇80ml＋0.01MPBS 20ml＋30%过氧化氢 1ml）30min，以消除内源性过氧化物酶的影响，0.01MPBS清洗5min×3；2。加入配好的0.3% Triton X100（30% Triton X
免疫金组织化学染色实验——IGS－间接法
实验方法原理免疫金染色（immunogold staining，IGS）法是由 Geoghegan 等（1978）首次应用金标探针检测 B 淋巴细胞表面抗原，将胶体金颗粒（大于 20 nm）标记在第二抗体或 SPA 分子上，制备成金标二抗。其原理是当特异性抗体与抗原结合后，用金标二抗或金标 SPA
免疫金组织化学染色实验——双－PAG－法
实验方法原理免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌 A 蛋白（SPA）金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA 和许多哺乳类动物 IgG 具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原-抗体的结合。简单的 SPA 金标记二步法后，第三步用抗 SPA 与 SPA 金表面分
免疫学实验免疫组织化学染色法介绍
免疫组织化学染色法介绍： 免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多
免疫组织化学染色诊断是什么意思
指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测。 免疫组织化学的优势在于专