抗原修复的几种方法（柠檬酸钠法、蛋白酶K法和尿素法）
一、柠檬酸钠法1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠（pH6.0）的容器中。2. 微波中高火6-8min。3. 室温冷却。4. 用PBS洗涤3次，每次5min。二、蛋白酶K法1. 配制新鲜溶液：25μl 20mg/ml蛋白酶K；2.5ml 1MTris-HCl（pH8.0）；0.5ml 0.5M EDTA（pH8.0）；加水定容到50ml。2. 37℃下，将玻片放在架子上孵育5min（蛋白酶K不要预热）。3. 用PBS洗涤3次，每次5min。三、尿素法1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml 的1M尿素（新鲜配制）的容器中。2. 微波10min，20min或者30min，每5min补充一次蒸发掉的水。3. 冷却30min到1h。4. 用蒸馏水洗涤4次，每次3min,再用PBS洗涤3min。......阅读全文
抗原修复方法
至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行，我们则对每种病例每项检测，都要求必须进行抗原修复，以达到抗原全面表达的*佳状态。 1. 真空负压抗原修复法： ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗，蒸馏水
抗原修复方法介绍（抗原热修复和酶消化方法）
抗原修复主要用于福尔马林或多聚甲醛固定的石蜡包埋组织切片。1、抗原热修复（1）高压热修复在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）。盖上不锈钢高压锅的盖子，但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上，缓慢加压，使玻片在缓冲液中浸泡5分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。
常用抗原修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片： 1）抗原热修复 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以0.01M枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064
在什么情况下进行组织抗原修复及抗原修复的条件
（1）由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中，发生了蛋白之间交联及醛基的封闭作用，从而失去抗原性。通过抗原修复，使得细胞内抗原决定族重新暴露，提高抗原检测率。 （2）修复方法从强到弱一般分为三种，高压修复、微波修复、胰酶修复。修复液也分为若干种（具体的可以查阅相关资料，大量的：中性的
常用抗原的修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片：1）抗原热修复 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以0.01M枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓
抗原修复锅的使用方法
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇，通常用到抗原修复锅。强适于甲醛固定的组织，经石蜡包埋后进行免疫染色前的处理，配合特别的抗原修复缓冲液确保你得到最搞质量的免疫染色效果
抗原修复锅的使用方法
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇，通常用到抗原修复锅Antigen Retriever。强烈推荐EMS最具有竞争力的一款产品，适于甲醛固定的组织，经石蜡包埋后进行免疫
抗原修复的选择合适的孵育时间
第一抗体的孵育时间，有较多的使用范围，应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟，120分钟，对于研究性质的抗体孵育时间，也可按照上述的时间，但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育，根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜，原因是：1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来，或者被
抗原修复的选择合适的孵育时间
第一抗体的孵育时间，有较多的使用范围，应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟，120分钟，对于研究性质的抗体孵育时间，也可按照上述的时间，但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育，根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜，原因是：1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来，或者被
抗原修复的选择合适的孵育时间
第一抗体的孵育时间，有较多的使用范围，应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟，120分钟，对于研究性质的抗体孵育时间，也可按照上述的时间，但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育，根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜，原因是：1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来，或者被
抗原的保存与修复的方法有哪些？
在制片过程中，由于广泛的蛋白交联可使组织中某些抗原决定簇发生遮蔽，致使抗原信号减弱或消失。抗原修复是使组织抗原决定簇重新暴露的过程。常用的抗原暴露、修复方法有： 酶消化法（无花果蛋白酶为轻度消化酶；胰蛋白酶为中度消化酶；胃蛋白酶为强消化酶。）；盐酸水解法；微波法；高压锅法（适用大批切片）；煮沸
免疫组化抗原修复注意事项
经甲醛固定的部分组织细胞，因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇，使免疫组化标记敏感性明显降低，因此在染色前，有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和
关于石蜡切片的抗原修复及方法介绍
石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。 常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，
IHC全攻略6：抗原修复方法
尽管固定对于组织形态的保留是必不可少的，但这一过程对IHC/ICC检测也有不良影响。固定可能会改变蛋白的生化特性，如目的表位被掩盖，或不再与一抗结合。表位的掩盖可能是由氨基酸与表位的交联、表位附近无关肽段的交联、表位构象的改变或抗原静电荷的改变引起的。抗原修复指的是逆转表位掩盖和恢复表位-抗体结
抗原修复的作好免疫组化染色必须注意的问题
I、为达到免疫组织化学技术的要求，组织固定越新鲜越好。在免疫组化最后结果的判断时，常可见到均匀一片的似非特异性染色的现象，经多方研究认为，它是一种假性非特异性的染色。因为肿瘤组织中含有的抗原较易发生扩散弥散，肿瘤细胞无限制的生长和生长过速，导致肿瘤中间部分组织血液供给困难，造成缺血坏死，坏死细胞中的
如何确定适用于某种特定抗体的抗原修复方法？
有些抗体对抗原修复方式有特别要求的，一般在其说明书中都会有明确的标注和推荐。但是很多抗体并没有一个特别的推荐，就需要实验者自己来进行优化和摸索了。可以参考51AB网站实验方法中“免疫组化实验方法”以及abcam网站的的IHC protocols page 查看更多的抗原修复方法
完全抗原，半抗原和超抗原的概念区别
完全抗原：同时具有免疫原性和抗原性的抗原，又称免疫原。半抗原：仅具备抗原性而无免疫原性的抗原，如某些寡糖、类脂和药物等。超抗原：能非特异激活多克隆T细胞并能刺激其分泌大量细胞因子的抗原。
抗原
决定抗原特异性的物质基础是抗原分子中的抗原表位。抗原以抗原决定簇与相应淋巴细胞的抗原受体结合而激活淋巴细胞引起免疫应答。换言之，淋巴细胞表面的抗原识别受体通过识别抗原决定簇而区分“自身”与“异己”。抗原也是以抗原决定簇与相应抗体特异性结合而发生反应的。因此，抗原决定簇是免疫应答和免疫反应具有特异性的
抗原
· Designing Antigens (Perkin-Elmer)What is an Epitope?Choosing the EpitopeMethods for Epitope PredictionDesigning the Synthetic PeptidePromisc
抗原修复的几种方法（柠檬酸钠法、蛋白酶K法和尿素法－）
一、柠檬酸钠法1. 把玻片放在玻璃固定架上，再将架子放在盛有600ml的10mM柠檬酸钠（pH6.0）的容器中。2. 微波中高火6-8min。3. 室温冷却。4. 用PBS洗涤3次，每次5min。二、蛋白酶K法1. 配制新鲜溶液：25μl 20mg/ml蛋白酶K；2.5ml 1MTris-HCl（p
抗原的抗原性（二）
三、天然蛋白质的抗原性 绝大多数免疫原性物质是大分子蛋白质或细胞组分，但只是其有限的部位能与其相应抗体结合，此部位称为抗原决定簇或表位（前述载体-半抗原效应已证明一个抗原分子须有T细胞决定簇和B细胞决定簇)。由于天然大分子蛋白质结构复杂，并具有空间构型，因此对其单一抗原决定簇的化学组成、定位及
抗原加工与抗原递呈
抗原加工是指蛋白质抗原在细胞内被降解成能与MHC分子结合的肽的过程。抗原递呈是指MHC分子与抗原肽结合，将其展示于细胞表面供T细胞识别的过程。抗原又分为内源性抗原和外源性抗原，内源性抗原：细胞内产生的蛋白质抗原，包括自身抗原和非己抗原----MHCⅠ分子递呈。外源性抗原：由细胞外摄入细胞内的蛋白质抗
抗原的抗原性（一）
自发现抗体后，用血清学方法在体外实验，证明了天然抗原与其相应抗体发生特异性结合，这是一个重要的免疫学现象，称这种特性为抗原的抗原性。在早期由于尚未建立对蛋白质抗原进行分析的方法，为研究抗原性的化学本质造成了困难。奥地利免疫化学家Landsteiner在本世纪20年代创建了人工结合抗原，并应
抗原－抗原决定簇
[大纲]抗原与抗原性的概念影响抗原免疫原性的因素抗原决定簇[解析]1、抗原抗原(Ag) 是指凡能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能与之结合发生特异性免疫反应的物质。抗原有两种基本特性：免疫原性和反应原性，统称为抗原性免疫原性：指抗原刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞的能力或特性。反应原性：指抗原与抗
抗原表位是抗原肽吗
抗原表位，又称抗原决定指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。抗原通过抗原表位与相应的淋巴细胞表面的抗原受体结合，从而激活淋巴细胞，引起免疫应答；抗原也借表位与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合而发挥免疫效应。抗原表位的性质、数目和空间构型决定抗原的特异性。抗原肽具有免疫原性的多肽或抗原衍生肽。
超抗原与普通抗原的区别
超抗原（super antigen，SAg）是一类只需极低浓度（≤10-9M）即可激活大量的T细胞克隆，产生极强免疫应答的物质。超抗原与普通抗原相比，不需要常规的细胞内抗原提呈，无MHC限制性。超抗原一端与APC表面的MHC-Ⅱ类分子抗原结合槽外的非多态区结合，一端与TCR的Vβ外侧区结合，通过
根据抗原的来源可将抗原分类
根据抗原的来源可将抗原分为：（1）异种抗原（xenoantigens）：病原微生物、类毒素等不同种族之间的抗原；（2）同种异型抗原（9alloantigens）：存在于同一种族不同个体之间的抗原，如HLA，ABO血型抗原，Rh抗原, MHC等；（3）自身抗原（autoantigens）：自身成分，分
抗原制备
不管是制备单抗还是多抗，抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题，设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件：（1）分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说，一个抗原决定簇（又叫表位，epitope），通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位
乙肝表面抗原的抗原阳性
乙型肝炎表面抗原阳性，表示体内已感染乙肝病毒。在急性感染中，乙肝表面抗原一般持续存在1-6个月，如果之后乙肝表面抗原转阴表明急性乙肝已经治愈， 若仍然为阳性，便变成慢性乙肝，若乙肝表面抗原出现过多，便成为爆发性急性肝炎。 乙肝表面抗原（HBsAg）阳性是体内存在乙肝病毒感染的标志之一 几种情
抗原呈递细胞的外源性抗原
外源性抗原经吞噬或吞饮作用，被APC摄入胞内形成吞噬体，后者与溶酶体融合形成吞噬溶酶体。抗原在吞噬溶酶体内酸性环境中被蛋白水解酶降解为小分子多肽，其中具有免疫原性的称为抗原肽。内质网中合成的MHC-Ⅱ类分子进入高尔基体后，由分泌小泡携带，通过与吞噬溶酶体融合，使抗原肽与小泡内MHC-Ⅱ类分子结合