一抗4度孵育后为什么要进行37度复温?

(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片; (2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。 (3)其实,我更赞同后一种说法,因为我尝试把肝脏或睾丸片子从4度过夜拿出后,直接用PBS洗没发生过脱片现象。事实胜于雄辩!......阅读全文

一抗4度孵育后为什么要进行37度复温?

(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片; (2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。 (3)其实,我更赞同后一种说法

western一抗4摄氏度敷育过夜后为什么要复温

我的理解是,为了更好的进行二抗孵育,毕竟抗体的最适温度是37度4度孵育过夜一般是为了减少非特异的条带,或者是实在是当天做不完了,扔到4度去过夜。

western一抗4摄氏度敷育过夜后为什么要复温

我的理解是,为了更好的进行二抗孵育,毕竟抗体的最适温度是37度4度孵育过夜一般是为了减少非特异的条带,或者是实在是当天做不完了,扔到4度去过夜。

转膜后为什么要电泳

、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸(三明治组合)之间气泡没赶干净导致的。2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了:转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上,转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了。建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染

蛋白纯化后为什么要结晶

一个原因是分离,蛋白质的纯化与分离是离不开的,不分离怎么利用,而结晶其实也是分离的一个手段一部分第二个原因,低温结晶后蛋白质相对会稳定一点,酸碱高温都会破坏蛋白质,所以结晶后也便于保存以后再用。

一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

色谱柱填充后为什么要老化

老化目的就是去除活化点和杂质。老化时要彻底老化,防止破坏固定相。

土壤消解后为什么要赶酸

可一次性处理多个样品,采用的是环绕加热方式,减少了同一样品不同部位的温度差,也缩小了样品间的温度差,加快了消解速度,同时也提高了实验的重复性和稳定性。使用成本低,节约电能。测定食品、药品中铅、镉、铬、汞、砷、锌、硒、锰等重金属元素,以及微量元素;测定土壤中重金属和微量元素的消解等。

萃取时振荡后为什么要放气

一般在分离实验时都会发生化学或是物理上的反应,如果震荡后不打开瓶塞放气的话,在萃取分离时容器内会产生压力,导致流速过快而无法控制分离,从而实验也会失败;另一方面也是因为如果瓶内溶液间产生气体,而不及时放气,则会导致容器内气体的增加,压力也随之增大,有爆炸的可能;所以做这些实验时需格外留心,按照实验步

土壤消解后为什么要赶酸

可一次性处理多个样品,采用的是环绕加热方式,减少了同一样品不同部位的温度差,也缩小了样品间的温度差,加快了消解速度,同时也提高了实验的重复性和稳定性。使用成本低,节约电能。测定食品、药品中铅、镉、铬、汞、砷、锌、硒、锰等重金属元素,以及微量元素;测定土壤中重金属和微量元素的消解等。

PCR反应后为什么要酶切

在设计pcr引物时,会将酶切位点设计在引物里面,但是pcr后的片段是双链平末端,需要将设计的酶切位点粘性末端暴露出来,所以需要酶切处理。

DNA经过PCR后为什么要电泳

PCR产物本身应该已经比较纯了。电泳分离的是一堆已知的DNA样本,然后用来作为比照试样。同时用一小部分PCR产物在一边参与电泳,和已知的DNA样本同时进行。

超净台灭菌后为什么要通风

紫外灯杀菌后通的是无菌空气,形成一个压强差,可以让超净台里面的气体逸出,而外面的空气进不去,防止再次被空气污染!

分液漏斗振荡后为什么要放气

从理论上讲,振荡时,有些液体会挥发成气体,特别是有机相,使漏斗内压强增大,所以要适时放气。从实际操作上讲,根本不需要如此做,这都是书呆子们想出来的,我们平时做萃取的时候,两只手各拿一个漏斗,用食指按住活塞,其余四指握好漏斗,根本不可能顶出来,所以说化学实验是要实际操作才知道的。

培养皿接种后为什么要倒置培养

  1、倒置培养可以防止污染:为了防止正置培养时培养皿盖上出现的蒸馏水流到培养皿上,导致菌落成片,不能计数或分离等。同时也减少染菌的可能。  2、方便观察计数:平板倒置进行微生物培养时,培养基表面生长的菌落相对不会太快扩散,观察时有利于辨别菌落特征。  3、利于菌落出现:倒置后,琼脂表面不会残留水份

western-blot-一抗孵育过夜具体是指孵育多少小时

一抗孵育过夜操作方法:下班时间——孵育一抗——放置在4℃冰箱内——第二天上班拿来孵育二抗时间8~10个小时,都行,

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二抗孵育时间

二抗孵育时间为1至2小时。参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温在摇床上缓慢摇动孵育1至2小时。回收二抗。二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择最适当的比例。一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景的深浅。要严格保证反应时间,

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

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一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。