间接免疫荧光和直接免疫荧光染色方法的异同
免疫荧光细胞化学方法的原理是根据抗原抗体反应的规律,把已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗原或抗体,然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。方法具体种类有直接法、间接法、夹心法和补体法等。在荧光显微镜下,根据其形成复合物所发的荧光,来确定判断检测物的来源、性质和部位。 1、直接法:这是最早的方法。其基本原理是用已知的抗体标记上荧光素后成为特异性荧光抗体,染色时将该抗体直接滴在载玻片上进行孵育,使之直接与载玻片上的抗原结合,在荧光显微镜下直接观察,作出判断。该方法评价:简单易行、特异性高、快速方便,常用于肾活检组织几种免疫球蛋白的检测和病原体的检测。但其不足是只能检测相应的一种物质,敏感性较差,效果有时不理想,目前较少作为更多方面的检测。 2、间接法:该法的基本原理是用特异性的抗体与切片中的抗原结合后,继用间接荧光抗体,与前面的抗原抗体复合物结合,形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下,根据复合物的发......阅读全文
电动机三角形接法和星形接法有什么区别?
三角形接线时,三相电机每一个绕组承受线电压(380V),而星形接线时,电机每一承受相电压(220V)。在电机功率相同的情况,角线电机的绕组电流较星接电机电流小。 当电机接成Y型运行时起动转矩仅是三角形接法的一半,但电流仅仅是三角形起动的三分之一左右。三角形起动时电流是额定电流的4-7倍,但转矩
间接法测抗体所需试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4荧光标记的抗人球蛋白抗体:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释。搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的纱布垫)荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等。
间接法测抗体基本原理
间接法测抗体基本原理:将抗原连接到固相载体上,样品中待测抗体与之结合成固相抗原-受检抗体复合物,再用酶标二抗(针对案检抗体的抗体,如羊抗人ICG抗体)与固相免疫复合物中的抗体结合,形成固相杭原-受检抗体-酶栝二抗复合物,测定加底物后的显色程度,测定待测抗体含量.
间接法测抗体基本原理
间接法测抗体基本原理:将抗原连接到固相载体上,样品中待测抗体与之结合成固相抗原-受检抗体复合物,再用酶标二抗(针对案检抗体的抗体,如羊抗人ICG抗体)与固相免疫复合物中的抗体结合,形成固相杭原-受检抗体-酶栝二抗复合物,测定加底物后的显色程度,测定待测抗体含量。
简介交流接触器的使用接法
一:一般三相接触器一共有8个点,三路输入,三路输出,还有是控制点两个。输出和输入是对应的,很容易能看出来。如果要加自锁的话,则还需要从输出点的一个端子将线接到控制点上面。 二: 首先应该知道交流接触器的原理。他是用外界电源来加在线圈上,产生电磁场。加电吸合,断电后接触点就断开。知道原理后,你应
直接法测抗原的注意事项
1)对荧光标记的抗体的稀释,要保证抗体的蛋白有一定的浓度,一般稀释度不应超过1:20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察。2)染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化,染色时间可以从10 min到数小时,一般30 min已足够。染色温度多采用室温(25℃左右),高于37℃可
间接法检测抗人球蛋白实验
实验方法原理间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。先用Rh(D)阳性O型(或与被检查ABO同型)的正常人红细胞吸附血清中存在的游离不完全抗体(即称致敏)致敏红细胞经盐水洗涤后加入抗人球蛋白血清,如出现凝集即为抗人球蛋白间接试验阳性.试剂、试剂盒生理盐水实验步骤方法一:1. 取受检血青0.5
间接法检测抗人球蛋白实验
实验方法原理间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。先用Rh(D)阳性O型(或与被检查ABO同型)的正常人红细胞吸附血清中存在的游离不完全抗体(即称致敏)致敏红细胞经盐水洗涤后加入抗人球蛋白血清,如出现凝集即为抗人球蛋白间接试验阳性.试剂、试剂盒生理盐水实验步骤方法一:1. 取受检血青0.5
直接法测抗原的基本原理
将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。
疫荧光技术间接法测抗体实验步骤
间接法测抗体⑴基本原理染色程序分为两步,第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的
免疫荧光组织化学直接法
1.检查抗原法:这是最早的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应抗原结合,在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差。 2.检查抗体法将抗原标记上荧光素,即为荧光抗原,用此荧光抗原与细胞或
间接法测抗体的实验注意事项
1)荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长 ,会使荧光减弱。2)每次试验时 ,需设置以下三种对照:① 阳性对照:阳性血清+荧光标记物② 阴性对照:阴性血清+荧光标记物③ 荧光标记物对照:PBS+荧光标记物3. 已知抗原标本片需在操作的各个步骤中,始终保持湿润,避免干燥。4. 所滴
升流器的直接法测量相关介绍
直接法 这里所谓的直接法就是电阻法,中试高测利用大功率标准电阻直接接于被测大电流接地电阻测量仪的测量端,原理框图如图1所示,用标准电阻值与测量仪表头所显示的电阻值作比较。 设标准电阻值为RN,即实际值,被检表显示读数为RX,则被检表的绝对误差为: Δ=RX-RN 被检表的相对误差为:
直接法测抗原的所需仪器和试剂
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的
直接法血清钾钠火焰光度分析实验
实验方法原理 火焰光度分析法,是一种发射光谱分析法,被测溶液经压缩空气雾化后于可燃气体混合后燃烧成火焰,由火焰激发后,各元素可发射出特有的光谱,由于火焰的激发能量较低,故被激发的元素只现于碱金属与碱土金属。钾的光谱是暗红色,其波长为765nm,Na的光谱是黄色,其波长为589nm。溶液中的金属元素浓
ELISA测定的常用模式间接法测抗体
基本方法的操作如下: 1.将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C过夜包被,形成固相抗原,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。 2.加入含待测抗体的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗体就会与固阳上特异抗原反应而
间接法测抗体的基本原理
染色程序分为两步,第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可
滤膜孔径测算方法直接法测膜孔径
扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)电子显微镜表征膜的孔径、孔径分布及膜的形态结构。 制样至关重要。湿膜样品要经过脱水、蒸镀、复型等处理。 逐级脱水法:膜样品用5%饿酸固定,然后在提取器中用CCl4或乙醇逐级脱水,再用环氧树脂包埋固化,最后用超薄切片机切成薄片。适用透射电子显微镜的观察。
直接法血清钾钠火焰光度分析实验
实验方法原理火焰光度分析法,是一种发射光谱分析法,被测溶液经压缩空气雾化后于可燃气体混合后燃烧成火焰,由火焰激发后,各元素可发射出特有的光谱,由于火焰的激发能量较低,故被激发的元素只现于碱金属与碱土金属。钾的光谱是暗红色,其波长为765nm,Na的光谱是黄色,其波长为589nm。溶液中的金属元素浓度
间接法操作elisa试剂盒的方法介绍
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜; 2、次日洗涤3次; 3、加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤; 4、(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1
接触器的接法选择及维修保养
接法选择 接法 交流接触器接法一: 一般三相接触器一共有8个点.三路输入.三路输出.还有是控制点两个.输出和输入是对应的.很容易能看出来.如果要加自锁的话.则还需要从输出点的一个端子将线接到控制点上面。 交流接触器接法二: 首先应该知道交流接触器的原理.他是用外界电源来加在线圈上.产生
关于抗人球蛋白试验(直接法)的简介
抗人球蛋白试验又称Coombs’试验,是检查不完全抗体的常用方法,是诊断自身免疫性溶血性贫血的最重要的试验。一般分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)。抗人球蛋白试验(直接法)的目的是检查红细胞表面的不完全抗体,抗人球蛋白试验(间接法)的目的是检查血清中是否存在游离的不完全抗体。表面附有
免疫荧光技术直接法测抗原实验步骤
直接法测抗原⑴基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。⑵试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01m
免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:间接法
一、原理与意义 免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——间接法,是一种荧光抗体染色法。该方法只需制备一种荧光抗体可以检出多种抗原,敏感性较高,操作方法较易掌握,而且能解决一些不易制备动物免疫血清的病原体(如麻疹)等的研究和检查,所以已被广泛应用于自身抗体和感染病人血清的试验。 二、操作流程 (一)双层法
电化学工作站电极的接法
电子或电器装置、设备中的一种部件,用做导电介质(固体、气体、真空或电解质溶液)中输入或导出电流的两个端。输入电流的一极叫阳极或正极,放出电流的一极叫阴极或负极。电极有各种类型,如阴极、阳极、焊接电极、电炉电极等。
PCR扩增产物的克隆——平端连接法
PCR扩增产物的克隆可以:(1)获得目的DNA片段;(2)用于原核表达的研究;(3)广泛应用于分子生物学相关研究。实验方法原理平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR产物纯化后,可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min(利用
关于抗人球蛋白试验(间接法)的简介
抗人球蛋白试验又称Coombs试验,是检查不完全抗体的常用方法,是诊断自身免疫性溶血性贫血的最重要的试验。一般分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)。抗人球蛋白试验(直接法)的目的是检查红细胞表面的不完全抗体,抗人球蛋白试验(间接法)的目的是检查血清中是否存在游离的不完全抗体。间接法是先
直接法测抗原的技术优点缺点和应用
将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。
DNA连接酶的衔接物连接法介绍
所谓衔接物(linker),是指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端,用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物
酶联免疫吸附(ELISA)实验——间接法(测抗体)
实验方法原理图1:间接法测抗体示意图间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再经孵育洗涤后,加底物显色,底物降解的量,即为欲测抗体的量,