补体C4高压电泳及免疫固定技术

1、原理用神经氨酸酶和羧肽酶B处理EDTA抗凝血浆,神经氨酸酶的作用主要是去涎,羧肽酶B能切除分子p链C端的碱性氨基酸,去除副带,将经过两酶处理后的 EIJE4抗凝血浆进行高压电泳,然后与抗C4血清作用形成沉淀带,将其漂洗后用考马斯亮蓝染色,参照第六届国际补体定型会议C4定型标准或C4标准血清,判断以的同种异型。 2、所需试剂 (1)羧肽酶B(carboxypeptidasetype I,Sigma)10mg/ml(170U/mg) 将羧肽酶B分装于若干支EP管中,每管15uL,-20℃保存,用时取出一管加lOOmmol/LNaCl至80g/L(可供17份样本用); (2)神经氨酸酶(neuraminidasetypeⅥ)IOU 将250rtl 0.2mol/L EDTA加入盛有神经氨酸酶的瓶中,-20℃保存。7.5ul EDTA抗凝血浆加2ul神经氨酸酶; (3)抗C4血清 用时1:......阅读全文

补体C4高压电泳及免疫固定技术

1、原理用神经氨酸酶和羧肽酶B处理EDTA抗凝血浆,神经氨酸酶的作用主要是去涎,羧肽酶B能切除分子p链C端的碱性氨基酸,去除副带,将经过两酶处理后的 EIJE4抗凝血浆进行高压电泳,然后与抗C4血清作用形成沉淀带,将其漂洗后用考马斯亮蓝染色,参照第六届国际补体定型会议C4定型标准或C4标准血清,

补体C4高压电泳及免疫固定技术

实验概要用神经氨酸酶和羧肽酶B处理EDTA抗凝血浆,神经氨酸酶的作用主要是去涎,羧肽酶B能切除以分子p链C端的碱性氨基酸,去除副带,将经过两酶处理后的EIJE4抗凝血浆进行高压电泳,然后与抗C4血清作用形成沉淀带,将其漂洗后用考马斯亮蓝染色,参照第六届国际补体定型会议C4定型标准或C4标准血清,判断

补体遗传多态性的检测

补体遗传多态性的检测大多分二步进行,第一步是用琼脂糖高压电泳或聚丙烯酰胺等电聚焦电泳将EDTA抗凝血浆通过凝胶电泳,根据分子量的大小、所带电荷的多少及等电点(pI)将血浆蛋白分开。第二步是免疫固定或溶血鉴定,琼脂糖高压电泳或聚丙烯酰胺等电聚焦后,在凝胶板上铺上抗补体某一成分的抗血清,使其与凝胶板上的

补体C4溶血覆盖技术

电泳是通过电场作用将C4迁移率不同的同种异型分离开,然后依照分型标准定型。在某些情况下,C4A某种同种异型与C4B某种同种异型迁移率相同不易区分开,此时可用溶血覆盖技术加以区别。1、原理 用肼处理豚鼠血清,可灭活其补体成分C4,使之成为帜缺乏的血清。将C4缺乏的豚鼠血清与致敏的SRBC混合,因缺

火箭免疫电泳法测定补体C4、B因...

1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度;(3)电泳缓冲液 称

免疫固定电泳

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定

补体C4(C4)临床意义

正常参考范围:0.44~0.66g/L临床意义:增高:风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心梗、Reiter综合症和各种类型的多关节炎。减低:自身免疫性慢性活动性肝炎、SLE活动期、多发性硬化症、类风湿性关节炎、IgA肾病、链球菌感染后、肾小球肾炎早期等。

关于免疫固定电泳技术的概述

  免疫固定电泳技术是一种区带电泳与免疫沉淀反应相结合的技术。基本原理是待测蛋白质在凝胶介质上经电泳分离后,将抗血清加上己分离的蛋白质泳道上或将已加抗血清的滤纸贴于其上。经孵育后,在适当位置产 生抗原抗体复合物并沉淀下来。  固定后的电泳凝胶在洗脱液中漂洗除去未结合的蛋白质,仅保留抗原抗体复合物,经

大鼠补体C4(C4)ELISA检测法

大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 C4 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 C4与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠C4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid

补体c4偏高的危害

  补体c4偏高的危害是免疫系统紊乱,机体发生炎症反应。补体C4参与机体内环境的稳定性,参与机体的适应性免疫应答,参与凝血等生物过程,可以监测疾病的炎症反应,监测机体内环境、凝血功能等。如果只有一项偏高,那么要结合其他检查、症状、体征来判断是否属于疾病,在正常的新陈代谢过程中,也会出现短暂的升高。需

血清补体C4检查作用

  测定C4含量有助于系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的诊断和治疗。增高见于风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、肝癌及各种类型的多关节炎等。降低见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎、多发性硬化性全脑炎、IgA肾病、胰腺癌晚期。

免疫固定电泳的定义

中文名称免疫固定电泳英文名称immunofixation electrophoresis;IFE定  义一种用于分析样品中特异性抗原的技术。即将蛋白质混合物在固相载体上进行区带电泳,再与特异性抗体反应,从而检出与抗体结合的相应抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(

免疫固定电泳是什么?

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定

什么是免疫固定电泳

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,  当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即

免疫固定电泳是什么?

免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定,再

大鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 C4 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 C4与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠C4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,C4

血清补体C4检查过程

  抽取静脉血,分离血清尽快进行测定

血清补体C4注意事项

  (1)抗原、抗体比例要适宜。抗原过浓不能得到圆锥状尖峰,而抗体太浓使沉淀峰太低,影响试验的灵敏度。  (2)加样后马上电泳,且标本不要太多,以防止峰形变宽。  (3)C4不很稳定,在4℃贮存2周或―20℃60d均可使C4值增加36%左右。而在1周内还是相对稳定的。

补体C4正常参考值及临床意义

中文名称:补体C4 英文名称及缩写:Complement 4 (C4)正常参考值:0.4~0.6g/L 临床意义: A.升高见于风湿热的急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter综合征和各种类型的多关节炎等。 B.降低见于自身免疫病、慢性活动性肝炎、SLE、多发性硬化症

免疫固定电泳的方法介绍

中文名称免疫固定电泳英文名称immunofixation electrophoresis;IFE定  义一种用于分析样品中特异性抗原的技术。即将蛋白质混合物在固相载体上进行区带电泳,再与特异性抗体反应,从而检出与抗体结合的相应抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(

血清补体C4裂解产物检查作用

  血清补体C4裂解产物测定有助于系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的诊断和治疗。增高:见于风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、肝癌及各种类型的多关节炎等。  降低:见于系统性红斑狼疮、慢性活动性肝炎、多发性硬化性全脑炎、IgA肾病、胰腺癌晚期。

血清补体C4的临床意义及注意事项

  临床意义  C4含量升高见于风湿热的急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter综合征和各种类型的关节炎等;降低常见于自身免疫性慢活肝、SLE、多发性硬化、类风湿性关节炎、肾病、亚急性硬化性全脑炎等。在SLE,C4的降低常早于其他补体成分,且较其他成分回升迟。狼疮性肾炎较非狼疮性肾炎

血清补体C4的注意事项及检查过程

  注意事项  (1)抗原、抗体比例要适宜。抗原过浓不能得到圆锥状尖峰,而抗体太浓使沉淀峰太低,影响试验的灵敏度。  (2)加样后马上电泳,且标本不要太多,以防止峰形变宽。  (3)C4不很稳定,在4℃贮存2周或―20℃60d均可使C4值增加36%左右。而在1周内还是相对稳定的。  检查过程  (1

血清补体C4的正常值及临床意义

  正常值  130~370mg/L。  临床意义  C4含量升高见于风湿热的急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter综合征和各种类型的关节炎等;降低常见于自身免疫性慢活肝、SLE、多发性硬化、类风湿性关节炎、肾病、亚急性硬化性全脑炎等。在SLE,C4的降低常早于其他补体成分,且较其

简述血免疫固定电泳的原理

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定

简述血免疫固定电泳的原理

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定

免疫固定电泳操作规程(3)

(二)将1只(用于1,2IF),2只(用于4IF)或3只(用于9IF)点样梳置于整表面,有数字的一端向上,在2分钟内完成每块加样梳的加样,每孔加10ul样品,然后齿梳向上把加样梳放于湿盒内5分钟。电泳/免疫固定泳道孔号 ELP GAM K L Kf LfHydrasys 1 IF 1 2 3 4 5

简述血免疫固定电泳的原理

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定

免疫固定电泳操作规程(2)

六、试剂及配套品(一)试剂1、HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒(1) 商标:SEBIA(2) 包装规格:10测试/20测试/40测试/90测试(3) 货号:PN4301/ PN4302/ PN4304/P

免疫固定电泳操作规程(1)

一、项目名称免疫固定电泳(HYDRAGEL IMMUNOFIXATION)二、检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三、方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域,通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。为鉴别异常条带,可运用免疫固定技术。免疫固定电泳是一种简单的技术,