免疫固定电泳操作规程(3)
(二)将1只(用于1,2IF),2只(用于4IF)或3只(用于9IF)点样梳置于整表面,有数字的一端向上,在2分钟内完成每块加样梳的加样,每孔加10ul样品,然后齿梳向上把加样梳放于湿盒内5分钟。电泳/免疫固定泳道孔号 ELP GAM K L Kf LfHydrasys 1 IF 1 2 3 4 5 6Hydrasys 2/4 IF1或3号样本 2 3 4 5 6 72或4号样本 9 10 11 12 13 14Hydrasys 9 IF1,4或7号样本 1 2 3 4 5 62,5或8号样本 7 8 9 10 11 123,6或9号样本 13 14 15 16 17 18三)选择相应的“IF”电泳程序(四)从包装袋内取出缓冲条,将其固定在电极支架背侧的钉上,再取出凝胶,用薄滤纸快速轻轻地吸去凝胶表面多余的液体,在温控板表面下1/3处加 200ul蒸馏水或去离子水,将凝胶片底边紧靠框架底边,边缘对齐边线,略弯曲凝胶片慢慢放平,注......阅读全文
电泳技术:生物化学实验常用技术3
三.凝胶孔径的调节凝胶孔径、机械性能(弹性)、透明度等在很大程度上取决于Acr和Bis二者的总浓度T%。T%越大,孔径越小,机械强度则增加。凝胶的特性是分子筛效应。在聚合前调节单体的浓度来控制凝胶孔径大小,有利于针对样品分子大小,增加分辨力。为此可以根据分离样品分子大小配制不同孔径的凝胶。一般大孔胶
固相化-pH-梯度双向凝胶电泳实验3
方案3 双向凝胶电泳大肠杆菌裂解液的制备实验实验方法原理细菌裂解液含大量核酸,在进行双向凝胶电泳之前,需先对核酸进行处理。可通过超声波处理包含脲和 CHAPS 的细菌提取液。当脲存在时,核酸酶(Benzonase) 是有活性的,但是其活性依赖于 Mg2+。核酸酶处理后加入 EDTA 以抑制金属蛋白酶
关于沉淀反应—对流免疫电泳(counter-immunoelectrophoresis)-的简介
对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis) 若在双扩基础上加电泳,将抗原孔置负极端,抗体孔置正极端。由于抗原所带的负电荷较抗体多,且抗原分子小于抗体,在电场中能够克服电渗的作用而由负极泳向正极;抗体却克服不了电渗作用,从正极向负极移动,二者形成对流,并在比例适宜处
rhGH中间体SDSPAGE电泳标准操作规程(SOP)2
三.操作方法1.夹心式垂直电泳槽使用方法1)清洗部件:用去污剂清洗长短玻璃板、胶模框及样品梳,用自来水彻底冲洗,再用去离子水不洗净,放置晾干或用滤纸擦干(注意不要留下纤维)待用。如有必要,也可先用5% KOH甲醇溶液(5g KOH溶于100ml甲醇)清洗玻璃板,再按以上步骤洗净。小心:KOH有腐
rhGH中间体SDSPAGE电泳标准操作规程(SOP)1
目的:规范生长激素中间体的电泳检测一.仪器装置1.电泳仪2.夹心式垂直电泳槽3.玻璃板:长14.5×11.5×2mm、短14.0×11.5×2mm4.可调微量移液器5.微量进样器6.转移脱色摇床二.试剂配制1.丙烯酰胺液(30%T/2.7%C)用天平分别称取58.4g丙烯酰胺(Acr)和1.6g
ZDJ3S卡氏微量水分测定仪操作规程
1、目的:建立ZDJ-3S卡氏微量水分测定仪使用操作规程的使用操作规程,使检验人员正确操作。2、 适用范围:适用于质检中心ZDJ-3S卡氏微量水分测定仪的使用和维护。3、责任者:操作人员对本规程实施负责。4、规程:4.1打开电源开关后,开机显示欢迎界面,在输入实验员名称后进入等机状态,如不输入,按“
关于免疫诊断方法—沉淀反应(precipitation)概述
可溶性抗原与相应抗体在有适量电解质存在下,出现肉眼可见的沉淀现象,称为沉淀反应。参与反应的抗原称沉淀原(precipitinogen),抗体称沉淀素(precipitin)。沉淀原可以是多糖、蛋白质、类脂等,由于其体积小,相对反应面积大,故试验时需对抗原进行稀释,以避免后带现象。应用较早的沉淀反
小儿肾淀粉样变性的实验室检查
(1)血液检查 血液生化检查纤维蛋白原增加,血浆纤维蛋白原增加引起肾静脉血栓,尿蛋白增多,亦有导致肾功能不全,约30%的肾静脉血栓由本病征引起。外周血发现Howell-Jolly小体,提示脾脏受累。 (2)蛋白电泳检查 2/3患者的血清电泳或免疫电泳可发现单克隆的异常蛋白,而尿检查的阳性率可提
原发性系统性淀粉样变病例分析
1 临床资料 患者男, 67 岁,阴囊、会阴区、眶周瘀斑 1 年余, 加重4 个月。患者1 年余前无明显诱因于阴囊部先 出现丘疹、瘀斑,渐延及眶周,曾就诊于多家医院皮 肤科及眼科,诊断为“湿疹、股癣”等,口服“依巴斯 汀、地氯雷他定、复方甘草酸苷胶囊、伊曲康唑胶 囊”,外用“酮康唑乳膏、地奈德乳膏、
继发性单克隆免疫球蛋白病的临床表现及检查
临床表现 继发性单克隆免疫球蛋白增多本身通常不引起临床表现或体征。病人的临床表现主要与其原发病有关。在少数情况下,单克隆免疫球蛋白具有抗红细胞、抗凝血因子或抗胰岛素特性,可引起溶血性贫血、获得性血管假性血友病或低血糖症。 检查 1.外周血 血常规与伴有相关疾病有关,红细胞、血红蛋白、白细
沉淀反应在医学检验中应用
免疫浊度法主要用于血液、体液中蛋白质的测定。稳定性好,敏感度高(达ng/L),精确度高(CV<5%),简便快速,易于自动化,无放射性核素污染,适合于大批量标本的检测。免疫固定电泳技术在临床应用较广。最大的优势是分辨力强,敏感度高,结果易于分析,现最常用于血清中M蛋白的鉴定与分型。
沉淀反应在医学检验中的应用
免疫浊度法主要用于血液、体液中蛋白质的测定。稳定性好,敏感度高(达ng/L),精确度高(CV<5%),简便快速,易于自动化,无放射性核素污染,适合于大批量标本的检测。免疫固定电泳技术在临床应用较广。最大的优势是分辨力强,敏感度高,结果易于分析,现最常用于血清中M蛋白的鉴定与分型。
球蛋白异常的检查及鉴别诊断
检查 免疫球蛋白异常增生性疾病的检测方法很多,一般应采用两种以上的检测方法互相印证。当临床上怀疑MM、巨球蛋白血症、重链、轻链病或其他浆C恶性病变时,按下列程序进行测定: ①血清区带电泳分析,发现异常球蛋白区带; ②Ig定量检测或尿本周蛋白定性检测,为初筛试验; ③对阳性者宜作免疫电泳或
电泳技术及其临床应用新进展
电泳技术是一门古老而又年轻的技术。早在1809年俄国物理学家Reuss就进行了世界上第一次电泳实验,此后各种电泳技术及仪器相继问世,广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、其他有机化合物甚至无机离子等领域的分离和/或鉴定。近年来,先进的电泳技术和各种自动电泳分析系统被越来越多的临床实验室所采用检验|地带网搜
检查淀粉样变性的方式介绍
淀粉样变性之实验室检查各指标几乎都无特异性。 1、外周血 血红蛋白、白细胞计数及分类、血小板一般正常,仅11%患者血红蛋白L,此与骨髓瘤者累及骨髓、肾功能不全或胃肠道失血有关。约9%的患者其血小板数>500×109/L。由于淀粉样物沉淀导致脾功能减退所致。 2、生化检查 部分患者有碱性磷
电泳技术及其临床应用新进展
电泳技术是一门古老而又年轻的技术。早在1809年俄国物理学家Reuss就进行了世界上第一次电泳实验,此后各种电泳技术及仪器相继问世,广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、其他有机化合物甚至无机离子等领域的分离和/或鉴定。近年来,先进的电泳技术和各种自动电泳分析系统被越来越多的临床实验室所采用检验|地
电泳技术及其临床应用新进展
电泳技术是一门古老而又年轻的技术。早在1809年俄国物理学家Reuss就进行了世界上第一次电泳实验,此后各种电泳技术及仪器相继问世,广泛应用于蛋白质、氨基酸、核酸、其他有机化合物甚至无机离子等领域的分离和/或鉴定。近年来,先进的电泳技术和各种自动电泳分析系统被越来越多的临床实验室所采用检验
球蛋白异常的鉴别诊断
免疫球蛋白异常增生性疾病的检测方法很多,一般应采用两种以上的检测方法互相印证。当临床上怀疑MM、巨球蛋白血症、重链、轻链病或其他浆C恶性病变时,按下列程序进行测定: ①血清区带电泳分析,发现异常球蛋白区带; ②Ig定量检测或尿本周蛋白定性检测,为初筛试验; ③对阳性者宜作免疫电泳或免疫固定
球蛋白异常的检查
免疫球蛋白异常增生性疾病的检测方法很多,一般应采用两种以上的检测方法互相印证。当临床上怀疑MM、巨球蛋白血症、重链、轻链病或其他浆C恶性病变时,按下列程序进行测定: ①血清区带电泳分析,发现异常球蛋白区带; ②Ig定量检测或尿本周蛋白定性检测,为初筛试验; ③对阳性者宜作免疫电泳或免疫固定
关于尿本周蛋白检测的内容介绍
尿本周蛋白检测,是一种尿常规化验项目,正常条件下显示阴性,阳性多见于多发性骨髓瘤、慢性白血病等疾病。 (1)单位:无单位 (2)正常值:阴性 (2)临床意义:若出现阳性,多见于多发性骨髓瘤、慢性白血病、骨髓瘤有转移时、巨球蛋白血症、肾脏淀粉样变、慢性肾盂肾炎、恶性淋巴瘤等。 尿本周蛋白的
关于球蛋白异常的检查介绍
免疫球蛋白异常增生性疾病的检测方法很多,一般应采用两种以上的检测方法互相印证。当临床上怀疑MM、巨球蛋白血症、重链、轻链病或其他浆C恶性病变时,按下列程序进行测定: ①血清区带电泳分析,发现异常球蛋白区带; ②Ig定量检测或尿本周蛋白定性检测,为初筛试验; ③对阳性者宜作免疫电泳或免疫固定
关于免疫增殖病实验诊断的实验室检查介绍
1.多发性骨髓瘤 (1)免疫学检查:①免疫球蛋白测定:相应的单克隆IgG、IgA、lgM、IgD、IgE升高;②血、尿轻链测定:相应轻链κ或λ升高,κ/λ比值异常;③血清蛋白电泳:出现狭窄浓集的异常区带,其区带宽度同Alb带大致相等或者较其狭窄,即M蛋白带;④免疫固定电泳:免疫固定电泳不同泳道
核酸电泳(RNA电泳与DNA电泳)
(一)DNA的凝胶电泳:凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。琼脂糖凝胶用于分离大于200~1000bp的片段;操作简单、快速,且分离范围广,分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝胶用于分离5-500bp的片段; 效果好、分辨率极高,相差1bp的DNA片断就能分开,能容纳相对大量的DNA ,用于核苷酸多态性的分析。
分享RZ3建材制品燃烧热值试验仪的操作规程
1、设备启动前的检查与准备工作。① 、试验室应设在一单独房间,并且不得在同一房间内同时进行其他试验项目的测定。 ②、 实验室室温应保持在15~35℃范围内,并且每次测定时室温变化不得超过1℃。 ③、实验室内应无强烈的空气对流,不应有强烈的热源和风扇,试验过程中应避免开启门窗。④、试验室应避免阳光直射
液体比重天平操作规程操作规程
1、液体比重天平主要用途及作用原理液体比重天平是计量仪器之一,可供化工部门、科学研究部门的实验室等作测定液体比重之用。本天平是有一标准测锤体积(125px3)浸没于液体中获得浮力而使横梁失去平衡,然后在横梁的V形槽里放置各种定量骑码(砝码),使横梁恢复平衡,就能迅速正确测得该液体的比重。2、液体比
C3肾小球肾炎转为单克隆IgG沉积的增生性肾小球肾炎...
C3肾小球肾炎转为单克隆IgG沉积的增生性肾小球肾炎病例分析病例资料 现病史 58岁女性患者,因“水肿、尿检异常12年,血清肌酐(scr)及血压升高5月”2014-05-20入院。 2002年患者因颜面部水肿查尿蛋白阳性(定量不详),隐血++,SCr及血压均正常,服中成药(具体不详)治疗6月,水肿消
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度3
3.制备凝胶板不连续体系采用不同孔径及pH的分离胶与浓缩胶 ,凝胶制备应分2步进行。① 分离胶的制备:根据实验要求,选择最终丙烯酰胺的浓度,本实验需20ml pH8.9 7.0 %PAA溶液,其加胶方式不同于连续系统。混合后的凝胶溶液,用细长头的滴管加至长、短玻璃板间的窄缝内,加胶高度距样品模板
蛋白质双向电泳(twodimensional-electrophoresis)过程与体会3
二、一向电泳(13cm的holder)(1)取大约70-100ng的蛋白与溶胀液混合总体积达到250vl(2)将上述溶液加到holder 的两个电极之间。(3)去掉胶条的保护膜,胶面朝下,先将胶条尖端朝胶条槽的尖端方向放入胶条槽中,慢慢下压胶条,并前后移动,避免生成气泡,最后放下胶条平端,使溶液浸湿
一例以胰腺和胃占位为首发表现的多发性骨髓瘤病例分析
患者,男,50岁,因"腰部疼痛3周并进行性加重2 d"于2014年1月16日入我院。入院前1个月无明显诱因出现腰部疼痛,并逐渐加重,随后出现背部疼痛,无咳嗽、咯痰,无发热、盗汗,体重无明显变化。于当地医院查CT及MRI提示:胰体尾占位、T9椎体压缩骨折。后于山东省肿瘤医院查PET-CT提示:①胰尾F
以皮肤表现为首发临床表现的多发性骨髓瘤病例分析
1 临床资料 患者男,71 岁,全身丘疹坏死结痂 1 年。患者 1 年前无明显诱因颜面部出现红色丘疹,不伴瘙痒或 疼痛,后坏死、结痂,予以中草药( 具体不详) 治疗后 皮疹无明显好转,逐渐泛发全身。1 个月前进食辛 辣刺激食物后,全身皮疹数量显著增多,尤以颜面部 为多,无发热畏寒,无恶心呕