脐静脉内皮细胞培养方法2

(2)术前准备取一根脐带(离体3个小时内,平均1小时,剪去夹伤部位)2个50ML注射器,1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳,2根插管,14号线2CM长,消毒巾,消毒手术刀和无菌手套手术区域准备:一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养(1)用手术刀整齐切断脐带两端(2)静脉(口径最大的脉管)两端各导入一带有胶管的玻璃导管,用线紧绑(脐带结)(3)用50ML的注射器吸入PBS液清洗脐带(4)用30ML的注射器把10ML的0.2%胶原蛋白酶从静脉的一端注入,直到血管充盈为止(5)当从另一断漏出时,用止血钳紧端口(6)退出注射器,用止血钳夹紧胶管(7)把脐带放在在37℃的盛有脐带缓冲液中培养15分钟(8)其间轻轻的挤压脐带(9)用10ML完全培养液填满一个50ML的无菌锥形离心管中(10)用这个锥形离心管收集用40ML的PBS冲洗脐静脉出来的溶液(11)在1000转/分下离心10分钟(12)弃上清,再加入20ML的培......阅读全文

脐静脉内皮细胞培养方法2

(2)术前准备取一根脐带(离体3个小时内,平均1小时,剪去夹伤部位)2个50ML注射器,1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳,2根插管,14号线2CM长,消毒巾,消毒手术刀和无菌手套手术区域准备:一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养(1)用手术刀整齐切断脐带两端(2)静脉(口径最

脐静脉内皮细胞培养方法1

一、试剂和缓冲液配制1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶)(1)解冻胎牛血清(2)在56℃加热30分钟(脱补体作用,盖上瓶)(3)取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏(4)在-20℃冰冻馏份2、磷酸盐缓冲液(PBS)(1)无钙镁离子的100ML的PBS(10×)(生命技术)(2)900

HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点

1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍

HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点

1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍

HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点

1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,24-27代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PriCells -  正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × P

脐静脉内皮细胞传代培养方法

Sciencell公司的人脐静脉内皮细胞(货号#8000、HUVEC)是科研实验中常用到的内皮细胞,当人脐静脉内皮细胞达到80-90%融合时,需要对人脐静脉内皮细胞进行传代培养。传代培养方法:1.准备培养瓶:用纤维粘连蛋白(货号#8248、BPF)以2ug/cm2包被培养瓶,包被时间为37度一小时或

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

实验材料 新生儿脐带试剂、试剂盒 PBS胶原酶M199培养基胰酶EDTADMEM培养基仪器、耗材 针头手术钳离心管低温离心机弯管明胶恒温培养箱显微镜实验步骤1. 将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。(注:4℃下最多贮存24 小时,室温下不超过6 小时,否则废弃)2. 用一个

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。(注:4℃下最多贮存24小时,室温下不超过6小时,否则废弃)2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的PBS溶液冲洗3-5次,将污血冲洗干净为止。3 ). 用手术钳夹紧脐带下端,加入15m

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。(注:4℃下最多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃)2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次,将污血冲洗干净为止。3. 用手术钳夹紧脐带下端,加入 15ml 的胶原酶(1mg

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养 1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。(注:4℃下多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃) 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次,将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带

人脐静脉内皮细胞的介绍

人脐静脉内皮细胞(英Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)在进行血管内皮细胞实验时,通常选用的细胞模型为人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)可用于:(1)作为体外实验模型细胞;(2)研究血管内皮细胞的生物学特性及其与各种疾病的关系。实验方法原理本实验采用新鲜的健康产妇新生儿脐带,采用胶原酶Ⅰ型用消化分离得到脐静脉内皮原代细胞。胶原酶是最理想的血管内皮细胞分离酶,对细胞间质有较强的消化作用,能使上皮细胞与胶原

正常人脐静脉内皮细胞的培养

实验材料:1. 婴儿脐带;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和1

正常人脐静脉内皮细胞的培养

  正常人脐静脉内皮细胞的培养    实验材料:   1. 婴儿脐带;   2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;   3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:

人脐静脉内皮细胞的形态学观察和鉴定方法

人脐静脉内皮细胞爬片准备:细胞换液后直接在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特征,并作相差摄影,同时进行常规HE染色观察并摄片。鉴定采用DAB免疫组织化学法,在6孔培养板中放置载玻片,在玻片上植入2ml含有1×106的细胞悬液,待细胞贴壁后,取出载玻片,放入-20℃的冷丙酮中固定30min,用PBS冲

脐静脉内皮细胞相关实验应注意事项

脐静脉内皮细胞作为科研工作者很多相关实验要用到的产品在近年来受到了市场的热烈追捧。而进行相关实验的前期准备和对脐静脉内皮细胞产品的选择及处理都是尤为重要的,这需要消费者在各个方面都要做到谨慎而严密。下面小编就为各位介绍一下脐静脉内皮细胞相关实验应注意哪些事项。 一、注意做好实验前准备科研工作者在做脐

血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料

人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤

溶液以及器材:1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗:青霉素:100ku/L链霉素:100ku/L庆大霉素:100ku/L3、培养液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶(脐带数+1)6、止血钳

从脐静脉分离干细胞

试剂和材料:1. 培养基:完全LG-DMEM:含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM,添加10%热灭活胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;2. PBSA;3. 胰蛋白酶,0.05%,含EDTA;4. 胶原酶A,0.1%用PBSA配制;5. 培养瓶;6. 导管;实验方法:1.

内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法的简介

  1、产后新鲜脐带,无菌剪取 10—15 厘米长一段,如不能立即培养,可于 12 小 时内保存于 4℃。  2、用三通注射器吸取温 PBS 液注入脐静脉中洗去残血,在入口处用线绳扎紧, 以防液体返流。  3、用血管钳夹紧脐带一端,从另一端向脐静脉中徐徐注入浓度为 0.1%的粗制胶原酶,充满血管,消

从脐静脉分离干细胞操作步骤

从脐静脉分离干细胞试剂和材料:培养基:完全LG-DMEM:含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM,添加10%热灭活胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;2.A;3.胰蛋白酶,0.05%,含EDTA;4.胶原酶A,0.1%用A配制;5.培养瓶;6.导管;实验方法:在正常分娩后6

上皮细胞类培养实验_内皮细胞培养实验

实验方法原理内皮细胞易于从血管分离进行培养成单层细胞,对研究内皮细胞再生生、肿瘤促血管生长因子(TAF)等有很大应用价值。人内皮细胞培养可应用人脐带脐静脉、动物大动脉等,用灌流消化法获取细胞最为简便。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液PBS仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤1.  取产后的新鲜脐

胎儿脐动脉舒张期脐血流缺失病例报告2

出院后于我科门诊定期产检复查。2018-10-08我院胎儿彩超诊断意见:宫内妊娠,臀位,单活胎;胎儿头围、双顶径、腹围大小相当于妊娠约27周,股骨长相当于妊娠约25周(双顶径68mm,股骨长52mm,头围255mm,腹围235mm);胎盘成熟度0度,厚29mm;羊水量正常,羊水深度42mm;BPS评

血管内皮细胞培养

研究人内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法最为简便,其法如下:1、产后新鲜脐带,无菌剪取10—15厘米长一段,如不能立即培养,可于12小时内保存于4℃。2、用三通注射器吸取温PBS液注入脐静脉中洗去残血,在入口处用线绳扎紧,以防液体返流。3、用血管钳夹紧脐带一端,从另一端向脐静脉中徐徐注入终浓度为0.

正常角膜内皮细胞培养

正常角膜内皮细胞培养实验材料:1. 角膜材料:可以取自人眼、兔眼或者牛眼,人眼材料最好来自胎儿;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 特殊器械:虹膜恢复器;4. 消毒液:1:5000的升汞溶液与100IU/ml的庆大霉

人脐静脉细胞HUVEC该如何分析检测?

  人脐静脉细胞HUVEC是从脐静脉分离的原代细胞,这些细胞是用于研究内皮细胞的模型系统。它们用于研究缺氧,炎症,氧化应激,感染,正常和与肿瘤相关的血管生成。细胞因子(例如TNF-α和IFN-γ)诱导内皮细胞激活(炎症反应)并导致细胞粘附分子(例如VCAM-1/CD106)的上调,可以通过荧光标记的

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞

实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管,用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带,收集含有内皮和

人脐动脉平滑肌细胞培养实验

消化法 贴块法             实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。

人脐动脉平滑肌细胞培养实验

消化法 贴块法             实验方法原理 运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。