人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤
溶液以及器材：1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗：青霉素：100ku/L链霉素：100ku/L庆大霉素：100ku/L3、培养液（M199＋ECGS[3ug/ml]＋15％胎牛血清）有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶（脐带数＋1）6、止血钳（脐带数×2＋2）7、大针头数个（用于吸取生理盐水，胶原酶）8、手术剪刀数把使用前器械高温蒸气灭菌。实验步骤：1、去妇产科取当天新鲜脐带（广口瓶；生理盐水），试验前放入4度冰箱。2、辨别脐带静脉（粗大的那根），顺着静脉瓣插入大针头，注入生理盐水，充分冲洗脐静脉，至流出液体中无可见血液。3、夹住脐带下端，从上端灌注0.1%的胶原酶，钳住脐静脉上端，37度孵育15分钟（已经足够）；如果消化液中出现絮状物，说明消化时间过长。4、收集消化液，并用含小牛血清的RPMI-1640 冲洗脐静脉，冲洗液并入消化液中。1000－1500转离心10分钟。......阅读全文
人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤
溶液以及器材：1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗：青霉素：100ku/L链霉素：100ku/L庆大霉素：100ku/L3、培养液（M199＋ECGS[3ug/ml]＋15％胎牛血清）有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶（脐带数＋1）6、止血钳
血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞
实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
实验材料 新生儿脐带试剂、试剂盒 PBS胶原酶M199培养基胰酶EDTADMEM培养基仪器、耗材 针头手术钳离心管低温离心机弯管明胶恒温培养箱显微镜实验步骤1. 将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24 小时，室温下不超过6 小时，否则废弃）2. 用一个
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24小时，室温下不超过6小时，否则废弃）2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。3 ). 用手术钳夹紧脐带下端，加入15m
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下最多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃）2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。3. 用手术钳夹紧脐带下端，加入 15ml 的胶原酶（1mg
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养 1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。（注：4℃下多贮存 24 小时，室温下不超过 6 小时，否则废弃） 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次，将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）可用于：（1）作为体外实验模型细胞；（2）研究血管内皮细胞的生物学特性及其与各种疾病的关系。实验方法原理本实验采用新鲜的健康产妇新生儿脐带，采用胶原酶Ⅰ型用消化分离得到脐静脉内皮原代细胞。胶原酶是最理想的血管内皮细胞分离酶，对细胞间质有较强的消化作用，能使上皮细胞与胶原
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍
HUVEC人脐静脉内皮细胞培养要点
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍
从脐静脉分离干细胞操作步骤
从脐静脉分离干细胞试剂和材料：培养基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%热灭活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素；2.A；3.胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4.胶原酶A，0.1%用A配制；5.培养瓶；6.导管；实验方法：在正常分娩后6
人脐静脉内皮细胞的介绍
人脐静脉内皮细胞（英Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）在进行血管内皮细胞实验时，通常选用的细胞模型为人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells，简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细
脐静脉内皮细胞培养方法2
（2）术前准备取一根脐带（离体3个小时内，平均1小时，剪去夹伤部位）2个50ML注射器，1个30ML注射器和1个10ML注射器1个止血钳，2根插管，14号线2CM长，消毒巾，消毒手术刀和无菌手套手术区域准备：一块床单和无菌手套封套3 脐带手术操作和培养（1）用手术刀整齐切断脐带两端（2）静脉（口径最
脐静脉内皮细胞培养方法1
一、试剂和缓冲液配制1、胎牛血清（氯化十六烷基吡啶）（1）解冻胎牛血清（2）在56℃加热30分钟（脱补体作用，盖上瓶）（3）取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏（4）在-20℃冰冻馏份2、磷酸盐缓冲液（PBS）（1）无钙镁离子的100ML的PBS（10×）（生命技术）（2）900
正常人脐静脉内皮细胞的培养
实验材料：1. 婴儿脐带；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. 培养用液：M199培养液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:1，V：V）混合消化液；D-Hanks液、100IU/ml青霉素和1
正常人脐静脉内皮细胞的培养
正常人脐静脉内皮细胞的培养 实验材料： 1. 婴儿脐带； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 培养用液：M199培养液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:
脐静脉内皮细胞传代培养方法
Sciencell公司的人脐静脉内皮细胞（货号#8000、HUVEC）是科研实验中常用到的内皮细胞，当人脐静脉内皮细胞达到80-90%融合时，需要对人脐静脉内皮细胞进行传代培养。传代培养方法：1.准备培养瓶：用纤维粘连蛋白（货号#8248、BPF）以2ug/cm2包被培养瓶，包被时间为37度一小时或
正常人脐静脉原代内皮细胞培养
PriCells - 正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液： 1 × P
人脐静脉内皮细胞的形态学观察和鉴定方法
人脐静脉内皮细胞爬片准备：细胞换液后直接在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特征，并作相差摄影，同时进行常规HE染色观察并摄片。鉴定采用DAB免疫组织化学法，在6孔培养板中放置载玻片，在玻片上植入2ml含有1×106的细胞悬液，待细胞贴壁后，取出载玻片，放入-20℃的冷丙酮中固定30min,用PBS冲
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验
实验方法原理 在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖试验
血管内皮细胞不仅参与调节血管通透性和凝血过程，在免疫调节，移植排斥，肿瘤转移，炎症等许多过程中也具有重要作用。内皮细胞培养是体外研究内皮细胞功能的重要手段。70年代Eric等建立了内皮细胞分离及体外培养的方法。人脐带静脉是人血管内皮细胞最易获取的来源，在人内皮细胞的研究中被普遍采用。 ㈠ 原理在体
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验
实验方法原理 在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶
人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验
实验方法原理在体外，内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖，并可传代，可作为内皮细胞增殖，细胞因子分泌、表型等研究的模型。实验材料胶原酶血清试剂、试剂盒Cord Buffor硫酸链霉素生埋盐水EDTA-Na明胶仪器、耗材插管止血钳注射器手套丝线饭盒匀浆机离心机振荡器培养瓶CO孵箱显微镜超净
分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞
实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞
实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管，用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带，收集含有内皮和
人PBMC分离和培养步骤和体会
1、将静脉血20ｍl用ACD抗凝剂以容积比血：抗凝剂＝9：1抗凝处理。 2、按血：分离液＝1：2注入国产淋巴细胞分离液上层，400g 20℃离心30分钟。 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g，10min洗三次。 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会：
细胞传代培养原理、仪器试剂和操作步骤
一、原理细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。二、材料和试剂1、细胞：贴壁细胞株2、试剂
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒操作步骤
我司ELISA试剂盒品质保证，质量优，价格实惠，是您生物实验的首选，如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人抗内皮细胞抗体(AECA)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗内皮细胞抗体(AECA)水平。用纯化的抗原包被微孔
从脐静脉分离干细胞
试剂和材料：1. 培养基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%热灭活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4. 胶原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培养瓶；6. 导管；实验方法：1.
分离和培养人角膜内皮细胞实验——培养内皮细胞球
实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒ESM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材未经组织培养处理的24孔板实验步骤(a)胰蛋白酶消化细。(b)将分离出的细胞用培养基以10个细胞/μL的密度重悬，并接种于未经组织培养处理的24孔板中。(c)7天后用胰蛋白酶消化细胞并离心收集细胞，继续接种。