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血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料薄膜或莎纶封皮软木板很坚韧的线Luer接合管实验步骤内皮细胞的分离1. 用铝箔覆盖软木板。2. 将棉纸铺在铝箔上面,然后用 70 % 乙醇浸泡。3. 挤出脐带中的血液。4. 切除脐带一端 2 cm 或 2 cm 以上,包括动脉夹痕迹处。5. 将 Luer 接合管外套插入静脉。6. 用针将脐带钉在软木板上,但注意勿穿经血管腔。7. 用手术刀和手术镊剥出一段静脉,长约 2 cm。8. 缝线固定接合管,紧紧打结两次。9. 夹闭脐带另一端,将 20 ml 注射器接在接合管上,再将 25 ml D-PBSA (放在冰上)注入脐带。靠 D-PBS......阅读全文

血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料

人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤

溶液以及器材:1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗:青霉素:100ku/L链霉素:100ku/L庆大霉素:100ku/L3、培养液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶(脐带数+1)6、止血钳

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)可用于:(1)作为体外实验模型细胞;(2)研究血管内皮细胞的生物学特性及其与各种疾病的关系。实验方法原理本实验采用新鲜的健康产妇新生儿脐带,采用胶原酶Ⅰ型用消化分离得到脐静脉内皮原代细胞。胶原酶是最理想的血管内皮细胞分离酶,对细胞间质有较强的消化作用,能使上皮细胞与胶原

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。(注:4℃下最多贮存24小时,室温下不超过6小时,否则废弃)2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的PBS溶液冲洗3-5次,将污血冲洗干净为止。3 ). 用手术钳夹紧脐带下端,加入15m

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养 1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。(注:4℃下多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃) 2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次,将污血冲洗干净为止。 3. 用手术钳夹紧脐带

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。(注:4℃下最多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃)2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次,将污血冲洗干净为止。3. 用手术钳夹紧脐带下端,加入 15ml 的胶原酶(1mg

人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养

实验材料 新生儿脐带试剂、试剂盒 PBS胶原酶M199培养基胰酶EDTADMEM培养基仪器、耗材 针头手术钳离心管低温离心机弯管明胶恒温培养箱显微镜实验步骤1. 将15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的PBS 溶液中储存。(注:4℃下最多贮存24 小时,室温下不超过6 小时,否则废弃)2. 用一个

血管内皮细胞的分离和培养_分离小鼠心脏内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改写的。实验材料小鼠心脏胶原蛋白酶A无关对照抗体大鼠抗小鼠内皮糖蛋白(endoglin)(CD105)抗体山羊抗大鼠IgG微珠试剂、试剂盒MCEC生长培养液非内皮细胞培养液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDT

血管内皮细胞的分离和培养_分离人心脏内皮细胞(HCEC)

实验方法原理根据 McDouall 等 [ 1996 ] 的方法可以分离人的 CEC。实验材料Ⅱ型胶原蛋白酶试剂、试剂盒HCEC生长培养液仪器、耗材磁珠实验步骤1. 按分离小鼠心脏内皮细胞的步骤操作。2. 在步骤 7 用 Ⅱ 型胶原蛋白酶(1 mg/ml)消化组织。3. 按照方案23.28C 的步骤

分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞

实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4