正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养
实验材料:1. 实验动物:5月龄兔;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 完全培养基:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml4. 化学限定性培养液:基础培养基为DMEM培养基,添加胰岛素6.25μg/ml、转铁蛋白6.25μg/ml、亚硒酸6.25μg/ml、亚油酸5.35μg/ml、牛血清白蛋白1.25μg/ml、丙酮酸盐1mmol/L、抗坏血酸-2-磷酸盐37.5μg/ml、地塞米松10-7mol/L、TGF-eta;1 10ng/ml。另加青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml;5. 离心管:15ml聚丙烯圆锥形离心管;实验方法:1. 在注射器中预先吸入3000U肝素,然后从兔髂骨嵴或胫骨抽吸7—8ml骨髓;2. 将完全培养液加入取得的骨髓中,吹打分散细胞。计数有核细胞;3......阅读全文
正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养
实验材料:1. 实验动物:5月龄兔;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 完全培养基:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml4. 化学限定性培养液:基础培养基为DMEM
正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养
正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养 实验材料: 1.实验动物:5月龄兔; 2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2; 3.完全培养液:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100
正常人骨间充质干细胞的培养
实验材料:1. 骨髓来源:骨髓材料由健康人提供;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 分离液:密度为1.073g/ml的Percoll溶液;4. DMEM-LG培养液:含1000mg/L葡萄糖的DMEM培养液,补充1
红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞
骨髓间充质干细胞是存在于骨髓腔内具有很强增殖 能力及多向分化潜能的一类成体干细胞,在一定条件下其不仅可以分化为同源于中胚层的间质细胞,还可以诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、上皮样细胞、 心肌细胞、肝细胞等。近年来随着组织工程技术的快速发展,骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及其增殖特 性的相关研
Science:科学家发现脂肪组织中的间充质前体细胞
2019年4月26日,宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人员在Science杂志发表题为“Identification of a mesenchymal progenitor cell hierarchy in adipose tissue”的研究论文。发现在人类身上存在三种与肥胖相关的脂肪细胞
Science:科学家发现脂肪组织中的间充质前体细胞
宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人员在Science杂志发表题为“Identification of a mesenchymal progenitor cell hierarchy in adipose tissue”的研究论文。发现在人类身上存在三种与肥胖相关的脂肪细胞祖细胞(APCs)。研
间充质干细胞的三系分化及鉴定操作
近年来国内外关于干细胞的研究取得了重大的突破,而这其中最热门的研究当属间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)。MSC是一类具有自我更新和多种分化潜能的成体干细胞,来源于胚胎发育早期的中胚层未成熟的胚胎结缔组织。1968年德国科学家Frieden Stei
脐带间充质干细胞的分离培养
脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法,由于酶对细胞的损伤较大,且细胞得率较低,费用昂贵,因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。 取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华氏胶组织,将所得组织充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,
人骨髓间充质干细胞的培养
人软骨损伤后,可用软骨组织工程进行软骨缺损修复。软骨可由间充质干细胞分化而来。因而,间充质干细胞的培养和分化具有重要作用。间充质干细胞(MSC)可以2×10的5次方/cm2的密度接种于特定的培养液(低糖DMEM,含15%FBS,100u/L氨卡青霉素,100 mg/L链霉素,250 mg/L两性霉素
调节骨髓间充质干细胞的微环境因素研究进展
19世纪六七十年代,Bianco等发现骨髓中含有一种能自身繁殖的间质细胞群,简称成纤维细胞集落形成单位。研究发现,这是一类广泛存在于骨髓及间叶组织中的细胞,具有多向分化潜能,学者们将此类细胞称为间充质干细胞。MSC周围的细胞和微环境精确调节间充质干细胞的动态平衡。微环境因子失调会引起间充质干细胞
如何进行兔骨髓间充质细胞ALP活性定量检测
髓核细胞与骨髓间充质干细胞共培养,影响髓核细胞的活性,经共培养的髓核细胞增殖速度、蛋白多糖合成量较对照组提高明显,髓核细胞活性上调。 睾丸支持细胞与骨髓间充质干细胞在体外共培养的早期,睾丸支持细胞可以显著促进间充质干细胞的生长,但在后期则反而抑制间充质干细胞的生长。
TEPCM:磁性间充质干细胞有望改善机体的软骨修复
携带超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIOs,superparamagnetic iron oxide nanoparticles)的细胞能够通过外加磁场定向移动到特定位置中去,其有利于进行组织修复。图片来源:CC0 Public Domain 近日,一项刊登在国际杂志Tissue Engineer
间充质干细胞的传代培养
间充质干细胞的传代培养试剂和材料:1. 完全培养基:α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经FBS杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;2. PBSA;3. 胰
软骨内成骨的定义
是指在预先形成的软骨雏形的基础上,使软骨逐步被替换为骨。是最常见的一种骨发生形式,长骨、 短骨和部分不规则骨均通过此种形式生成。 此种成骨形式极复杂,以长骨为例,首先由透 明软骨形成一个未来骨的雏型,然后在这一 软骨雏型的中段以膜内成骨的方式形成一环 形骨领。继之,在被骨领环绕的软骨中心部 位出现一
骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌的发病影响-2
破骨细胞前体细胞的Lkb1缺陷不会诱导成骨肿瘤样表型 破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色发现,Ctsk-CKO小鼠的骨膜、骨内膜和松质骨的破骨细胞数量增加。研究人员还利用Ctsk-CKO和Ctsk-Ctrl小鼠的骨髓细胞分化为破骨细胞。TRAP活性定量显示,来自Ctsk-CKO骨髓细胞的破骨
脐带间充质干细胞的分离培养的介绍
脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法,由于酶对细胞的损伤较大,且细胞得率较低,费用昂贵,因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。 取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华氏胶组织,将所得组织充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,
骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌的发病影响
中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所和中山大学肿瘤防治中心/肿瘤医学协同创新中心等机构的研究人员利用条件性敲除的成骨肿瘤小鼠模型,鉴定出骨膜源性Ctsk-Cre细胞是成骨肿瘤的起源细胞,并提出一个治疗成骨肿瘤的有希望的新靶点——LKB1-mTORC1途径。 【背景】 成骨肿瘤(osteo
间充质干细胞(MSC)如何培养与鉴定
相比于胚胎干细胞或神经干细胞,MSC具有易获取、易体外培养、传代稳定性、低免疫原性等优势,在体外经过多次传代后仍具有多向分化和自我复制的潜能,且MSCs多来自于成年的组织,研究过程的道德和伦理学问题较小。MSC的大小与形状具有异质性,即不同种属或不同组织的MSC具有不同的生长形态,例如三极形、长梭形
”骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌的发病影响
成骨肿瘤(osteogenic tumor)是骨组织最常见的原发性肿瘤,包括良性骨形成肿瘤、骨瘤、成骨细胞瘤和恶性肿瘤(又称为成骨源性肉瘤或骨肉瘤)。骨肉瘤主要在儿童和青少年人群中高发,老年人位列第二发病率高峰。由于传统化疗生存效益不理想,因此预后较差,当前迫切需要更多针对性和个性化的治疗骨肉瘤
“少年杀手”骨肉瘤的新细胞起源以及STK11/LKB1对骨癌-影响
成骨肿瘤(osteogenic tumor)是骨组织最常见的原发性肿瘤,包括良性骨形成肿瘤、骨瘤、成骨细胞瘤和恶性肿瘤(又称为成骨源性肉瘤或骨肉瘤)。骨肉瘤主要在儿童和青少年人群中高发,老年人位列第二发病率高峰。由于传统化疗生存效益不理想,因此预后较差,当前迫切需要更多针对性和个性化的治疗骨肉瘤
间充质细胞的概念
不含纤维。间充质细胞呈星状,细胞间以突起相互连接成细胞网。细胞核大,核仁明显,细胞质弱嗜碱性。间充质细胞分化程度低,有很强的增殖分化能力。在胚胎时期分化成多种结缔组织细胞、内皮细胞、平滑肌细胞等。
间充质细胞的概念
不含纤维。间充质细胞呈星状,细胞间以突起相互连接成细胞网。细胞核大,核仁明显,细胞质弱嗜碱性。间充质细胞分化程度低,有很强的增殖分化能力。在胚胎时期分化成多种结缔组织细胞、内皮细胞、平滑肌细胞等。
间充质细胞的功能
间充质干细胞可以分化为骨、软骨、肌肉或肌腱,为临床治疗各种创伤提供细胞来源;间充质干细胞还可以分化为心肌组织,在显微镜下,能观察到心肌组织中的细胞株出现自发搏动;用间充质干细胞分化为真皮组织,可覆盖于烧伤创面。
脐带间充质干细胞的优势及分离培养
优势 脐带间充质干细胞(MSCs)具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。有报道从人脐带中分离出MSCs,且细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs,免疫原性比骨髓MSCs低[1],并且具有取材方便,无伦理学
人脐血间充质干细胞培养流程
准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 专用基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需最多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
人脐血间充质干细胞培养流程
1. 准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
培养间充质干细胞的培养基你选对了吗?
干细胞治疗也被称为再生医学,是指利用干细胞及其衍生物来促进受损、病变或功能丧失的组织进行修复。如今,许多白血病等患者已经受益于干细胞治疗。未来,骨关节炎、脑瘫、心脏衰竭、多发性硬化症、甚至是听力损失等都有望受益。干细胞治疗处在生命科学的最前沿,将会引起一场新的医学革命。“10至20年后,干细胞将会成
骨髓间充质干细胞
常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同,分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入,又有人利用
骨髓间充质干细胞
骨髓间充质干细胞(BMSC),既往称为骨髓基质成纤维细胞,是一类起源于中胚层的成体干细胞,具有自我更新及多向分化潜能,可分化为多种间质组织,如骨骼、软骨、脂肪、骨髓造血组织等。骨髓BMSC的迁移、定植、增殖与分化,需要从外界获取信息。其分化方向取决于所在的微环境。这里的”微环境”不仅包括骨髓微环境,
成骨细胞的转化生长因子作用
转化生长因子-β(TGF-β)是成骨细胞中含量较多的生长因子,成骨细胞本身可以合成TGF-β,而且在成骨细胞的细胞膜上有TGF-β的特异性受体。TGF-β可以作用于成骨细胞,调节其增殖和分化(卢卫忠等,2000)。转化生长因子-β(TGF-β)家族包括TGF-βs、骨形态蛋白2-7(BMPs2-