FITC标记抗体Chadwick氏法

FITC标记抗体-Chadwick氏法试剂:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L 、1%硫柳汞;材料:离心机及离心管、三角烧瓶(25ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)等;方法与步骤:抗体的准备。用0—4℃ pH8.0的将免疫球蛋白溶液浓度稀释为30—40mg/ml,置于三角烧瓶内,放入冰槽中;2. 荧光素的准备。按每毫克免疫球蛋白加0.01mg荧光素计算,称取所需的荧光素量,用3%重碳酸钠水溶液溶解;3. 将上述已准备好的抗体与荧光色素溶液等量混合,充分搅拌,使其在0—4℃冰箱中结合18—24h;4. 透析。荧光素与球蛋白结合完毕后,将球蛋白的溶液以2500r/min离心20min,除去其中少量的沉淀物后,装入透析袋中再置于烧杯中,在0—4℃下用pH8.0的缓冲盐溶液透析过夜;5. 过柱。取透析过夜的标记物,过葡萄糖凝胶G-25或G-50柱,分......阅读全文

FITC标记抗体Chadwick氏法

试剂:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞; 材料:离心机及离心管、三角烧瓶(25ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)等; 方法与步骤:1.       抗体的准备。用0—4℃ pH8.0的PBS

FITC标记抗体Chadwick氏法

FITC标记抗体-Chadwick氏法试剂:抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、pH8.0的0.01mol/L 、1%硫柳汞;材料:离心机及离心管、三角烧瓶(25ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)等;方法与步骤:抗体的准备。用0—4℃ pH8.

硬度计(布氏法、洛氏法和维氏法)的历史

  硬度计(布氏法、洛氏法和维氏法)的历史  1)布氏法、洛氏法和维氏法都属于压入法,都是一个“平衡-不平衡-平衡”的驰豫过程。后面的平衡其实也是不平衡,只是短暂时间内速度足够小,就认为是平衡了。  2)布氏法出现最早、洛氏法次之,维氏法出现最晚。当然,还有很多其他方法。  3) 布氏法用球体(最早

通俗解释三种硬度计(布氏法、洛氏法和维氏法)

  1)布氏法硬度适合测“软”的物质(比如正火、退火的钢铁合金),无法测“硬”的物质,“硬”的物质,由于压痕太薄,造成误差太大;洛氏法适合测 “硬”的物质(比如淬火、回火的钢铁合金),不适合“软”的物质,因为“软”的物质直接被戳穿了;维氏法则通吃一切,还能测薄层和表面硬度。  2) 三种方法的测量原

VP实验——Barritt氏法

VP实验可应用于: (1)鉴别产气肠杆菌和大肠埃希菌,(2)表征其他细菌群,包括放线菌。实验方法原理某些菌属能使丙酮酸脱羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,通过 KOH 和空气的作用,使乙酰甲基甲醇(3-羟基丙酮)转变成双乙酰,双乙酰在α-奈酚和肌酸的催化下,生成红色化合物,为 VP 试验阳性。实验材料大肠

卡氏水分仪(容量法/库仑法)

该系列水分仪开创了水分测定地新纪元!它极好地平衡了“快速”和“准确”这对矛盾体,让“鱼”与“熊掌”从此可以兼得!该系列滴定仪测量范围广(固体、液体、气体适用)且测量迅速、准确,同时兼备“学习滴定”功能让初学者能迅速学会操作。DL31/DL38容量仪可使用乙醇基的卡氏试剂,完全符合环保要求。DL38容

FITC标记抗体Marsshall氏法

材料:抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25—50ml)、冰及冰槽(或1000ml烧杯)、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)、pH7.2或8.0的0.01mol/L PBS等; 方法

FITC标记抗体Marsshall氏法

材料:抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25—50ml)、冰及冰槽(或1000ml烧杯)、电磁搅拌器、灭菌吸管、透析袋、玻璃棒、棉线及烧杯(500ml)、pH7.2或8.0的0.01mol/L 等;方法与步骤:

卡氏库仑法仪器原理

  1.1935年卡尔-费休(KarlFischer)首先提出了利用容量分析测定水分的方法,这种方法即是GB6283《化工产品中水分含量的测定》中的目测法。目测法只能测定无色液体物质的水分。后来,又发展为电量法。随着科技的发展,继而又将库仑计与容量法结合起来推出库仑法。这种方法即是GB7600《运行

荚膜染色实验——Anthony-氏法

实验方法原理荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。实

巴氏灭菌法的基本介绍

  巴氏灭菌法(pasteurization),亦称低温消毒法,是一种利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法,由法国微生物学家巴斯德发明的冷杀菌法。  常常被广义地用于定义需要杀死各种病原菌的热处理方法。  采用较低温度(一般在零上60~82℃),在规定的时间内,对食品进行

索氏提取器法操作要点

索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经

脑脊液蛋白定性试验(潘氏法)

1.  实验原理 脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。 2. 标本采集: 2.1 标本种类:脑脊液,由临床医师进行腰椎穿刺采集,必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。 2.2 标本要求:将脑脊液分别收集于3个无菌试管中,第一管作细菌培养,第二管

纳氏试剂光度法仪器

仪器  ①分光光度计  ②pH计

氨氮纳氏试剂光度法

  概述  1.方法原理  碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物,此颜色在较宽的波长范围内具强烈吸收。通常测量用波长在410—425nm范围。  2.干扰及消除  脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物,以及铁、锰、镁、硫等无机离子,因产生异色或浑浊而引起干扰,水

巴氏杀菌法的发现历史介绍

  法国的啤酒业在欧洲是很有名的,但啤酒常常会变酸,整桶的芳香可口啤酒,变成了酸得让人咧嘴的粘液,只得倒掉,这使酒商叫苦不迭,有的甚至因此而破产。1865年,里尔一家酿酒厂厂主请求巴斯德帮助治治啤酒的病,看看能否加进一种化学药品来阻止啤酒变酸。  巴斯德答应研究这个问题,他在显微镜下观察,发现未变质

巴氏杀菌法的主要原理介绍

  在一定温度范围内,温度越低,细菌繁殖越慢;温度越高,繁殖越快。但温度太高,细菌就会死亡。不同的细菌有不同的最适生长温度和耐热、耐冷能力。巴氏消毒其实就是利用病原体不是很耐热的特点,用适当的温度和保温时间处理,将其全部杀灭。但经巴氏消毒后,仍保留了小部分无害或有益、较耐热的细菌或细菌芽孢,因此巴氏

毕氏酵母氯化锂转化法

试剂1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕

库仑法卡氏水分仪电极维护

  1.指示电极的维护保养  卡氏水分测定用指示电极属于单体铂棒电极或者是单体铂环电极。  新电极的使用注意事项:新的指示电极需要一个磨合时间形成新的电极表面。这段时间滴定会长,从而导致测定结果偏高。使用很短时间后,该现象就会消失。为了缩短新指示电极的磨合时间,库仑仪可以运行过夜。  电极放置:在平

卡氏库仑法仪器的应用范围

  卡氏库仑法仪器可适用多种有机和无机物中的水分测定,但由于各种化合物性质存在的差异,只有在卡氏试剂中无副反应无干扰的情况下,卡氏库仑法测定才是一种专属性的方法。原则是(1)副反应不能有水生成。(2)样品也不能消耗碘或释放碘。主要具有副反应和干扰的物质有如下八类。  1.盐、氢氧化物和氧化物。例如:

克氏定氮法原理和方法

天然含氮有机化合物(如蛋白质)与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨。用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中,然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量。

克氏定氮法的测定原理

因为蛋白质含氮量通常在16%左右,所以将克氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25,便得到该样品的蛋白质含量。

克氏定氮法的反应过程

整个反应过程可分为消化、蒸馏及滴定三大步骤。样品与浓硫酸共热时,分解出氮、二氧化碳和水,氮转变出的氨,进一步与硫酸作用生成硫酸铵,此过程通常称之为“消化”。但是,这个反应进行得比较缓慢,通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点,并加入硫酸铜作为催化剂,以加快反应速度。以甘氨酸为例,其消化过程可表

水分测定法(费休氏法)

中华人民共和国药典2015年版四部0800 限量检查法0832 水分测定法第一法(费休氏法)1. 容量滴定法本法是根据碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中与水定量反应的原理来测定水分。所用仪器应干燥,并能避免空气中水分的侵入;测定应在干燥处进行。费休氏试液的制备与标定(1)制备  称取碘(置硫酸干燥器内4

巴氏灭菌法的主要原理介绍

  巴氏杀菌是将混合原料加热至68~70℃,并保持此温度30min以后急速冷却到4-5℃。因为一般细菌的致死点均为温度68℃与时间30min以下,所以将混合原料经此法处理后,可杀灭其中的致病性细菌和绝大多数非致病性细菌;混合原料加热后突然冷却,急剧的热与冷变化也可以促使细菌的死亡。  在一定温度范围

卡氏水份测定仪容量法与库仑法的区别

问:卡氏水份测定仪,容量法与库仑法的区别有哪些?答:二者的基本原理都是一样的,在合适的弱碱如吡啶存在时,I2将SO2氧化为硫酸同时定量的消耗2个水,基本反应为:I2+SO2+2H2O=H2SO4+2HI,因此可以用I2来测定水的含量。容量法和库仑法的最大区别在于I2的来源不同,容量法中的I2来自于滴

克氏定氮法的应用和原理

  克氏定氮法 :天然含氮有机化合物(如蛋白质)与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。在克氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解出氨。用水蒸气蒸馏法将氨蒸入硼酸溶液中,然后再用标准稀硫酸酸溶液进行滴定,滴定所用稀硫酸酸的量(mol)相当于被测样品中氨的量(mol),根据所测得的氨量即可

纳氏试剂光度法干扰及消除

干扰及消除  脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、淳类和有机氯胺类等有机化合物,以及铁、锰、镁和硫等无机离子,因产生异色或浑浊而引起干扰,水中颜色和浑浊亦影响比色。为此,须经絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理,易挥发性干扰物质,还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰,可加入适量的掩蔽剂加以消除。

纳氏试剂光度法干扰及消除

干扰及消除  脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、淳类和有机氯胺类等有机化合物,以及铁、锰、镁和硫等无机离子,因产生异色或浑浊而引起干扰,水中颜色和浑浊亦影响比色。为此,须经絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理,易挥发性干扰物质,还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰,可加入适量的掩蔽剂加以消除。

纳氏试剂光度法干扰及消除

干扰及消除  脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、淳类和有机氯胺类等有机化合物,以及铁、锰、镁和硫等无机离子,因产生异色或浑浊而引起干扰,水中颜色和浑浊亦影响比色。为此,须经絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理,易挥发性干扰物质,还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰,可加入适量的掩蔽剂加以消除。