CHO细胞表达体系及其特点
子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中，最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary，CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就 CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。CHO细胞表达体系及其特点诞生于70年代末的基因工程药物因其具有其他药物无法比拟的优点，已迅速成为制药工业中一个引人瞩目的领域。1995年美国基因工程药物销售额约为 48亿美元，1997年超过60亿美元，年增长率达20％以上。各国政府将其视为新的经济增长热点而给予了大力支持。基因工程药物研究与开发的主要环节包括：①基因的克隆和基因工程菌的构造；②重组细胞的培养；③目的产物的分离纯化等。针对这些主要环节，研究人员正致力于高效表达、培养工艺及下游分离纯化等方面的研究。随着基因工程技术的不断发展，目前已有多种表达系统可用于生产具有医疗价值的人......阅读全文
单细胞基因表达谱揭示小脑细胞分化机制
尽管小脑（Cerebellum）体积仅为全脑的十分之一左右, 但其神经元数量大约占全脑的一半以上。近来研究表明，小脑不仅对运动的调节和维持有着重要作用，而且影响情绪、认知等高级功能。小脑发育异常和功能障碍与许多神经和精神疾病有关，例如共济失调，震颤，自闭症障碍和精神分裂症等。了解疾病相关基因在小
乙肝基因工程(CHO)疫苗的注意事项
(1)安瓿破裂、疫苗变质或有摇不散的块状物，不得使用。 (2)疫苗注射前要充分摇匀。 (3)接种疫苗时认明10ug/支及20μg/支两种规格。 乙肝基因工程疫苗应于2-8℃条件下贮运，严防冻结，疫苗有效期为2年。
乙肝基因工程(CHO)疫苗的免疫效果介绍
乙肝基因工程疫苗自1992年获得生产文号投入大量生产以来，免疫接种后安全可靠。血清学效果优于血源乙肝疫苗。两种疫苗可以互相使用。对以前曾经用过血源疫苗未完成全程免疫的儿童，再用乙肝基因工程疫苗补充全程或加强免疫，同样可以获得满意效果。
乙肝基因工程(CHO)疫苗的接种对象介绍
本疫苗系用基因工程技术将乙型肝炎表面抗原基因片段重组到中国仓鼠卵巢细胞(CHO)内，通过对细胞培养增殖，增殖分泌乙肝表面抗原(HBsAg)于培养液中，经纯化加佐剂氢氧化铝后制成，疫苗外观有轻微乳白色沉淀。 接种对象 (1)乙肝易感者(表面抗原阴性，转氨酶正常)。 (2)用于阻断母婴传播。给
简述乙肝基因工程(CHO)疫苗的副作用
自1979年乙肝疫苗问世以来，经过20多年大规模的使用和观察，目前还没有接种乙肝疫苗后有严重副作用的病例。只有少数人接种后会产生接种部位红肿、疼痛、发痒、手臂酸重等症状，或者是产生低热、乏力、恶心、食欲不振等与一般疫苗相似的轻微反应，这些症状即使不做任何处理，一般在3天以内也会自动消失 [1]
外无细胞体系翻译病毒－mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶 肌酸磷酸激酶 核酸酶
外无细胞体系翻译病毒－mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 细胞 TgSVA 细胞 Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞 NS20Y 细胞 人肝癌来源的 HepG2 细胞试剂、试剂盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等渗
小鼠细胞－PCR反应体系与反应条件
小鼠细胞 PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u M
小鼠细胞－PCR反应体系与反应条件
小鼠细胞 PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u M
细胞共培养体系的培养方法介绍
细胞共培养就是两种不同的细胞共同培养。细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立：① 直接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中，不同种类的细胞之间直接接触；② 间接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置
蛋白表达整体解决方案
重组蛋白是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统：原核表达系统：常用的大肠杆菌蛋白表达；真核表达系统如酵母；哺乳动物细胞蛋白表达（常用的细胞CHO，HEK293）及昆虫细胞
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
下面的方案是从蜕皮激素诱导的哺乳动物表达系统（Invitrogen 公司）附带的方案修改而来。Stratagene 公司也出售相似的系统。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料带有荧光素酶报道基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒带有感兴趣的基因并
神经细胞粘附分子的表达
NCAM不仅在神经系统中表达，在肌肉、上皮等组织中亦可有表达，但其在不同的组织、不同的时期表达是不同的。
T细胞受什么刺激开始TCR基因表达
t细胞激需要自b细胞信号b细胞已通高频突变优化bcr与抗原亲性所认t细胞没必要再重复程
国外研究发现细胞基因表达新机制
捷克马萨里克大学中欧技术研究所的科研团队发现了一种新的细胞分化基因表达机制。该研究项目名为“植物减数分裂的调控及其操作技术的发展”，相关成果发表在《科学》上。 该团队开发了一种独特的方法，使用特殊显微镜实时连续成像观察植物细胞减数分裂，并掌握原生质体技术，成为目前全球仅有的两个可实时观察植物减
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血 试剂、试剂盒 溶血剂 多聚甲
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
实验材料 带有荧光素酶报道基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒 带有感兴趣的基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒 pVgRXR 培养的哺乳动物细胞
加速干细胞疗法的基因表达分析技术
最近，美国国立卫生研究院（NIH）的研究人员开发出一种技术，将加快干细胞衍生组织的生产。 这种方法可同时测量多个基因的表达，使科学家们能够根据细胞的功能和发育阶段，快速地描述细胞。该技术将帮助研究人员使用患者的皮肤，再生视网膜色素上皮细胞（RPE，眼睛后面的一种组织，在几种致盲眼疾中受影响）。
Nature突破守则：干细胞基因表达新规则
十年前，基因的表达看上去是那么的简单：基因被开启或被关闭，不能同时开启又关闭。之后时间到了2006年，一个重磅级的发现指出，在小鼠胚胎干细胞中的发育调控基因可以即激活基因，又抑制基因，这样的基因被称为“二价标记基因(bivalently marked genes)”，在发育和分化过程中可以有
概述胞质杂种和重建细胞的基因表达
为了更直接地研究核、质相互作用对细胞核基因表达变化的作用，运用了“细胞质杂交”（cybridization）和细胞重建（细胞核移植）技术。胞质杂种是由一个无核细胞或去核细胞与一个完整细胞融合而成的，开始时这个混合细胞质内只含有一个细胞核。细胞核的遗传标记（如抗溴脱氧尿苷）和线粒体标记（如抗氯霉素
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
实验材料 带有荧光素酶报道基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒带有感兴趣的基因并受蜕皮激素诱导表达的质粒pVgRXR培养的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 新霉素松甾酮 AZeocin培养液实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。新霉素松甾酮 A蜕皮激素的另一种类似物是 muristerone A(Sig
质粒转染细胞之后多久测外源性mrna表达
不整合入基因组中，可以整合到细胞基因组上进行表达，比如腺病毒类的表达载体；有些质粒上有整合的序列。一般的表达质粒上后面有自带的polyA序列，所以产生的mRNA是带polyA尾巴的质粒转染细胞后是整合到基因组中还是游离存在这要看你用的是哪一种质粒载体，有些质粒就在细胞中进行表达
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血 试剂、试剂盒 溶血剂 多聚甲
G418筛选稳定表达细胞系
1.G418的配制：取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中，加蒸馏水至10ml，过滤消毒，4度保存。2.细胞培养：取待测培养细胞，制备成细胞悬液，按等量接种入多孔培养板中，培养6小时左右开始加药。3.制备筛选培养基：在100ug/ml~1000ug/ml范围内确定几个梯度，比如先做个100
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗HLA-B27 单抗全血试剂、试剂盒 溶血剂多聚甲醛仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1. 取荧光素 PE 标记的 CD3 单抗及 FlTC 标记的 HLA-B27 单抗 30 μl、EDTAK3 抗凝的全血 50 μl，混匀后室温染色 15 min ( 或 20 min)。2.
亚细胞定位的GFP融合蛋白表达法
GFP是绿色荧光蛋白，在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光，从而可以精确地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白（GFP）是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。通过基因工程技术，绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组，在后代中持续表达，并且能根
细胞系，可以做什么呢？
细胞系，可以做什么呢？ 做实验的时候，如果想说清楚靶分子的重要性，常规操作就是在表达量低的细胞系中过表达基因，在表达量高的细胞系中敲减靶分子，如果观察到相反的现象，那么事情就讲清楚了。 那现在问题有两个： 第一。极大的可能，收集不全要研究的细胞系 第二，如果大家做过qRT-PC
简述乙肝基因工程(CHO)疫苗的使用方法
(1)一般易感者使用10ug/支，免疫程序为0、1、6。每次注射1支，1个月及6个月时注射第2，3针。 (2)全程注射3次。新生儿使用20μg/支，第1针在出生后24小时内注射，其余两针与一般易感者相同。 (3)高危人群，如血液透析病人及职业性与乙肝患者密切接触者，亦可用20ug/支
筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选
稳定细胞株筛选是一个长期的过程，稳定细胞株筛选优化，有许多条件需要摸索，而且是从源头开始①在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证②高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白
做免疫荧光如何看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达
复染细胞核，常规用过的是DAPI进行细胞核复染（蓝色）。目的是为了鉴别目的蛋白的位置是胞核表达，还是胞质表达或胞膜表达。一般来讲，如果是胞核表达，会和蓝色的细胞核颜色重叠；胞质或胞膜表达则不会重合，单独看目的蛋白的表达，会看到有个黑色的空洞的，尤其细胞图像更为明显。从楼主的图片看，貌似是在胞核表达（