DNA双链断裂检测——变压场凝胶电泳(GFGE)

DNA双链断裂与细胞死亡的关系更为密切。变压场凝胶电泳是采用将细胞包埋在低熔点琼脂糖凝胶中,通过蛋白酶、去污剂等渗入凝胶中融解细胞、去蛋白,纯化细胞DNA,再通过梯增电压进行琼脂糖凝胶电泳,结合DNA解旋荧光测定(FADU)法和检测DNA双链断裂。 1、主要试剂及配制方法: (1)蛋白酶K,SDS,低熔点琼脂糖。 (2)配制方法: 细胞缓冲液(A液)。0.25mol/L NaCl + 10mmol Na2HPO4 + 1mmol/L MgCl2,pH7.2. 细胞裂解液(B液)。9mol/L脲 + 10mmol/L NaOH + 2.5mmol/L环烷二胺四乙酸 + 0.1%SDS。 碱性变性液I(C液)。B液 + 0.2mol/NaOH,体积比为45:55. 碱性变性液I(D液)。B液 + 0.2mol/NaOH,体积比为40:60. 抗变性液(F液)。1ug/L溴化乙锭 + 13.3mmol/......阅读全文

双链DNA结合域的结构和作用

双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。 双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA序列,和一个转录激活域,这个转录激活域与基础转录机制相作用。

切口平移法双链DNA探针标记法

 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'

简述抗双链DNA抗体的检测方法

  1、间接免疫荧光法(IIF):以绿蝇短膜虫虫体为包被基质,其上只含有一个单纯的、完整的dsDNA分子,不含有任何其他物质,特异性好;由于只结合血清中的高亲和力抗体,故灵敏度有一定限制。  2、免疫印迹法(LIA):综合了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳高分辨率和酶免疫吸附技术的高特异度,广泛用于

小鼠双链DNA(dsDNA)ELISA试剂盒

小鼠双链DNA(dsDNA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 dsDNA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 dsDNA与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠dsDNA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶

SUMO化修饰通过调控相分离影响DNA修复和肿瘤耐药的机制

  DNA作为遗传信息的主要载体,其结构的完整与功能的完善对于维持基因组的稳定性和保障生命体正常生理活动具有重要意义。不同类型的DNA损伤修复对于维持基因组稳定性至关重要,针对最严重的DNA双链断裂损伤(DSB),细胞主要通过非同源末端连接(NHEJ)与同源末端重组(HR)进行修复。  泛素E3连接

关于博来霉素的基本信息介绍

  博来霉素(Bleomycin)与铁的复合物嵌入DNA,引起DNA单链和双链断裂。不引起RNA链断裂。作用的第一步是本品的二噻唑环嵌入DNA的G-C碱基对之间,同时末端三肽氨基酸的正电荷和DNA磷酸基作用,使其解链。作用的第二步是本品与铁的复合物导致超氧或羟自由基的生成,引起DNA链断裂。口服无效

DNA修复技术碱基的直接插入过程介绍

DNA单链断裂是常见的损伤,其中一部分可仅由DNA连接酶(ligase)参与而完全修复。此酶在各类生物各种细胞中都普遍存在,修复反应容易进行。但双链断裂缺几乎不能修复。

DNA损伤修复信号通路相关因子NBN

该基因突变与nijmegen破碎综合征(一种以小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和癌症易感性为特征的常染色体隐性染色体不稳定综合征)有关。编码蛋白是由5种蛋白质组成的MRE11/RAD50双链断裂修复复合物的成员。这种基因产物被认为与DNA双链断裂修复和DNA损伤诱导的检查点激活有关。Mutations

实体肿瘤检测NBN基因介绍

该基因突变与nijmegen破碎综合征(一种以小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和癌症易感性为特征的常染色体隐性染色体不稳定综合征)有关。编码蛋白是由5种蛋白质组成的MRE11/RAD50双链断裂修复复合物的成员。这种基因产物被认为与DNA双链断裂修复和DNA损伤诱导的检查点激活有关。Mutations

细胞周期信号通路相关NBN

该基因突变与nijmegen破碎综合征(一种以小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和癌症易感性为特征的常染色体隐性染色体不稳定综合征)有关。编码蛋白是由5种蛋白质组成的MRE11/RAD50双链断裂修复复合物的成员。这种基因产物被认为与DNA双链断裂修复和DNA损伤诱导的检查点激活有关。Mutations

DNA损伤修复信号通路相关因子NBN

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与细胞周期信号通路相关因子介绍NBN

该基因突变与nijmegen破碎综合征(一种以小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和癌症易感性为特征的常染色体隐性染色体不稳定综合征)有关。编码蛋白是由5种蛋白质组成的MRE11/RAD50双链断裂修复复合物的成员。这种基因产物被认为与DNA双链断裂修复和DNA损伤诱导的检查点激活有关。Mutations

NBN基因突变与药物因子介绍

该基因突变与nijmegen破碎综合征(一种以小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和癌症易感性为特征的常染色体隐性染色体不稳定综合征)有关。编码蛋白是由5种蛋白质组成的MRE11/RAD50双链断裂修复复合物的成员。这种基因产物被认为与DNA双链断裂修复和DNA损伤诱导的检查点激活有关。Mutations

NBN基因编码功能及结构描述

该基因突变与nijmegen破碎综合征(一种以小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和癌症易感性为特征的常染色体隐性染色体不稳定综合征)有关。编码蛋白是由5种蛋白质组成的MRE11/RAD50双链断裂修复复合物的成员。这种基因产物被认为与DNA双链断裂修复和DNA损伤诱导的检查点激活有关。Mutations

TP53BP1基因编码的功能和结构描述

该基因编码一种蛋白质,在dna双链断裂修复途径选择、促进非同源末端连接(nhej)途径和限制同源重组中发挥作用。该蛋白在dna损伤反应中发挥多种作用,包括促进dna损伤后的检查点信号传导,作为dna损伤反应蛋白向受损染色质募集的支架,以及通过限制双链断裂后的末端切除促进nhej途径。这些作用在v(d

Nature:-在非分裂期细胞中实现基因打靶的可能

  基因打靶技术,是利用同源重组的方法,建立基因定点敲除细胞系或获得基因定点敲除动物。无论CRISPR/Cas还是TALEN,都是通过造成靶位点的双链断裂,诱导靶基因产生突变。而通过同源重组实现的DNA修复在G1期的细胞中是高度抑制的,以确保有丝分裂只发生在姐妹染色单体之间。因而只也是在DNA复制之

超强DNA修复让弓头鲸远离癌症

据英国《新科学家》杂志网站22日报道,弓头鲸是世界上寿命最长的哺乳动物,很少受癌症的影响。美国科学家在一项新研究中发现,弓头鲸的细胞似乎能比人类或小鼠的细胞更快速有效地修复DNA,这或许可解释为什么它们能活到200岁以上,且癌症发病率较低。在最新研究中,罗切斯特大学科学家研究了不同动物的皮肤细胞如何

TP53BP1基因突变因子与药物介绍

该基因编码一种蛋白质,在dna双链断裂修复途径选择、促进非同源末端连接(nhej)途径和限制同源重组中发挥作用。该蛋白在dna损伤反应中发挥多种作用,包括促进dna损伤后的检查点信号传导,作为dna损伤反应蛋白向受损染色质募集的支架,以及通过限制双链断裂后的末端切除促进nhej途径。这些作用在v(d

抗双链DNA抗体(aniDNA)的注意事项及检过程

  注意事项  检查时要求:一般认为抗双链DNA的效价与病情相平行,即病情活动时,抗DNA抗体效价升高,病情缓解时,效价降低。由于各地测定的方法不同,所以正常值也不同,一般来说,结合率要大于20%以上才有临床意义。  检测技术的特异性都不是100%的。例如,绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA,但可能

MUS81基因的结构特点和主要作用

该基因编码一种结构特异性核酸内切酶,属于xpf/mus81核酸内切酶家族,在dna链间交联、复制叉折叠和dna双链断裂后修复过程中对重组中间产物的分解起着关键作用。编码的蛋白质与两个密切相关的必需的减数分裂内切酶蛋白(eme1或eme2)中的一个结合,形成一个处理dna二级结构的复合物。它包含一个N

新一代高性能基因编码的钙离子探针jGCaMP7系列

  CRISPR被称为“生物科学范畴的游戏规则改动者”,现已开展成为该范畴最炙手可热的研讨工具之一。不过,传统的CRISPR-Cas基因组编辑系统,要应用一个导游RNA将细菌蛋白质靶向定位到需求改动的特定基因组位点。6月12日,英国《自然》杂志在线发表的论文称,美国科学家团队开发出一种完整可编辑的C

核糖体蛋白RPL6以PARP依赖的方式参与DNA损伤修复的调控

  研究发现核糖体蛋白RPL6在核糖体作为翻译机器以外的新功能,证明它依赖于ADP核糖基化聚合酶PARP,通过与组蛋白H2A相互作用来调控DNA损伤应答(DDR)的分子机制。   细胞通过DNA损伤应答感应并修复受损的DNA,进而维持基因组稳定性。在DNA双链断裂引起的DDR中,组蛋白H2A及其变体

细胞周期信号通路相关RAD50

该基因编码的蛋白质与酿酒酵母RAD50非常相似,后者是一种参与DNA双链断裂修复的蛋白质。这种蛋白与MRE11和NBS1形成复合物。这种蛋白复合物与DNA结合,并表现出DNA末端非同源连接所需的许多酶活性。这种蛋白与它的伙伴合作,对DNA双链断裂修复、细胞周期检查点激活、端粒维持和减数分裂重组很重要

PAD50基因编码的功能和结构描述

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与细胞周期信号通路相关因子介绍RAD50

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实体肿瘤检测RAD50基因介绍

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RAD50正相关基因编码功能描述

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RAD50基因突变因子与药物介绍

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RAD50基因编码的功能和结构描述

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DNA损伤修复信号通路相关因子RAD50

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