免疫细胞化学SP法与SABC法的区别

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。免疫组织化学的方法有多种,其实都大同小异,不同点只是在于显色基团!SP法1)脱蜡、水化;2)PBS洗2~3次各5分钟;3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟;4)PBS洗2~3次各5分钟;5)抗原修复;6)PBS洗2~3次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗50μl,室温静置1小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS洗3次各5分钟;11)滴加Ⅱ抗40~50μl,室温静置,或37℃1小时;12)II抗中可加入0.05%的tween-20。13)PBS洗3次各5分钟;14)DAB显色5~10分钟,在显微镜下掌握染色程度;15)PBS或自来水冲洗10分钟;16)苏木精复染......阅读全文

免疫细胞化学SP法与SABC法的区别

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。免疫组织化学的方法有多种,其实都大同小异,不同点只是在于显色基团!SP法1)脱蜡、水化;2)PBS洗2~3次各5分钟;3)3%H2O2(80%

免疫组化染色方法(SP法和SABC法)

SP法1)脱蜡、水化;2)PBS洗2~3次各5分钟;3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟;4)PBS洗2~3次各5分钟; 5)抗原修复;6)PBS洗2~3次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗50μl,室温静置1小时或者4℃过夜或者

免疫组化SABC法与SV法

实验概要本文介绍了免疫组化SABC法与SV法。实验原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中,分子量67000。是一种碱性蛋白质,具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和

免疫组化SABC法与SV法

实验概要本文介绍了免疫组化SABC法与SV法。实验原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中,分子量67000。是一种碱性蛋白质,具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和

免疫组化SABC法操作流程

1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 ℃温箱中,将多聚赖

免疫组化SABC法操作流程

 1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 oC温箱中,将多

免疫组化SABC法操作流程

1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 oC温箱中,将多聚赖氨

免疫组化SP法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

免疫组化SP法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法.按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

免疫组化(SP法)操作步骤

免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ul

免疫组化SP(streptavidinperosidase)法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验

利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞实验方法原理实验材料2〜4代的间质细胞                                                          试剂、试剂盒HBSS 2FB          

用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验

实验方法原理 实验材料 2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒 HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶(PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋白酶 溶于CMF-SalineG仪器

用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验

利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞 用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞             实验方法原理

用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验1

利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶(PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋

用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验2

实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒PBSA BSA:PBSA+0.5%BSAPBSA 2FB:含2%FBS的PBSA封闭缓冲液抗体:MAB4155F克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗体-FITC仪器、耗材具有488 nm氩激光器和525 20带通滤波器的高速细胞分选仪实验步骤(a)胰蛋白酶

免疫层析法与化学发光法哪个贵

化学发光法更胜一筹,化学发光法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。免疫层析法具有快速、便携、操作简单等优势,但由于其在应用时缺乏完善的质量管理体系

免疫组化方法的SP三步法步骤

  1)石蜡切片,常规脱蜡至水。  2)0.3%或3%H2O2去离子水(无色液体)孵育10-30分钟,以灭活内源性过氧化物酶活性。  3)蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟  4)候选步骤:采用抗原修复:微波(建议30分钟内4次中火)、高压、酶修复方法。自然冷却,再用3分钟×3次.  5)血清封闭:室温1

石蜡切片免疫组化实验

即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于:(1)确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究;(2)诊断异常细胞,指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后,加入

酶联免疫法与化学发光法的区别

酶联免疫法它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。化学发光法是物质在化学反应过程中,其物质分子吸收化学能产生光的辐射现象,今天的文章中,上海劲马实验将为您区分: 酶联免疫法与化学发光法的区别1.一个生物的方法,一个化学方法!生物方法的特异性强点,干扰因素少点,结果准确点。2.化学发光与

化学发光法和酶联免疫法的区别

化学发光法由于灵敏度高,分析方法简单快捷,检测时间短及诊断范围宽等优势被公认为未来将取代放免和酶联免疫检测方法的最佳方案雅培发光法主要是依据标本中抗体,抗原浓度与化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系发光强度的检测,直接确定抗体,抗原含量。酶联免疫法是分代的,第四代酶联免疫法是

化学发光法和酶联免疫法的区别

1、原理上的区别化学发光法依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量。酶联免疫法原理是在测定时把受检标本和酶标抗原或抗体与固相载体表面的抗原或抗体起反应加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标

化学发光法和酶联免疫法的区别

1、原理上的区别化学发光法依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量。酶联免疫法原理是在测定时把受检标本和酶标抗原或抗体与固相载体表面的抗原或抗体起反应加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标

化学发光法和酶联免疫法的区别

化学发光法由于灵敏度高,分析方法简单快捷,检测时间短及诊断范围宽等优势被公认为未来将取代放免和酶联免疫检测方法的最佳方案雅培发光法主要是依据标本中抗体,抗原浓度与化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系发光强度的检测,直接确定抗体,抗原含量。酶联免疫法是分代的,第四代酶联免疫法是

化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较

      材料和方法       一、标本 随机抽取60例临床送检血清标本。       二、仪器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ计数仪,中国原子能科学研究所的AFP试剂盒。化学发光免疫法使用美国Chiron公司的ACS180全自动化学发光仪和配套试剂盒。其测定原理为以吖啶酯作

化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较

  临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法,而近年发展起来的化学发光免疫法因其快速、精确、重现性好及试剂安全无毒的特点,显示出很好的应用前景[1]。为进一步了解化学发光免疫法的特点,本文报告用放射免疫法和化学发光免疫法对比检测60例临床血清标本中AFP的含量,并对结果进行统计分析和比较。      

石蜡切片免疫组化实验

即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(SABC)法            

化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的比较

 摘要 本文采用放射免疫法和化学发光免疫法平行测定60例临床送检血清标本的甲胎蛋白(AFP)含量,结果表明两法的相关性良好(r=0.995),但化学发光免疫法的精密度和准确性均优于放射免疫法。   关键词 化学发光免疫法  放射免疫法  甲胎蛋白  临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法,而近年发展

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含