药物诱导细胞凋亡时Bcl2蛋白含量的变化
【原理】Western印迹法,把聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的组分从凝胶转移至一种固定支持体,以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。对于蛋白质来说,通常使用的探针是抗体,它与附着于支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。【试剂与器材】1.细胞裂解液:50mmol/LTris-HCl,150mmol/LNacl,5mmol/LEDTA,1%NP40,0.05%PMSF,2μg/mLAprotinin,0.5μg/mLLeupeptin,pH8.02.2×上样buffer:100mmol/LTris-HCl,pH6.8,200mmol/LDTT,4%SDS,0.2%溴酚蓝,20%甘油3.分离胶:水,30%丙烯酰胺溶液,1.5mol/LTris(pH8.8),10%SDS,10%过硫酸铵,TEMED4.浓缩胶:水,30%丙烯酰胺溶液,1.0mol/LTris(pH8.8),10%SDS,10%过硫酸铵,TEMED5.1×电泳......阅读全文
早期凋亡细胞和.晚期凋亡细胞的区别
细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。
早期凋亡细胞和.晚期凋亡细胞的区别
细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。
早期凋亡细胞和.晚期凋亡细胞的区别
细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。
早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞的区别
细胞凋亡:细胞的编程性死亡,由基因控制的。是由于细胞内部程序激活而发生的自杀性死亡。涉及一系列基因的激活、表达、调控,在非病理的条件下进行。细胞衰老:随着时间的推移,细胞增殖能力和生理功能逐渐下降的变化过程。细胞在形态上发生明显变化,细胞皱缩,质膜透性和脆性提高,线粒体数量减少,染色质固缩、断裂等。
医学物理中心低温等离子体诱导细胞凋亡机理研究获进展
近期,医学物理中心辐射生物医学研究室在低温等离子体诱导细胞凋亡的相关机理研究方面取得新进展,相关研究结果以Non-thermal plasma induces mitochondria-mediated apoptotic signaling pathway via ROS generation
中国学者研究发现灵芝酸可诱导食管鳞癌细胞凋亡
作为一种传统中药,灵芝的不少药用机理还需要通过科研阐明。近期,中科院合肥物质科学研究院黄青研究员课题组在灵芝抗癌药理研究方面取得新发现,灵芝酸可以诱导食管鳞癌细胞凋亡和自噬性细胞死亡。图片来源于网络 灵芝在我国已有两千多年的药用史,灵芝酸是灵芝中具有抗肿瘤、抑制细胞增殖等作用的重要药理成分,但
肿瘤坏死因子(TNFα)对耐药肿瘤细胞凋亡的诱导作用
肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导法 实验材料 小鼠腹水型肝癌细胞亚系 试剂、试剂盒 V
肿瘤坏死因子(TNFα)对耐药肿瘤细胞凋亡的诱导作用
肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导法实验材料小鼠腹水型肝癌细胞亚系 试剂、试剂盒Vp-16
肿瘤坏死因子(TNFα)对耐药肿瘤细胞凋亡的诱导作用
实验材料小鼠腹水型肝癌细胞亚系试剂、试剂盒Vp-16甲醛石蜡戊二醛TNF-α仪器、耗材用游标卡尺注射器针头透射电镜以小鼠腹水型肝癌细胞亚系Hca/16A-F为细胞株,建立小鼠皮下种植瘤模型,用依托泊苷Vp-16治疗,诱导该肿瘤细胞耐药,一周后建立耐药模型,再用重组人肿瘤坏死因子α衍生物K2Rh-TN
细胞凋亡检测
实验概要细胞凋亡是细胞生物学研究的重要领域。检测药物或某种处理对于细胞细胞的影响时,细胞凋亡检测是一个重要检测指标。以Annexin V联合PI法为例简述细胞凋亡检测。实验原理在细胞凋亡早期,位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V(
细胞凋亡研究
前言:细胞凋亡是细胞程序性死亡中最具特征性的一种。它在生物发展,体内平衡,甚至在不同的疾病,例如:癌症,的发病机制都扮演着重要的角色。在过去的几十年里,科学家们对细胞凋亡进行了广泛的研究。细胞凋亡的过程中,细胞会有不同的形态变化。同时,细胞膜(plasma membrane),线粒体(mitocho
细胞凋亡检测
细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和
细胞凋亡概述
凋亡和坏死是两种常见细胞死亡方式,具有截然不同的特征。凋亡是细胞程序性死亡的主要表现形式,是一个主动的生理反应;坏死则是细胞对严重损伤的一种被动反应和变性过程。凋亡过程受细胞内一系列相关的分子所调控,涉及一系列复杂的生理生化反应,并伴随有典型的形态学改变,最终导致细胞的解体。凋亡细胞的许多形态学改变
细胞凋亡实验
细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时,
细胞凋亡途径
凋亡信号通路当细胞接受凋亡信号分子(Fas,TNF等)后,凋亡细胞表面信号分子受体相互聚集并与细胞内的衔接蛋白(Adaptor protein)结合,这些衔接蛋白又募集Procaspases聚集在受体部位,Procaspase相互活化并产生级联反应,使细胞凋亡。·下游Caspases活化后,作用底物
细胞癌变与细胞凋亡
只有可以分裂增殖的细胞才有细胞周期所以说细胞凋亡谈不上什么周期癌细胞的细胞周期不比正常细胞的短,但是它分裂增殖的比正常细胞快
我科学家首次证实砷剂可诱导脑胶质瘤细胞凋亡
由哈医大附属一院神经外科主任赵世光教授领衔完成的课题“砷剂对脑胶质瘤细胞影响的基因芯片研究及颅内缓释剂型的研发”,在国内首次从动物实验角度证实三氧化二砷(As2O3)能诱导脑胶质瘤细胞凋亡;同时自主研制了As2O3脂质体缓释剂,在胶质瘤切除术后直接植入手术区域,实现了脑胶质瘤术后局部缓释化疗。该
三叶青萃取物的生物活性及其诱导HeLa细胞凋亡机理研究
三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et. Gilg)是葡萄科崖爬藤属植物,具有多种功效,是颇具前景的药用植物资源。但是,有关三叶青的抗氧化、抑菌活性与诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡作用机理研究尚未有报道,因此,本文对三叶青萃取物的生物活性及其诱导HeLa细胞凋亡作用机
水生所发现p53对低氧诱导的细胞凋亡起重要保护作用
心肌梗塞或脑中卒发生时,组织缺血所形成的低氧环境,往往造成组织的严重坏死,其中低氧诱导的细胞凋亡是其主要原因。在心肌梗塞或脑中卒发生过程中,细胞凋亡因子BNIP3被低氧环境诱导表达,导致心肌细胞或脑神经细胞等大量死亡,这种损伤难以修复。阐明低氧诱导细胞凋亡的途径及其分子机制,对于发
羟自由基激活的钾离子通道参与胁迫诱导的细胞凋亡
Conflux + I&E Flux + I&M Flux = 细胞内外离子/分子同时检测完整方案羟自由基激活的K+外流参与细胞凋亡羟自由基激活的钾离子通道参与胁迫诱导的细胞凋亡 图注:活性氧诱导拟南芥根部K+外流A:1mM Cu/a处理后伸长区K+外流图;B:10mMH2O2诱导后成熟区K+外流图
细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨
细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测
实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞
基于诱导多功能干细胞iPSC来源的药物研发
山中伸弥(Shinya Yamanaka),京都大学iPS细胞研究所所长,因在“诱导多功能干细胞(induced Pluripotent Stem Cell, iPSC)”的卓越贡献,被授予2012年诺贝尔生理或医学奖[1]。 “iPSC来源于病人体细胞,有望为重大疾病的新药开发提供强有力的治疗工具
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料
什么是细胞凋亡?
细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼
简述细胞凋亡检测
细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技
细胞凋亡是什么?
细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法