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【原理】Western印迹法，把聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的组分从凝胶转移至一种固定支持体，以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。对于蛋白质来说，通常使用的探针是抗体，它与附着于支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。【试剂与器材】1.细胞裂解液：50mmol/LTris-HCl,150mmol/LNacl,5mmol/LEDTA,1%NP40，0.05%PMSF，2μg/mLAprotinin,0.5μg/mLLeupeptin，pH8.02.2×上样buffer：100mmol/LTris-HCl,pH6.8，200mmol/LDTT,4%SDS，0.2%溴酚蓝，20%甘油3.分离胶：水，30%丙烯酰胺溶液，1.5mol/LTris(pH8.8)，10%SDS，10%过硫酸铵，TEMED4.浓缩胶：水，30%丙烯酰胺溶液，1.0mol/LTris(pH8.8)，10%SDS，10%过硫酸铵，TEMED5.1×电泳......阅读全文
细胞凋亡又称程序性细胞死亡（PCD）,是细胞衰老自然死亡的主要方式之一，在机体中承担着重要的调控作用。它不仅在维持细胞群体数量的稳定、胚胎发育和免疫系统的克隆选择方面，而且在肿瘤发生、发展、抗肿瘤药物的治疗等方面具有十分重要的作用。细胞凋亡是由基因编程控制的细胞主动参与的自杀过程没事一种生理性调节机
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis-induced ligand，TRAIL）是肿瘤坏死因子家族中的一员，能够诱导大多数人类肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞没有明显的细胞毒性。因此，TRAIL被认为是一种很有希望有效的抗肿瘤药物
细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。 第一种 细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。
细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death，PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时，
提 纲 一、化疗药物的发展 二、肿瘤的药物治疗 三、抗肿瘤药物筛选及评价 四、体外抗肿瘤活性试验 五、体内抗肿瘤活性试验 一、化疗药物的发展 • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。 • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等，
提 纲 一、化疗药物的发展 二、肿瘤的药物治疗 三、抗肿瘤药物筛选及评价 四、体外抗肿瘤活性试验 五、体内抗肿瘤活性试验 一、化疗药物的发展 • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。 • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等，
Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析：细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞
一、实验目的： 1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事
【关键词】 肝细胞 肝细胞凋亡的病理学特征为肝细胞的嗜酸性变，又称嗜酸性坏死。表现为个别肝细胞胞浆的嗜伊红性增强，胞核固缩直至消失，形成嗜酸小体（eosinophilic body），脱离肝细胞索坠入肝窦或窦间隙。周围可出现CTL、枯否细胞，将凋亡小体
摘要 Bcl-2基因是一原癌基因，能抑制细胞凋亡。但近年研究发现，存在有Bcl-2敏感和不敏感的细胞凋亡现象。Bcl-2抑制细胞调亡的机制目前仍然不清，大多认为与Bcl-2的细胞内抗氧化作用及抑制钙离子的跨膜运动有关。最近，Reed提出Bcl-2具有离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白的双重特性，并阐述
芬戈莫德（fingolimod，FTY720）作为一种新型免疫抑制剂，是其前体药物鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine-1-phosphate，S1P）的受体激动剂，是第1个批准口服治疗复发缓解型多发性硬化（relapsing-remitting multiple sclerosis，RRM
一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序
摘要 Bcl-2基因是一原癌基因，能抑制细胞凋亡。但近年研究发现，存在有Bcl-2敏感和不敏感的细胞凋亡现象。Bcl-2抑制细胞调亡的机制目前仍然不清，大多认为与Bcl-2的细胞内抗氧化作用及抑制钙离子的跨膜运动有关。最近，Reed提出Bcl-2具有离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白的双重特性，并阐述
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病，
对癌症患者施用的化学疗法会产生各种不良副作用，例如组织损伤、免疫力下降和体重减轻。降低这些副作用可以改善患者的生活质量，并且可能提高治疗成功率。 随着对化疗毒性深入了解，科学家最新聚焦 gasdermin，它是一种通常见于上皮细胞、造血细胞和许多其他具有免疫防御功能的组织中的蛋白质家族。已
3 胆汁淤滞性肝病在许多临床综合征中可以观察到胆汁淤滞，胆汁淤滞是一组慢性进行肝病的主要特征，并可最终导致肝硬化、肝衰竭和死亡。肝内疏水的毒性胆盐储滞长期以来被认为是肝损伤的一个主要原因，并被认为是胆汁淤滞性肝病肝损伤的一个关键原因。事实上肝内毒性胆盐：鹅脱氧胆酸和脱氧胆酸盐的储滞水平与肝损伤的程度
在2014年2月28日的Nature属下权威医学生命科学期刊《Cell Death and Disease》上在线发表的一项研究中，汕头大学医学院张灏教授带领的研究小组，调查了二甲双弧对人食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞的体外和体内作用。发现二甲双弧可选择性地抑制人类ESCC细胞的生长，还能诱
实验概要专一性细胞内寄生虫有复杂的逃避方式，特别是在阻止宿主细胞凋亡方面。为了研究牛艾美耳的这种能力，我们进行了体外研究，分别用牛胎儿肠胃细胞（BFGC）,牛脐静脉内皮细胞（BUVEC），非洲绿猴肾细胞（VERO）做宿主细胞。BUVEC和BFGC允许子孢子成熟为裂殖子，VERO细胞中子孢子存活几星期
苯骈呋喃衍生物类药物苯溴马隆是目前临床仅有的几种降尿酸药物之一，应用于高尿酸血症及痛风的治疗。苯溴马隆能够抑制肾小管对尿酸的再吸收，从而促进尿酸排泄，有效降低血中尿酸浓度作用。但由于苯溴马隆长期用药易导致患者肝毒性，近年来在欧美被限制使用。而苯溴马隆在中国、日本等高尿酸血症及痛风发病率较高的亚洲国家
脑胶质瘤是中枢神经系统最为常见且预后较差的原发性恶性肿瘤，占美国脑肿瘤注册中心统计所有脑和中枢神经系统肿瘤的31%，占恶性脑肿瘤和中枢神经系统恶性肿瘤的81%，每年发病率为5/100 000例，且呈逐年递增趋势。低级别胶质瘤（WHOⅠ、Ⅱ级）的中位生存时间为5～8年；高级别胶质瘤（WHO Ⅲ、Ⅳ
近期，医学物理中心戴海明研究员课题组，建立了肿瘤细胞对仅含BH3结构域蛋白质耐受的定量测量研究的新方法，相关成果以Measurements of BH3-only protein tolerance为题发表在细胞死亡的TOP期刊Cell Death and Differentiation（doi
斯克里普斯研究所的科学家们同时绘制出了细胞中两种最重要的蛋白质修饰类型的图谱，揭示了在凋亡这一重要细胞过程中它们之间广泛的协同作用。相关论文发表在7月20日的《细胞》(Cell)杂志上。 磷酸化(Phosphorylation)和蛋白质水解(proteolysis)几乎总是被独立开展研究。
支气管哮喘（哮喘）是一种常见的慢性气道炎症性疾病，这种慢性炎症反应是由肺结构细胞（如上皮细胞、成纤维细胞及内皮细胞等）、炎症细胞（如嗜酸粒细胞、肥大细胞、嗜中性粒细胞及T-淋巴细胞等）和炎性介质等共同参与、相互作用的结果。外泌体是纳米大小由膜包绕的囊泡，其可通过旁分泌等途径在细胞间传递信息并调节
遗传与发育学研究所分子与发育生物学重点，中科院社生物物理学研究所国家大分子实验室，中科院研究生院组成的研究小组在凋亡研究方面取得进展，相关成果文章Retromer Is Required for Apoptotic Cell Clearance by Phagocytic Rece
中科院遗传与发育生物学研究所分子与发育生物学重点实验室，中科院社生物物理学研究所国家大分子实验室，中科院研究生院组成的研究小组在细胞凋亡研究方面取得进展，相关成果文章Retromer Is Required for Apoptotic Cell Clearance by Phagocytic R
急性髓性白血病（AML）的患者或许找到了治疗疾病的希望，近日，刊登在国际杂志Science Translational Medicine上的一项研究报告中，来自伊丽莎-霍尔研究所(Walter and Eliza Hall Institute)的研究人员通过研究发现了一种新型方法可有效杀灭恶性增
4 建立病原作基因的表达模型 由于病原体的基因组规模相对较小，可用包含其全部基因的DNA 芯片鉴定那些对人产生毒害作用的基因。异烟肼（isoniazid，INH）是治疗肺结核的常用药物，其治疗结核病的机制是它阻断了分枝茵酸的生物合成途径。Wilson等根据已测序的肺结核杆菌基因组序列，用PCR
目的：通过特异性阻断PI3K和mTOR，观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变，探讨相关的分子机制。 方法：在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上，以免疫印迹方法（Western blot）检测各细