激光扫描共聚焦显维镜定量分析的优势和注意事项

激光扫描共聚焦显微镜与图像半定量分析相比,具有以下优点: 1.更精细、精确度更高。激光扫描共聚焦显微镜对免疫荧光组织化学染色样品做定量分析时,利用激光聚焦和系统软件分析对组织进行深层扫描,不破坏组织细胞结构,可深层次准确定位并精确定量。而一般图像分析只是以荧光灰度的差别变化进行半定量分析。 2.激光扫描共聚焦显微镜一般有两个以上不同波长的激光管,只要将标本标记上不同波长的荧光,就可以在同一张切片上同时分析两种或更多不同指标的变化,并比较它们之间的比值变化,精确而又方便,这一特点是一般图像分析无法比拟的。 3.激光扫描共聚焦显微镜可根据需要提供纯荧光、白光以及荧光与白光合成图像等多种图像,远远优于一般图像分析。 4.以往免疫荧光染色多要求冰冻新鲜组织标本,用石蜡切片在普通荧光显微镜下观察,常因背景非特异性荧光过强影响观察结果。而石蜡标本来源广泛,适用于回顾性研究。激光扫描共聚焦显微镜可......阅读全文

Olympus-激光扫描共聚焦显微镜共享

仪器名称:激光扫描共聚焦显微镜仪器编号:A23000005产地:日本生产厂家:Olympus型号:FV3000RS出厂日期:20230216购置日期:20230216样品要求:共聚焦小皿、载玻片、玻璃底多孔板等所属单位:化学系>分析中心>光学显微成像放置地点:清华大学生命科学馆141固定电话:010

激光扫描共聚焦显微镜操作步骤

  1.观察步骤及仪器操作 根据实验要求制备样品完毕后。即可进行观察。基本步骤如下:  (1)开启仪器电源及光源:一般先开启显微镜和激光器,再启动计算机,然后启动操作软件,设置荧光样品的激发光波长,选择相应的滤光镜组块。以便光电倍增管(photo multiplier tube,PMT)检测器能得到

激光扫描共聚焦显微镜技术原理

光学显微镜作为细胞生物学的研究工具,可以分辨出小于其照明光源波长一半的细胞结构。随着光学、视频、计算机等技术飞速发展而诞生的激光扫描共聚焦显微镜 (Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),则使现代显微镜有能力研究和分析细胞在变化过程中的结构。特别是

激光扫描共聚焦显微镜的结构原理

激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,简称CLSM)是近代生物医学图象仪器。它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,以及在亚细胞水平上观察诸如

激光扫描共聚焦显微镜的背景介绍

  激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope)是20世纪80年代中期发展起来并得到广泛应用的新技术,它是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段渗透,并与传统的光学显微镜结合产生的先进的细胞分子生物学分析仪器,在生物及医学等领域的应用越来越广泛

激光扫描共聚焦显微镜的结构特点

激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,简称CLSM)是近代生物医学图象仪器。它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。

简述激光扫描共聚焦显微镜的功能

  三维图像的重建  传统的显微镜只能形成二维图像,激光扫描共聚焦显微镜通过对同一样品不同层面的实时扫描成像,进行图像叠加可构成样品的三维结构图像。 它的优点是可以对样品的立体结构分析,能十分灵活、直观地进行形态学观察,并揭示亚细胞结构的空间关系。  荧光漂白恢复技术  该方法的原理是一个细胞内的荧

激光扫描共焦显微镜技术及应用

l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机

生物显微镜激光扫描共聚焦显微镜概述

生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述激光扫描共聚焦显微镜(laser sconningconfocal microscope,LSCM)在生物医学领域的主要应用是通过一种或多种荧光探针标记后可对固定的组织或活体标本进行观察研究。当这些标本用普通荧光光学显微镜观察时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结

生物显微镜激光扫描共聚焦显微镜概述

生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述激光扫描共聚焦显微镜(laser sconningconfocal microscope,LSCM)在生物医学领域的主要应用是通过一种或多种荧光探针标记后可对固定的组织或活体标本进行观察研究。当这些标本用普通荧光光学显微镜观察时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结

激光扫描共聚焦显微镜使用说明

实验方法原理 激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。由于激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微

激光扫描共聚焦倒置显微镜概述

  激光扫描共聚焦倒置显微镜是一种用于基础医学领域的医学科研仪器,于2008年12月22日启用。  技术指标  1、激光器 Ar:458、476、488、514nm;HeNe Green:561nm;HeNe Red:633nm;405nm激光器 2、扫描部分  1)光学部分:激光扫描组件与所接显微

徕卡激光扫描共聚焦显微镜功能概述

一、图像处理功能 1.组织光学切片:共聚焦成像利用照明参与探测点火驱这一特件,可有效抑制同—焦平面上非测量点的杂散荧光及来自样品4非焦千向的荧光.从而获得普通光镜无法达到的分辨率,同时具有深度识别能力(zui大箔度’般为200一400ym)及纵向分辨率,因所能看到较厚生物标本中的细节。它以一个破动步

激光扫描共聚焦显微镜使用说明

激光扫描共聚焦显微镜可以:(1)光切片扫描、3D图像处理、时间序列拍摄成像;(2)细胞、绿荧光蛋白、生物荧光样品观察分析;(3)荧光原位杂交分析。实验方法原理激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫

激光扫描共聚焦荧光显微镜简介

  激光扫描共聚焦荧光显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前最先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。

荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡

  一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。  常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种染料与  DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的

激光共聚焦显微镜的优势是什么

  激光扫描共聚焦显微镜与传统宽场显微镜相比,具有高清晰度、高分辨率、高灵敏度等特点,在生物医学领域应用广泛,成为了该领域重要的成像工具。为什么共聚焦能得到如此多的宠爱,它又有哪些优势呢?本文列举了三方面来论述共聚焦的优势。  只收集焦平面上的信号,使图像由模糊变清晰   图一是花粉颗粒的自发荧光图

共聚焦激光扫描显微镜的应用pH值

pH值正常细胞胞浆内的pH一般在6.8~7.4的范围,而某些细胞器如溶酶体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、S

激光扫描共聚焦荧光显微镜的缺点

  标记染料的光漂白:为了获得足够的信噪比必须提高激光的强度;而高强度的激光会使染料在连续扫描过程中迅速褪色。  光毒作用:在激光照射下,许多荧光染料分子会产生单态氧或自由基等细胞毒素。限制扫描时间、激发光强度,以保持样品的活性。

共聚焦激光扫描显微镜的应用pH值

pH值正常细胞胞浆内的pH一般在6.8~7.4的范围,而某些细胞器如溶酶体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、S

激光扫描共聚焦荧光显微镜的优点

  激光扫描共聚焦荧光显微镜相对普通荧光显微镜的优点  (1):LSCM的图象是以电信号的形式记录下来的,所以可以采用各种模拟的和数字的电子技术进行图象处理:(2)LSCM利用共聚焦系统有效的排除了焦点以外的光信号干扰,提高了分辨率,显著改善了视野的广度和深度,使无损伤的光学切片成为可能,达到了三维

激光扫描共聚焦荧光显微镜的缺点

  标记染料的光漂白:为了获得足够的信噪比必须提高激光的强度;而高强度的激光会使染料在连续扫描过程中迅速褪色。  光毒作用:在激光照射下,许多荧光染料分子会产生单态氧或自由基等细胞毒素。限制扫描时间、激发光强度,以保持样品的活性。

关于激光共聚焦扫描显微镜的基本介绍

  激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)是显微镜的一种,激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量。  用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光

激光扫描共焦显微镜技术及应用(一)

样品要求:经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输

激光扫描共焦显微镜技术及应用(二)

五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度( pH值)的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用:细胞膜电位的测量      荧光漂白恢复(FRAP)的测量      笼锁解笼锁的测量     

激光扫描共聚焦荧光显微镜的常用激光器

  激光扫描共聚焦显微镜使用的激光光源有单激光和多激光系统,常用的激光器包括以下三种类型:  半导体激光器:405nm(近紫外谱线)  氩离子激光器:457nm、477nm、488nm、514nm(蓝绿光)  氦氖激光器:543nm(绿光-氦氖绿激光器)633nm (红光—氦氖红激光器)  UV激光

激光扫描共焦显微镜术的技术方法介绍

中文名称激光扫描共焦显微镜术英文名称laser scanning confocal microscopy定  义用激光作为光源的共聚焦显微镜技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别有哪些

激光共聚焦显微镜和扫描电镜的区别激光共聚焦显微镜和扫描电镜都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数。激光共聚焦显微镜是通过激光扫描的方式工作,可以获得三维图像。扫描电镜是利用细聚焦电子束在样品表面扫描时激发出来的各种物理信号来调制成像的,只能得到二维图像,不能得到三维图像。1、极限分

激光扫描共聚焦荧光显微镜的成像原理和基本结构

    激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。   成像原理   采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的

激光共聚焦扫描显微镜基本组成、特点

一、激光共聚焦显微镜的基本组成激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦