直接ELISA法
实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。实验步骤1. 包被抗原1) 用 PBS 或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度 20 μg/ml。用移液器吸取 50 μl 稀释抗原到 PVC 酶标板上,按要求往后进行系列稀释。2......阅读全文
示波器的直接测量法介绍
所谓直接测量法,就是直接从屏幕上量出被测电压波形的高度,然后换算成电压值。定量测试电压时,一般把Y轴灵敏度开关的微调旋钮转至“校准”位置上,这样,就可以从“V/div”的指示值和被测信号占取的纵轴坐标值直接计算被测电压值。所以,直接测量法又称为标尺法。 (1)交流电压的测量 将Y轴输入耦合开
ELISA标本处理不当直接影响实验操作
一、标本的影响 溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性。所以严重溶血标本
用肉眼可直接观察的新型Elisa技术介绍
由于考虑有些老师们没有时间或没有实验设备,上海劲马公司提供elisa试剂盒的专业代测服务,可缓解有些实验室的资金问题。而根据*新资讯与发现,研究人员开发了新型Elisa酶联免疫吸附技术,当抗体识别目标分子时这种酶就会生成有色物质,用肉眼可直接观察,下面是这种新型的Elisa技术介绍:[新型Elisa
脑的基因转移:间接体内法和直接体内法
实验材料 遗传修饰细胞的培养成年宿主小鼠聚烯吡酮磺溶液试剂、试剂盒 麻醉剂仪器、耗材 小鼠大脑图片集耳打孔器带有电极操作的脑定位支架以及汉密尔顿注射夹外科用具bulldog 磁夹海绵中号镊子伤口夹26G针汉密尔顿注射器实验步骤 1.为移植开始培养基因修正的细胞,收获 80%~90% 的汇合度的细胞。
阴道毛滴虫检查方法直接涂片法培养法评价
1.直接涂片法 将阴道分泌物与少许生理盐水混合涂片,高倍镜下观察。直接湿片高倍镜检查法简便易行,是最常用的方法。阳性诊断率较低(约50%)。革兰或瑞特染色油镜观察可提高检出率。标本送检应注意保温。 2.胶乳凝集快速检查法(LAT) 本法操作简便、快速,敏感性和特异性高,优于直接湿片镜检和培养法
免疫测定ELISA法
ELISA法是细胞因子首选检测法,可作定性或定量分析。双抗体夹心法是用于细胞因子测定的最常用方法,该法使用的抗体可以是针对同一抗原的多克隆抗体,也可以是针对同一抗原的不同抗原表位的单克隆抗体。 细胞因子测定的标本主要包括两大类,一是血清(血浆)、关节液等体液,可用于细胞因子和可溶性黏附分子的检
ELISA法检测丝虫抗体
丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制
大鼠Ghrelin-ELISA检测法
大鼠Ghrelin ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Ghrelin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Ghrelin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Ghrelin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化
什么是布ELISA法?
(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面
ELISA法检测细胞凋亡
(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特
ELISA法测细胞凋亡
细胞凋亡时,Ca2+,Mg2+离子依靠的内源性核酸内切酶将双链DNA从各核小体间连接区裂断,发生单或寡合苷酸小体,各核小体的DNA与核组蛋白H2A,H2B,H3,H4构成严密的复合物而对内源性核酸酶有抵抗使之不被内源性核酸酶裂解。主要运用单克隆抗DNA抗体和抗组蛋白抗体直接检测DNA和组蛋白。愈加安
蛋白复合体直接酶消化法
Direct Enzymatic Digestion of Protein ComplexesSherry Niessen, Ian McLeod and John R. Yates IIIDepartment of Cell Biology, The Scripps Research Instit
转基因植物的直接转入法
这是将裸露的DNA直接导入植物细胞,然后将这些细胞在体外培养再生出植株。裸露的DNA的转化效率较低,因而要辅之以高效率的组织培养系统。 植物细胞有一层很厚的细胞壁,因此需先去除植物细胞壁,使之成为原生质体,然后用来直接转入外源DNA。当然,也可用机械的方法将DNA直接注入植物细胞而毋须去除细胞
相差显微镜直接计数法
相差显微镜直接计数法是临床医学检验技士需要了解的知识,现医学|教育网整理相关知识如下: 相差显微镜直接计数法:用草酸铵作稀释液,在明显的显微镜下进行计数,并可于照相后核对计数。此法准确性高,血小板易于识别。
酵母菌直接镜检计数法
适用于由酵母菌引起变质的食品。方法是利用血细胞计数板,取一滴美蓝染色液医学教育|网,从计数板盖片一侧滴入计数池,计数5个中格中的酵母细胞数,着色的细胞为死细胞,不着色的细胞为活酵母细胞,可分别计数,按下面公式计算: 酵母数(个/ml)=5个中格(80个小格)内酵母数 *稀释倍数*10(6)/2
基因定位方法介绍直接观察法
易位(见染色体畸变)使染色体上的基因改变连锁关系,所以易位可以用来进行基因定位。如果易位所涉及的染色体是可以被识别的,那就更有利于定位工作。如果在遗传学分析中发现某两个连锁群的连锁关系都发生了改变,同时在显微镜下又可以辨认出有两个染色体发生了相互易位,那么就可以知道两个连锁群和两个染色体的对应关系。
蛋白质的直接定量(UV法)
蛋白质的直接定量(UV法) 分光光度计原理说明的这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要消除
基因测定的方法直接观察法
直接观察法易位(见染色体畸变)使染色体上的基因改变连锁关系,所以易位可以用来进行基因定位。如果易位所涉及的染色体是可以被识别的,那就更有利于定位工作。如果在遗传学分析中发现某两个连锁群的连锁关系都发生了改变,同时在显微镜下又可以辨认出有两个染色体发生了相互易位,那么就可以知道两个连锁群和两个染色体的
电子天平直接称量法说明
电子天平直接称量法说明称量方法常用的称量方法有直接称量法、固定质量称量法和递减称量法,现分别介绍如下。1.直接称量法此法是将称量物直接放在天平盘上直接称量物体的质量。例如,称量小烧杯的质量,容量器皿校正中称量某容量瓶的质量,重量分析实验中称量某坩埚的质量等,都使用这种称量法。2.固定质量称量法此法又
微生物的显微直接计数法
一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能.二、实验原理测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法.显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨.菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼
直接碘量法的注意事项
(1)碘具有挥发性,所以碘量瓶严密,瓶口水封(2)滴定速度适当,不宜过快(3)反应时间要求严格,必须在规定的时间完成(4)避光直射.
微生物的显微直接计数法
一、实验目的 了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能.二、实验原理 测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法. 显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨.菌体较大的酵母菌或霉菌孢
直接免疫荧光法测抗原
基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,
关于无菌检查法—直接接种法的基本介绍
1、直接接种法供试品准备、 供试品如为注射液、供角膜穿通伤及手术用的滴眼剂或灭菌溶液,按表1或表2规定量取供试品,混合。 供试品如为注射用无菌粉末或无菌冻干品或供直接分装成注射用的无菌粉末原料,按表1或表2规定量取供试品,加入无菌水或0.9%无菌氯化钠溶液,或该药品项下规定的溶剂用量制成一定浓
ELISA常用检测法——竞争法原理介绍
做ELISA实验,有几种常见的实验方法,他们分别是竞争法、捕获法、间接法、夹心法、而夹心法又可以分为双抗体夹心法和双抗原夹心法!在今天的文章中,将详细得跟大家讲述竞争法的实验原理!竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法,这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法,其基本原理是:将合适浓度的包被抗
布ELISA法的主要程序
⑴ 首先把抗布氏杆菌的血清包被(吸附)在聚脂布上,并经洗涤及封闭;⑵ 加被检样品并于室温下感作30分钟,然后洗5次;⑶ 加酶标记的抗布氏杆菌抗体,于室温下感作30分钟,然后洗涤5次;⑷ 加入底物液显色;⑸ 测定OD值。
大鼠GRO(GRO)ELISA检测法
大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 GRO/CINC-1/KC(CXCL1) 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GRO与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GRO,形成免疫复合物连接在板上,
大鼠Fractalkine(Fractalkine)ELISA检测法
大鼠Fractalkine(Fractalkine)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠Fractalkine 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Fractalkine与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Fra
大鼠Chemerin(Chemerin)ELISA检测法
大鼠Chemerin(Chemerin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Chemerin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Chemerin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Chemerin,形成免疫复
ELISA法检测肺炎衣原体
ELISA法检测肺炎衣原体 肺炎衣原体感染广泛存在于全世界,以隐性感染为主。其临床表现多样,主要引起人非典型肺炎,还可引起咽炎、支气管炎、虹膜炎、肝炎、心内膜炎及结节性红斑等,亦是艾滋病、白血病等疾病继发感染的重要病原,且与冠心病的发生相关,严重威胁人类健康。常见检查方法为ELISA法检测肺炎衣