直接ELISA法

实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。实验步骤1. 包被抗原1) 用 PBS 或碳酸盐缓冲液稀释抗原至终浓度 20 μg/ml。用移液器吸取 50 μl 稀释抗原到 PVC 酶标板上,按要求往后进行系列稀释。2......阅读全文

直接-ELISA法

实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的

直接ELISA法

实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的

酶联免疫吸附实验—直接细胞ELISA法检测细胞表面抗原

实验步骤直 接 细 胞 ELISA 法检测细胞表面抗原在测定单一细胞群体的抗原表达水平时,该 检 测 过 程(图 1.1. 5 ) 与流式细胞分析一 样 灵 敏(单 元 4.1、单 元 4. 2)。但在检测混合细胞时,敏感性不及流式细胞分析。用生物素化的抗体替代酶标抗体,就可转化为间接方法,而后加入

ELISA法

ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。由于测定中需要酶标记抗原或抗体,酶分子与抗原或抗体分子的结合物可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。常用的ELISA分析1)   测定抗原A  将抗体吸附于固相表面,这个过程叫包被。B

使用荧光底物的直接-ELISA-实验

实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天:1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后,在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板,将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天:2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中,使用其

粪便直接涂片法实验

1、洁净玻片上加等渗盐水1-2d,选择粪便的不正常部位,或选取不同部位粪便直接涂片.2、最好取大玻片,在涂片后应盖以盖片,涂片厚度以能透过印刷物字迹为准.仪器、耗材载玻片实验步骤1、洁净玻片上加等渗盐水1-2d,选择粪便的不正常部位,或选取不同部位粪便直接涂片.2、最好取大玻片,在涂片后应盖以盖片,

粪便直接涂片法实验

仪器、耗材 载玻片实验步骤 1、洁净玻片上加等渗盐水1-2d,选择粪便的不正常部位,或选取不同部位粪便直接涂片.2、最好取大玻片,在涂片后应盖以盖片,涂片厚度以能透过印刷物字迹为准.3、在盘片中发现疑似包囊应加一滴碘液。4、卵的报告方式、有几种报几种5、注意、白细胞、红细胞、嗜酸性粒细胞

直接碘量法介绍

直接碘量法是用碘滴定液直接滴定还原性物质的方法。在滴定过程中,I2被还原为I:滴定条件:弱酸(HAc ,pH =5 )弱碱(Na2CO3,pH =8)溶液中进行;如果溶液pH>9,可发生副反应使测定结果不准确。强酸中: 4I-+ O2(空气中) + 4H+= 2I2+ H2O强碱中: 3I2+ 6O

ELISA直接法和间接法优缺点

直接法(direct ELISA)将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。间接法(indirect ELISA)此测定方

间接-ELISA法

实验概要Enzyme  linked immunosorbent  assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van  Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测

间接-ELISA法

实验概要Enzyme  linked immunosorbent  assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van  Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测

ELISA法介绍

经典的化学分析方法(如滴定分析、重量分析、分光光度法)能对化学体系组分进行常量或微量分析,而对复杂生物体系的微量成分的测定往往力不从心。在此背景下,科学家研发了一系列测定生物体系成分含量的方法,其中免疫化学法(如酶联免疫法、免疫荧光法、放射免疫法)因具有高特异性、超微量分析生物体有机成分的特点而得到

在定量测定抗原时,直接elisa与间接elisa有何区别

直接竞争ELISA和间接竞争ELISA区别  1、直接竞争,标记抗原,与检测样品中的抗原竞争抗体。  2、间接竞争,标记抗体,固相抗原与液相抗原(样品)竞争标记抗体。  3、定义  间接竞争法的模型:包被抗原,用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab,固相吸附的H

粪便的直接检查法

1.蠕虫卵检查法在洁净的载玻片中央滴加1–2滴生理盐水,用竹签挑取火柴头大小的粪便,置于生理盐水中涂抹均匀,加上盖玻片镜检。2.活滋养体检查法用竹签挑取粘液脓血粪便,涂成较薄的粪膜,便于镜下观察滋养体的活动情况。冬季须注意保温。

直接电位法的定义

直接电位法是利用专用电极将被测离子的活度转化为电极电位后加以测定,如用玻璃电极测定溶液中的氢离子活度,用氟离子选择性电极测定溶液中的氟离子活度(见离子选择性电极)。

直接电位法的应用

   直接电位法是一种简便而快速的分析方法。电极电位与被测物质浓度之间的能斯特方程式(2.4-10)是定量分析的基本关系式。测量时,用离子选择电极和参比电极浸人入试液中构成测量电池,测得电动势。由于接液电位的存在,膜电极的不对称电位存在以及活度系数难以计算,-般不能通过测得电池电动势直接利用式(2.

粪便的直接检查法

实验步骤1.蠕虫卵检查法在洁净的载玻片中央滴加1–2滴生理盐水,用竹签挑取火柴头大小的粪便,置于生理盐水中涂抹均匀,加上盖玻片镜检。2.活滋养体检查法用竹签挑取粘液脓血粪便,涂成较薄的粪膜,便于镜下观察滋养体的活动情况。冬季须注意保温。

粪便常规检查(直接涂片法)

1. 实验原理:本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状,以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备:无须特殊准备。2.2 标本种类:粪便2.3 标本要求:标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。3. 标

直接电导法的应用

   直接电导法主要应用于在哪几方面呢?接下来请大家认真了解一下。   1)水质检验 用于锅炉用水、工业废水、天然水、实验室制备去离子水及蒸馏水的质量检测。电导率越低,水的纯度越高。但不能检测水中的非导电性物质,如细菌、藻类、悬浮物等,以及非离子状态的杂质。检测时要针对不同情况选用合适的电导电极。

什么是DNA直接转化法

通过生物学、物理学和化学等方法使外源裸露DNA进入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持和表达的过程称为转化。如果外源DNA分子是病毒(噬菌体)的DNA或cDNA,那么把此过程也称为转染。(1)直接转化法:有的微生物细胞在不加任何处理的情况下就能直接摄取外源DNA,只要外源DNA与这样的细胞混合,在适宜的

ELISA试剂盒是否可以直接检测标本?

  在ELISA科研检测中,血清血浆是非常常见的标本。而上海劲马技术专家说到,并非每个种属、指标的试剂盒都适用于直接检测血清血浆的。那么怎样知道elisa试剂盒是否可以直接检测标本?来看看下面的几个小测试吧:  1.如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测

使用一抗的直接-ELISA-实验方案

实验概要本实验提供了一个使用一抗的直接 ELISA 实验方案。主要试剂1. 碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液 (100 mM) 应将抗原或抗体在包被缓冲液中稀释,从而将它们固定到孔上: 3.03 g Na2CO3 6.0 g NaHCO3 1000 ml 蒸馏水 pH 9.62. PBS: 1.16 g

使用一抗的直接-ELISA-实验方案

实验概要本实验提供了一个使用一抗的直接 ELISA 实验方案。主要试剂1. 碳酸氢盐/碳酸盐包被缓冲液 (100 mM) 应将抗原或抗体在包被缓冲液中稀释,从而将它们固定到孔上: 3.03 g Na2CO3 6.0 g NaHCO3 1000 ml 蒸馏水 pH 9.62. PBS: 1.16 g

使用荧光底物的直接-ELISA-实验方案

实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天:1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后,在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板,将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天:2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中,使用其

ELISA法检测立克次体

ELISA法检测立克次体 立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾病。临床上常见的有普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病立克次体和Q热立克次体

用肉眼可直接观察的新型Elisa技术介绍

由于考虑有些老师们没有时间或没有实验设备,上海劲马公司提供elisa试剂盒的专业代测服务,可缓解有些实验室的资金问题。而根据*新资讯与发现,研究人员开发了新型Elisa酶联免疫吸附技术,当抗体识别目标分子时这种酶就会生成有色物质,用肉眼可直接观察,下面是这种新型的Elisa技术介绍:[新型Elisa

ELISA标本处理不当直接影响实验操作

一、标本的影响    溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性。所以严重溶血标本

烷基吡啶直接氧化法合成烟酸

烷基吡啶直接氧化法硝酸氧化法以硝酸为氧化剂,在钛材管式反应器中通入硝酸水溶液和MEP的混合物,在330℃、29MPa反应8h再分离、精制得到烟酸纯品。 [1] 空气氧化法空气氧化法以空气作为氧化剂直接氧化3-甲基吡啶合成烟酸,因其效率高、成本低的特点近年来备受关注。这一方法最早是在加有催化剂的烷基吡

基因测定方法直接观察法

易位(见染色体畸变)使染色体上的基因改变连锁关系,所以易位可以用来进行基因定位。如果易位所涉及的染色体是可以被识别的,那就更有利于定位工作。如果在遗传学分析中发现某两个连锁群的连锁关系都发生了改变,同时在显微镜下又可以辨认出有两个染色体发生了相互易位,那么就可以知道两个连锁群和两个染色体的对应关系。

酵母菌落直接质粒转化法

酵母菌落直接质粒转化法1.用牙签从平板中挑取单菌落(直径2~3mm),转移到1.5ml的无菌离心管中。2.将10μl载体DNA(100μg)与10μl转化质粒DNA混合,振荡均匀。(若转化DNA是用未经RNA酶处理的“mini-prep DNA”方法制得,则不需加载体DNA)。3.加0.5ml PL