石蜡切片载玻片的处理
1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:(1)APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位,并尽量减少气泡的存在,以免影响染色结果。(2)HistogripTM:将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的Histogrip液中,停留1~2分钟,然后用双蒸水快速清洗三次,室温干燥或60oC烤箱烘烤一小时,装盒备用。抗原(3)Poly-L-Lysine:将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中,浸泡5分钟,60℃烤箱烘烤一小时或......阅读全文
Hoechst染色方法
实验概要Hoechst可穿过细胞膜,可结合于活细胞或固定过的细胞。因此可用于活细胞标记。Hoechst染料溶于水和有机溶剂,如二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。浓度可高达10mg/mL。水溶液可在4℃避光保存至少6个月。长期储存于≤-20 ℃。Hoechst与DNA双链中的小沟(minor groove
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤1. 准备脱蜡/再水化系统(可重复使用数次)及0.2 m
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
实验材料 石蜡切片试剂、试剂盒 HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材 染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤 1. 准备脱蜡/再水化系统(可重复使用数次)及0.2 mol/l HCl同时,将载有切片样品的载玻片(玻片盒中,于-20℃或-70℃贮存)置
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
实验材料 石蜡切片 试剂、试剂盒 HCl 二甲苯 乙醇 SSC
冰冻切片固定实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PFAPBS乙醇仪器、耗材 加湿盒实验步骤 1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 min。2. 吸去固定液,用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片,
激光共聚焦显微镜检测的实验方法
1. 悬浮细胞染色后,滴一滴细胞悬液于载玻片上,用盖玻片盖上细胞,荧光显微镜下观察。2. 贴壁细胞可以象悬浮细胞那样染色后,滴一滴细胞悬液于载玻片上,用盖玻片盖上细胞,荧光显微镜下观察。贴壁细胞也可以先在盖玻片上培养(根据盖玻片大小,置于24孔或12孔细胞培养板内),然后诱导细胞凋亡。染色细胞在细胞
拉曼光谱制样要求
由于拉曼光谱测量可实行无损伤直接测量,所以有些送往实验室供检验的样品可以不必制样直接用作试样进行测量。 (1)液体试样:测液体试样时,用滴管吸取一两滴滴到载玻片上,对于易挥发的或者有腐蚀性的样品,应将其注入到毛细管密封后再进行测量。易光解的样品装入旋转装置的样品池中,利用样品架转调节样品。深色
细菌染色方法一网打尽,一文读懂解细菌染色的方法!
涂片及染色是微生物学的基本技术,也是观察细菌最简单且行之有效的方法。通常情况下,由于细菌个体较小,较透明或半透明,如未经染色往往不以观察识别。因此借助于染色法可以使细菌着色,与视野背景形成鲜明对比,从而易于在显微镜下进行观察。 常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚
细菌染色方法
涂片及染色是微生物学的基本技术,也是观察细菌最简单且行之有效的方法。通常情况下,由于细菌个体较小,较透明或半透明,如未经染色往往不以观察识别。因此借助于染色法可以使细菌着色,与视野背景形成鲜明对比,从而易于在显微镜下进行观察。 常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚
常见细菌染色方法
常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚膜染色、死活染色。制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤,然后用显微镜甚至油镜观察。 简单染色: 为准不同细菌或者由于观察者所侧重观察的内容不同,所以使用的染料也有差异,
常见细菌染色方法
常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚膜染色、死活染色。制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤,然后用显微镜甚至油镜观察。简单染色:不同细菌或者由于观察者所侧重观察的内容不同,所以使用的染料也有差异,但是简单染色的方法是一样的。先按照上述的制片方
核酸探针标记及原位杂交3
3.注意事项(1)避光下准备反应体系:由于光敏生物素醋酸盐对光敏感,应避免光照。在分装试剂及核酸与光敏生物素混合时应在暗室安全灯下操作。(2)核酸纯度:由于光敏生物素能与任何有机物反应,因此用做标记探针的核酸要高度纯化。用作标记探针的核酸最好不用Tris溶液溶解,Tris中所含氨基会干扰标记。(3)
植物细胞的活体染色与死活鉴定
一、原理活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染料之一,它是一种弱碱性pH指示剂,变色范围在pH6.4-8.0之间(由红变黄)。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,由于液泡在一般情况下呈酸性反应。因此,进入液泡的中性红便解离出大
植物细胞的活体染色与死活鉴定
一、原理活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染料之一,它是一种弱碱性pH指示剂,变色范围在pH6.4-8.0之间(由红变黄)。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,由于液泡在一般情况下呈酸性反应。因此,进入液泡的中性红便解离出大
组织芯片的制备——冰冻组织芯片
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒OCT 包埋剂切片黏合剂仪器、耗材1 mm 孔径针载玻片实验步骤将每个需要制备 TMA 的新鲜组织,不经固定包埋在 OCT 包埋剂中, -20℃ 中冻成块。另外,再将 OCT 包埋剂倒在长 3 cm×宽 1.5 cm×高 lcm 的模具中, -20℃ 中冻成块。用特制的
蓝色荧光染色体核型分析试剂盒使用说明
YIJI蓝色荧光染色体核型分析试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI蓝色荧光(DAPI)染色体核型分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与染色体DNA的结合并发出荧光检测信号来显示染色体带型特征而构成细胞染色体核型的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的
蓝色荧光染色体核型分析试剂盒使用说明
主要用途YIJI蓝色荧光(DAPI)染色体核型分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与染色体DNA的结合并发出荧光检测信号来显示染色体带型特征而构成细胞染色体核型的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。该荧光分析是细胞遗传学中的最新研究技术。适用于各种生长中的动物或人体细胞。
免疫荧光技术之荧光显微镜检查方法
1、荧光显微镜荧光显微镜是免疫荧光组织化学的基本工具,分透谢和落射二种类型,落射光无需镜内操作,方便、效果更好。它是由超高压光源、滤板系统(包括激发和压制滤板)和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。 本文来自检验地带网2、荧光显微镜
溶血空斑实验
实验方法原理 溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC
如何选择购买孢子捕捉仪?
随着孢子捕捉仪的应用领域越来越广泛,有太多的孢子捕捉仪厂家层出不穷,这样就导致了市场的混乱,质次价低的产品出现,质量也无法得到保障。我们应该如何来辨别优质的厂家与商品成了一大难题。 以往的捕捉方法和捕捉器采用涂抹凡士林的载玻片或胶棒作捕捉载体。这两种捕捉载体都不适于连续捕捉。借鉴产孢量测定方法中的粘
读数显微镜对光时应首先干什么
读数显微镜对光是使用显微镜时很重要的一步,有些学生在对光时,随便转一个物镜对着通光孔,而不是按要求一定用低倍镜对光。转动反光镜时喜欢用一只手,往往将反光镜扳了下来。所以教师在指导学生时,一定要强调用低倍镜对光,当光线较强时用小光圈、平面镜,而光线较弱时则用大光圈、凹面镜,反光镜要用双手转动,当看到
肛门拭子检查法的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群: 一般无不适合人群。 检查前禁忌: 检查前不要吃抗寄生虫的药物,以免影响结果。 检查时要求:一般在清晨醒后或午睡后、便前、洗澡前进行检查,如首次检查阴性,可连续检查2-3天。 检查过程 常用方法有棉签拭子法和透明胶纸法。 (1)棉签拭子法:先将棉签浸入生理盐水中
罗丹明的基本特性
1. 外观:红棕色粉末2. 纯度:≥95% (HPLC)3. 产品描述:Rhodamine 123是一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料,呈黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位,也常用于细胞凋亡检测。它可以快速通过细胞膜,仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获,并且对细胞没有任何毒
细胞器的光镜观察(1)
[实验用品] 1.材料:洋葱鳞茎、口腔上皮细胞、盖片培养的单层动物细胞、蟾蜍肾脏切片;猫或兔的脊神经节切片、马蛔虫子宫切片。 2.器具:光学显微镜、载玻片、盖玻片、小镊子、吸管、牙签、吸水纸、擦镜纸、剪刀、恒温水浴箱、小培养皿、小染色缸、大平皿。 3.试剂:中性红-詹纳
植物徒手切片与植物细胞结构观察
[目的要求] 1.掌握植物 徒手切片技术。 2.观察认识植物细胞的基本结构,质体的形态。 3.认识和鉴定植物细胞内常见的后含物。 [材料用品] 材料:洋葱鳞茎或番茄果实、葫芦藓叶、红辣椒、鸭跖草叶片、马铃薯块茎、蓖麻种子、花生种子。 用品:I-KI溶液、苏丹溶液、显微镜
植物徒手切片与植物细胞结构观察
[目的要求] 1.掌握植物 徒手切片技术。 2.观察认识植物细胞的基本结构,质体的形态。 3.认识和鉴定植物细胞内常见的后含物。 [材料用品] 材料:洋葱鳞茎或番茄果实、葫芦藓叶、红辣椒、鸭跖草叶片、马铃薯块茎、蓖麻种子、花生种子。 用品:I-KI溶液、苏丹溶液、显微镜
FISH-检测乳腺癌中-HER2-扩增实验
基因扩增经常在人肿瘤细胞中被检测到并在肿瘤发生中起重要的作用。用比较基因组杂交对肿瘤细胞进行全基因组扫描,揭示出在实体肿瘤基因组的许多区域有基因拷贝数的改变。对改变区域 DNA 的深入研究显示在实体瘤中复杂的 DNA 重排涉及多个基因并跨越几个 Mb。在染色体倍体变化中,经常伴有基因重排。尽管研究
原生质运动的观察实验
实验方法原理 在生活细胞内,原生质的活跃运动现象统称为原生质运动。原生质运动是生活细胞的重要标志之一。原生质可以在细胞内流动,也可以通过胞间连丝穿流于细胞与组织之间,有时并非全部原生质都参与运动而仅限于局部细胞质,往往原生质表面的透明层(Hyaloplasm)处于静止状态。原生质运动在所有生活细胞中
原生质运动的观察实验
实验方法原理在生活细胞内,原生质的活跃运动现象统称为原生质运动。原生质运动是生活细胞的重要标志之一。原生质可以在细胞内流动,也可以通过胞间连丝穿流于细胞与组织之间,有时并非全部原生质都参与运动而仅限于局部细胞质,往往原生质表面的透明层(Hyaloplasm)处于静止状态。原生质运动在所有生活细胞中均
盖玻片的功能介绍
盖玻片的主要功能是保持固体样品平压,液体样品成形为均匀厚度的平坦层。 这是很必要的,因为高分辨率显微镜的焦点非常窄。盖玻片通常还具有其他几个功能。 它将样品保持在适当位置(通过盖玻片的重量,或者在潮湿的安装的情况下,通过表面张力),并保护样品免受灰尘和意外接触。 它保护显微镜物镜接触样品,反之亦然;