关于巴氏吸管你了解多少？
巴氏吸管，是一种两端开口的玻璃管(通常内径约5毫米)，管的一端拉细，内径较小(1毫米或更小，另一端装橡皮头）主要运用于非定戛地转移液体，但是，它可以由一计数氟毫升转移的液滴数来“校正”，例如，对犯滴/毫升的比率而言，每滴约Q.U2毫升。在使用前用棉塞插人巴氏吸管的粗端，然后灭菌，用此法堵塞的吸管，其转移的液体可避免微生物的污染。在微生物学研究中，刻度(分析)吸管，因同样的原因也要用棉塞堵住。然而今天我们要了解的主角是他的好兄弟，一次性巴氏吸管，精选医用级LDPE原料制成，适用于少量的吸取和转移。表面张力优化处理，液体的流动性强，更易于操作。透明度好，带刻度线，便于观察。具有一定的弹塑性，可以在一定的角度内弯曲，有利于进入微量货异性容器进行取液或加液等操作。弹性好，不易破裂，适用于快速移液。使用方便，准确可靠，滴量的可重复性好。管端可热封，用于少量液体的运送。这些都是咱们一次性吸管的优势所在毋庸置疑一次性巴氏吸管的优势也是很明显的......阅读全文
植物细胞叶绿体DNA的分离纯化
实验方法原理本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液蔗糖溶
植物细胞叶绿体DNA的分离纯化
实验方法原理 本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料 植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒 缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液
大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——酶消化法
实验材料小鼠试剂、试剂盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培养液仪器、耗材培养箱实验步骤一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤1. 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min，解剖出完整鼠脑。2. 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗，用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。3.
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物（10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体）ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白（HAG。用P
有关硅烷化试剂使用中的注意事项
硅烷化试剂在GC分析中用途很大。许多被认为是不挥发性的或在200～300℃热不稳定的羟基或氨基化合物经硅烷化后成功地进行了色谱分析。硅烷化作用是指将硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氢。活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，减少了氢键束缚。因此所形成的硅烷化衍生物更容易挥发。同时，由于含活性氢的反
有关硅烷化试剂使用中的注意事项
硅烷化试剂在GC分析中用途很大。许多被认为是不挥发性的或在200～300℃热不稳定的羟基或氨基化合物经硅烷化后成功地进行了色谱分析。 硅烷化作用是指将硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氢。活性氢被硅烷基取代后降低了化合物的极性，减少了氢键束缚。因此所形成的硅烷化衍生物更容易挥发。同时，由于含活性氢的
树突细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年，其间只经过了微小的修改（Steinman衫aZ.， 1979)材 料（带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液（见辅助方案）高密度牛血清白蛋白（BSA) 溶液R P M
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料绒毛样本试剂、试剂盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气增湿器空
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料 绒毛样本试剂、试剂盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺 枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材 无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气
肝素Sepharose－CL2B－的制备实验
试剂、试剂盒SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰（CNBr)(AldrichChemica
肝素Sepharose－CL2B－的制备实验
试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl 尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤 材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰（CNBr)(AldrichChem
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
胰岛素受体的溶解及活性测定实验 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜 牛血清白蛋白 [125I]
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜（得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白（BSA,1%)[125I] 胰岛素
肝素Sepharose－CL2B－的制备实验
肝素-Sepharose CL-2B 的制备实验 试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B 乙腈
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用于染色体分析的妊娠产物及其他固体组织来源样本的...
用于染色体分析的妊娠产物及其他固体组织来源样本的培养及制备实验实验材料 组织样本试剂、试剂盒 含标准抗生素的 HBSS 溶液仪器、耗材 完全培养基培养皿解剖器械 塑料组织培养瓶实验步骤 基本方案1.用无菌解剖器械将组织标本放入含有5 mlHBSS及5倍浓度抗生素的35 mm 培养皿中。室温下放置>3
妊娠产物及其他固体组织来源样本的培养及制备实验
实验材料组织样本试剂、试剂盒含标准抗生素的 HBSS 溶液仪器、耗材完全培养基培养皿解剖器械塑料组织培养瓶实验步骤基本方案1.用无菌解剖器械将组织标本放入含有5 mlHBSS及5倍浓度抗生素的35 mm 培养皿中。室温下放置>30 min。2.将组织标本转移至一个新的含有约 2 ml 完全培养基/F
有关细胞生长状况指标的检测方法
摘要： 细胞计数这是细胞培养中常用的基本技术之一,所用材料为细胞计数板、巴氏吸管和显微镜,步骤如下. 一、细胞计数 这是细胞培养中常用的基本技术之一.所用材料为细胞计数板.巴氏吸管和显微镜.步骤如下. 取清洁计数板和专用盖玻片,用丝绸布轻轻擦干. 取细胞悬液0.3ml,加入0.9结晶紫染液,混匀后滴
成年猪胰岛分离纯化方法的优化
实验试剂胶原酶V，512 kut/mg(Sigma公司)，DNA酶(Sigma公司)，胎牛血清(Gibco公司)，RPMI1640培养液(Gibco公司)，Dextran(Pharmacia公司)，Hanks平衡盐溶液(Gibco公司)。实验设备离心机，注射器，显微镜，超净工作台等。实验材料成年杂种
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验——hES－细胞的手工传代
实验步骤方 案 2.7 h E S 细 胞 的 手 工 传 代试剂与材料无菌或无菌制备□ 生 长 于 M E F 之上的未分化的 h E S 细胞集落□ 新 鲜 的 M E F 板（最好是在失活处理后 1〜3 天内）□ h E S 培 养 基（见 2. 2. 1 节）□ 50 ul加样器枪头□玻璃巴
平衡法选择高亲和力噬菌体抗体
[器材和试剂] ● 链霉亲和素磁珠（DynabeadsM280,Dynal） ● 磁性1.5ml试管架（Dynal） ● 磷酸盐缓冲液（PBS） ● 2%脱脂奶粉PBS（2%MPBS） ● 生物素化试剂盒 ● 含0.1为Tween-20的PBS（PBS/Tween） ● 100mmol/L HCI
成年猪胰岛分离纯化方法的优化
实验试剂胶原酶V，512 kut/mg(Sigma公司)，DNA酶(Sigma公司)，胎牛血清(Gibco公司)，RPMI1640培养液(Gibco公司)，Dextran(Pharmacia公司)，Hanks平衡盐溶液(Gibco公司)。实验设备离心机，注射器，显微镜，超净工作台等。实验材料成年杂种
成年猪胰岛分离纯化方法的优化
实验概要本实验的目的是改良成年猪胰岛分离纯化技术，以优化胰岛制备方法。方法采用体、尾部区段猪胰腺胰管内灌注复合胶原酶震荡消化(胶原酶V加DNA酶)和改进的Dextran不连续密度梯度离心法分离纯化猪胰岛，并进行生物学活性测定和形态学观察。主要试剂胶原酶V，512 kut/mg(Sigma公司)，DN
单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
实验材料 蛋白质溶液团粒状细胞蛋白试剂、试剂盒 4X浓缩胶缓冲4X分离胶缓冲10X电泳缓冲液2XSDS-PAGE上样缓冲液正丁醇甲醇SDS储存液仪器、耗材 离心机电泳装置凝胶上样吸头玻璃板加热器实验步骤 一、灌制平板胶1.清洗玻璃板。a.将玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b
单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
蛋白质的SDS-PAGE实验 传统的考马斯亮蓝染色实验 快速考马斯亮蓝染色实验 InstaStain Blue 凝胶纸染色实验 InstaStain Blue 凝胶纸染色实验 SYPRO Ruby 荧光染色实验 SYPR
蛋白质的SDSPAGE实验
实验材料蛋白质溶液团粒状细胞蛋白试剂、试剂盒4X浓缩胶缓冲4X分离胶缓冲10X电泳缓冲液2XSDS-PAGE上样缓冲液正丁醇甲醇SDS储存液仪器、耗材离心机电泳装置凝胶上样吸头玻璃板加热器实验步骤一、灌制平板胶1.清洗玻璃板。a.将玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b.自来水
磷酸钙介导的高分子量基因组－DNA－转染细胞实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒 CaCl2甘油HEPES 盐缓冲液异丙醇NaCl基因组 DNA带有选择性标志的质粒细胞生长培养基仪器、耗材 聚乙烯试管Shepherd’s crook组织培养皿实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所浓度。Ca
磷酸钙介导的高分子量基因组－DNA－转染细胞实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物 试剂、试剂盒 CaCl2 甘油 HEPES 盐缓冲液
磷酸钙介导的高分子量基因组－DNA－转染细胞实验
下述方法是对 Graham 与 Van der Eb(1973) 建立的磷酸转方法的改进，用高分子量基因组 DNA 代替了质粒 DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用（Segeetal.1984,Kingsley et al.1986)。本实验来源于分子克隆
细胞培养板的选择和使用
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样。 你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？ 你是否正为如何方便、正确使用培养板而苦恼？ 你对如何处理培养板是否也有困惑？ 对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？ 细胞