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植物细胞叶绿体DNA的分离纯化

实验方法原理本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液蔗糖溶液乙酸钠乙醇仪器、耗材搅拌器冷冻离心机(Sorvall、Beckman等)笔刷(优质艺术笔刷)甩平式转头的超速离心机和合适的离心管恒温水浴锅用于酚抽提的50ml离心管30ml的离心管1.5ml的微量离心管微型离心机(1.5ml管)-20℃冰箱真空干燥仪实验步骤以下所有操作除特别指明外均在4℃进行。将搅拌器和离心管预冷,使用冷藏的缓冲液并在冰筒中操作。1.准备750ml缓冲液A,使用前往500ml缓冲液中加入BSA。2.收集25~30g健康的嫩叶,在提取之前可将植株置于黑暗中培养24~28h以降低淀粉含量。如果植物材料已被感染或弄脏了,......阅读全文

植物细胞叶绿体DNA的分离纯化

实验方法原理 本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料 植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒 缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液

离心机相关的分离知识汇总

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蛋白质组学在植物科学研究中的应用

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新一代测序在农业领域大放光彩

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2.2.3 绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离

实验方法原理利用差速离心,将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来,再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA,然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心,线粒体 RNA 沉淀下来。最

绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离

            实验方法原理 利用差速离心,将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来,再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA,然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖

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