胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素(受体级,DuPont NEN NEX 196)猪胰岛素〔17.5umol/L(0.1 mg/ml), 于 0.001mol/LHCl 中〕(Sigma Chemical Co.I3505)牛γ-球蛋白(0.4%,于溶液 B)(Miles Laboratories Co.82-041-2)聚乙二醇 6000(20% 水溶液)试剂溶液 B溶液 C结合缓冲液(溶解受体用)(配方,见"试剂的配制" PP.234~240)操作程序用 TritonX-100 溶解胰岛素受体比较 TritonX-100 与其他去垢剂从鼠肝质膜......阅读全文

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白 [125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 结合缓冲液仪器、耗材 Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤 材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

胰岛素受体的溶解及活性测定实验             试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜 牛血清白蛋白 [125I]

膜上胰岛素受体数量的测定实验

试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级) 牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰岛素 (受体级)

膜上胰岛素受体数量的测定实验

胰岛素可高亲和性地与其受体结合(KD~109mol/L),这一能力使我们能估测出甚至是相当粗制的制备物中的胰岛素受体数。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒结合缓冲液[125I] 胰岛素 (受体级)牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17

膜上胰岛素受体数量的测定实验

膜上胰岛素受体数量的测定实验             试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级)

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

本实验介绍胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I350

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

试剂、试剂盒 牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤 材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见“试剂的配制”,P

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见 试剂的配制  PP.234~240)操作程序1)于

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验标签: 胰岛素受体 [125I]胰岛素 蛋白质纯化与鉴定实验指南 第四单元 实验 5本实验介绍关于胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验实验方法原理 试剂、试剂盒

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体纯化的胰岛素受体[125I] 胰岛素猪胰岛素双琥珀酰亚胺酰辛二酸二甲亚砜NH4Cl甘油SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材蛋白质凝胶电泳装置干胶器实验步骤材料与设备纯化的鼠肝细胞质膜(见本单元实验 1)部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验             实验方法原理 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验             试剂、试剂盒 纯化的鼠肝细胞质膜 部分纯化的胰岛素受体

胰岛素受体糖基化的分析实验

本实验介绍关于胰岛素受体糖基化的分析。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的胰岛素受体内切糖苷酶 F内切糖苦酶 H神经氨酸酶甘油蛋白酶抑制剂储液内切糖苷酶 F 缓冲液内切糖苷酶 H 缓冲液神经氨酸酶缓冲液SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材凝胶电泳装置X-射线胶片和

胰岛素受体糖基化的分析实验

胰岛素受体糖基化的分析实验             试剂、试剂盒 纯化的胰岛素受体 内切糖苷酶 F 内切糖苦酶 H

胰岛素测定实验

实验材料 胰岛素标准品125 I-胰岛素试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机实验步骤 一、材料及试剂 1.  胰岛素标准品(不同浓度的) 2、125 I-胰岛素 3、抗血清 4、第二抗体 5、分析试剂  为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常

溶解受体的凝集素亲和层析实验

试剂、试剂盒 麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖溶解的胰岛素受体牛血清白蛋白[125I] 胰岛素(受体级)猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E结合缓冲液仪器、耗材 一次性小型塑料柱实验步骤 材料与设备麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖(~2.5 ml 沉积的微球)(Vector Laborat

溶解受体的凝集素亲和层析实验

本实验介绍关于溶解受体的凝集素亲和层析过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖溶解的胰岛素受体牛血清白蛋白[125I] 胰岛素(受体级)猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E结合缓冲液仪器、耗材一次性小型塑料柱实验步骤材料与设

溶解受体的凝集素亲和层析实验

溶解受体的凝集素亲和层析实验             试剂、试剂盒 麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖 溶解的胰岛素受体

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

免疫学实验抗胰岛素受体抗体介绍

抗胰岛素受体抗体介绍:  抗胰岛素受体抗体(IRA)是Flier等于1975年在研究合并黑色棘皮症的胰岛素抵抗综合征病人时发现的。此抗体可与存在于机体细胞膜上的胰岛素受体结合,而表现为对胰岛素的亲和性降低。检测IRA时常用传代人淋巴细胞IM-9(胞质膜上受体丰富,细胞易于获得)或人胎盘制备胰岛素受体

胰岛素受体底物的定义

胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS),参与胰岛素及其他细胞因子信号转导的磷酸化蛋白。IRS在被胰岛素受体磷酸化以后,如同一块“磁铁”与那些具有SH2结构域的蛋白结合,根据所结合蛋白的具体结构产生不同的效应,如激活SH2蛋白的酶活性、改变蛋白质构型并同另外的蛋

胰岛素受体的功能介绍

已知有三种胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物(IRSs)。第一种是胰岛素受体底物1(IRS1),是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括:PI(3)K、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(growthfactor rec

胰岛素的受体是什么

  胰岛素的受体是胰岛素受体: 一个四聚体,由两个α亚基和两个β亚基通过二硫键连接。两个α亚基位于细胞 质膜的外侧,其上有胰岛素的结合位点;两个β亚基是跨膜蛋白,起信号转导作用。无胰岛素结 合时,受体的酪氨酸蛋白激酶没有活性。当胰岛素与受体的α亚基结合并改变了β亚基的构型 后,酪氨酸蛋白激酶才被激活

胰岛素受体底物的概念

胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一种能够被激活的胰岛受体酪氨酸激酶的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基可被磷酸化,磷酸化的IRSs能够结合并激活下游效应物。